郝佳
- 作品数:8 被引量:21H指数:2
- 供职机构:中国农业大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学化学工程医药卫生更多>>
- 利用SMART方法快速克隆异黄酮代谢途径多基因的研究
- 2007年
- 采用改进的酸酚法提取高质量的大豆叶片RNA,利用SMART思想和方法构建大豆叶片全长cDNA文库,直接以一级库液稀释液为模版进行PCR,快速克隆得到异黄酮代谢途径相关的个基因。与传统的从DNA、RNA出发克隆基因,以及构建文库再进行基因筛选的克隆方法相比该方法得到的基因均为全长基因,适用于快速、简便的进行多基因全长克隆。
- 郝佳马会勤陈尚武
- 关键词:CDNA文库基因克隆
- 一种提高卵子体外成熟质量及体外受精后胚胎妊娠率的组合物、方法及其应用
- 本发明公开了一种提高卵子体外成熟质量及体外受精后胚胎妊娠率的组合物、方法及其应用。本发明针对卵母细胞体外成熟过程中代谢紊乱导致的体外成熟率低、后续胚胎发育潜能差等问题,提供包括维生素C、L‑肉碱和血小板生成素中两种以上调...
- 田见晖 席广银郝佳 岳媛王书敏安磊郭敏
- 一种提高卵子体外成熟质量及体外受精后胚胎妊娠率的组合物、方法及其应用
- 本发明公开了一种提高卵子体外成熟质量及体外受精后胚胎妊娠率的组合物、方法及其应用。本发明针对卵母细胞体外成熟过程中代谢紊乱导致的体外成熟率低、后续胚胎发育潜能差等问题,提供包括维生素C、L‑肉碱和血小板生成素中两种以上调...
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- 大豆异黄酮代谢途径在大肠杆菌中的构建与表达
- 大豆异黄酮(Soybean Isoflavones,SiF)具有多重保健与药理作用,是近年来各相关领域的研究热点。从大豆中分离提取异黄酮一直是大豆异黄酮的主要获得途径。作为植物天然次生代谢物,大豆异黄酮在大豆中含量并不高...
- 郝佳
- 关键词:大豆异黄酮基因克隆代谢途径大肠杆菌
- 文献传递
- 一种WNT2用于提高体外受精胚胎发育效率和质量的新用途
- 本发明提供了一种WNT2用于提高体外受精胚胎发育效率和质量的新用途,其是通过增强体外受精胚胎中WNT信号通路活性来提高体外受精胚胎的发育效率和质量。具体是将获得的受精卵转移到添加合适浓度WNT2的培养液中进行体外培养,有...
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- 大豆苯丙氨酸解氨酶(PAL)在大肠杆菌中的重组表达及活性鉴定被引量:14
- 2006年
- 利用基因重组技术,克隆了大豆(Glycinemax(L.)Merr.)的苯丙氨酸解氨酶(phenylalanineammonialyase,PAL)全基因,构建pET-GMPAL工程表达质粒,在大肠杆菌E.coliBL21(DE3)中进行诱导表达,并利用细胞裂解液得到的粗酶液转化L-苯丙氨酸生成肉桂酸。通过8%SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析表明,获得了分子量在77.9kD的一条蛋白质特异表达带,特异蛋白质表达量达到总蛋白质含量的8%左右。通过初步发酵,获到具有PAL活性的粗酶液裂解液,粗酶的比活力达到211.7μmol/gpro·min(3529μkat/kg),高于红酵母PAL和欧芹重组PAL表达的比活力。结果表明克隆重组的大豆PAL基因通过表达质粒pET-GMPAL在E.coli中能高效地表达为有催化功能的高活力酶。
- 宋柬马会勤郝佳任发政陈尚武
- 关键词:基因克隆肉桂酸
- 大豆异黄酮代谢途径在大肠杆菌中的构建及表达被引量:6
- 2007年
- 自然界异黄酮合成途径主要存在于豆科植物中。以微生物为宿主研究异黄酮代谢,则需要将整个相关代谢途径的多酶体系组装到工程菌种,从而进行表达及代谢研究,这就需要用到多基因的转化和共表达技术。综合应用了多基因单载体和多基因多载体方法,将大豆异黄酮代谢途径中的五个关键酶基因导入到大肠杆菌中,对异黄酮代谢途径在大肠杆菌中的构建和表达进行了研究和探索,获得了含有五个外源基因的重组大肠杆菌;重组菌经IPTG诱导,以L-酪氨酸为底物进行发酵,发酵产物经过HPLC测定,结果表明和空白对照相比有新的代谢产物生成,初步断定为异黄酮类化合物。
- 郝佳马会勤代茹陈尚武
- 关键词:重组菌
- 一种提高卵子体外成熟质量及体外受精后胚胎妊娠率的组合物、方法及其应用
- 本发明公开了一种提高卵子体外成熟质量及体外受精后胚胎妊娠率的组合物、方法及其应用。本发明针对卵母细胞体外成熟过程中代谢紊乱导致的体外成熟率低、后续胚胎发育潜能差等问题,提供包括维生素C、L‑肉碱和血小板生成素中两种以上调...
- 田见晖 席广银郝佳 岳媛王书敏安磊郭敏