赵雪飞
- 作品数：9 被引量：29H指数：4
- 供职机构：哈尔滨医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金黑龙江省自然科学基金哈尔滨市科技创新人才研究专项资金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 靶向抑制ADAM-17对前列腺癌细胞侵袭和转移的影响
- 去整合素域和金属蛋白酶-17(A disintegrin and metalloprotease domain-17,ADAM-17)是一锚定于细胞膜的糖蛋白。1997年,Moss ML 等人首次从能产生并释放有活性的 ...
- 刘紫君赵雪飞姜颖肖莉杰边淑玲刘伟于晓光
- 文献传递
- 凋亡相关基因PDCD5对前列腺癌细胞PC-3M-1E8促凋亡作用的研究被引量：10
- 2007年
- 目的:观察外源性PDCD5对人雄激素非依赖性前列腺癌细胞PC-3M-1E8的促凋亡作用。方法:扩增重组质粒PCI-neo-PDCD5,利用脂质体介导将其瞬时转染前列腺癌细胞PC-3M-1E8,RT-PCR检测转染后表达情况;撤除血清培养16h后,通过四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测细胞存活率,原位末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡指数,透射电子显微镜观察细胞形态。结果:MTT结果显示转染重组质粒组细胞较转染空载体和对照组细胞生长速度明显减慢,存活细胞明显减少(P<0.001);通过TUNEL与透射电镜观察,发现转染组细胞凋亡程度和数量明显增加,凋亡指数较对照组明显增高(P<0.001)。结论:PDCD5在撤出血清因素的诱导作用下能显著抑制前列腺癌细胞PC-3M-1E8在体外的生长,明显促进其凋亡。
- 李书君于靖赵雪飞姜颖刘紫君于晓光
- 关键词：前列腺癌细胞PDCD5凋亡
- TFAR19蛋白协同米非司酮对前列腺癌PC-3M细胞凋亡的影响被引量：1
- 2008年
- 目的初步探讨TFARl9协同米非司酮（MIF）对前列腺癌PC-3M细胞凋亡的影响。方法构建TFARl9真核表达载体，用脂质体介导的方法转染PC-3M细胞。MTT法检测5、10、20、50和100μmol·L^-1 MIF作用于前列腺癌PC-3M细胞24～96h的吸光度（A）值。在转染TFARl9的细胞中加入20mol·L^-1 MIF培养24、48h，MTT比色法检测细胞增殖，原位末端标记（TUNEL）法检测细胞凋亡率，透射电镜进一步观察细胞超微结构的改变。结果构建了PCI-neo-TFARl9真核表达载体并在转染的PC-3M细胞中得到了瞬时表达。MTT实验表明，与对照组相比，5、10μmol·L^-1 MIF组的A值差异无统计学意义（P〉0．05），20、50和100μmol·L^-1MIF组的A值差异有统计学意义（P〈0．01），MIF对前列腺癌PC-3M细胞的抑制作用呈时间、剂量依赖性；转染PCI-neo-TFARl9并加入20mol·L^-1 MIF后，与对照组及单独应用MIF组相比，细胞生长明显受到抑制（P〈0．01），细胞凋亡率明显增加（P〈0．01），透射电镜观察到典型的细胞凋亡特征（细胞体积缩小，核皱缩、碎裂，染色质呈块状边集等）。结论TFARl9蛋白能够协同米非司酮促进前列腺癌PC-3M细胞凋亡，有望成为前列腺癌的辅助治疗药物。
- 于靖赵雪飞王继洲姜颖杜颜丹林平王淑娟于晓光
- 关键词：前列腺癌米非司酮细胞凋亡PC-3M细胞
- 肿瘤坏死因子α转化酶胞内区诱饵质粒的构建及鉴定
- 2007年
- 目的:构建用于酵母双杂交系统的诱饵质粒载体pGBKT7-TACEc(肿瘤坏死因子α转化酶胞内区),并检测其是否具有自身激活及毒性作用。方法:从BALB/c雄性小鼠睾丸组织提取总RNA,用RT-PCR方法获得TA-CEc,克隆于pGBKT7载体上,酶切鉴定及序列分析,并检测pGBKT7-TACEc在酵母双杂交系统中的自激活和毒性作用。结果:实验成功构建了诱饵质粒载体pGBKT7-TACEc,并证明其在酵母双杂交系统中无自激活及毒性作用。结论:pGBKT7-TACEc可应用在酵母双杂交系统中,寻找小鼠睾丸cDNA文库中与TACEc相互作用的蛋白质,为筛选小鼠睾丸中与TACEc相互作用的蛋白奠定了重要基础。
- 刘鑫王凤丹王建醒赵雪飞于靖于晓光
- 关键词：睾丸酵母双杂交系统自激活作用
- MIF诱导前列腺癌PC-3M细胞凋亡——PDCD5蛋白的作用
- 米非司酮(mifepristone,RU486,MIF)是19-去甲睾酮的衍生物,作为孕激素受体和糖皮质激素受体拮抗剂以往主要用于抑制孕酮依赖性的生理、病理过程,如终止妊娠、引产等。近年研究表明, 米非司酮对多种人体肿瘤...
- 于靖赵雪飞姜颖刘紫君杜彦丹王淑娟徐华锋于晓光
- 文献传递
- ADAM17通过EGFR-PI3K/Akt/p27通路调控前列腺癌细胞增殖被引量：6
- 2010年
- ADAM17是金属蛋白酶家族(ADAMs)成员之一,研究发现ADAM17可以通过水解细胞表面蛋白的胞外结构域导致肿瘤细胞的增殖和转移.本课题前期研究结果显示,与LNCap细胞相比,ADAM17在DU145细胞中高表达,且与细胞增殖相关.为了研究ADAM17与前列腺癌细胞增殖相关基因p27表达的关系及调控机制,我们采用RNAi技术下调ADAM17的表达,加入PMA(一种ADAM17的激活剂)上调ADAM17的表达,通过细胞计数和CCK-8方法检测细胞增殖,RT-PCR检测p27mRNA的表达,Western印迹检测ADAM17的表达;进一步阻断EGFR和PI3K/Akt信号转导,RT-PCR方法检测p27mRNA的表达,Western印迹检测ADAM17、EGFR、pEGFR、Akt和pAkt的表达.结果显示ADAM17的表达与前列腺癌细胞的增殖呈正相关(P<0.05);p27mRNA的表达与ADAM17的表达呈负相关(P<0.05);分别阻断EGFR和PI3K/Akt信号转导通路,同时使ADAM17表达增加,与对照组(单独PMA处理组)相比,p27mRNA的表达均增加(P<0.05).提示ADAM17调控前列腺癌细胞增殖相关基因p27表达是通过EGFR-PI3K/Akt信号通路实现的.
- 吴琦冯田孙希财林平边淑玲赵雪飞李聪于晓光
- 关键词：前列腺癌ADAM17PAKTP27
- 靶向ADAM17基因siRNA对前列腺癌PC-3细胞增殖能力的影响被引量：9
- 2012年
- 目的:探讨靶向抑制ADAM17基因对雄激素非信赖性前列腺癌PC-3细胞增殖的影响。方法:应用ADAM17 siRNA转染PC-3细胞后,通过RT-PCR、Western印迹方法分别检测ADAM17 mRNA和蛋白表达变化;MTT、BrdU掺入法检测下调ADAM17对PC-3细胞的增殖和DNA合成能力的影响;流式细胞术检测ADAM17 siR-NA对PC-3细胞细胞周期的影响;Western印迹检测下调ADAM17对PC-3细胞增殖相关基因表达的影响。结果:两对ADAM17 siRNAs均可有效地降低PC-3细胞ADAM17 mRNA和蛋白的表达;MTT结果显示与对照组(0.80±0.51)相比,两对ADAM17 siRNAs均可显著抑制细胞的生长(0.43±0.57、0.44±0.64,P均<0.05);Br-dU掺入实验显示与对照组(0.79±0.72)相比,ADAM17 siRNAs均能显著下调DNA的合成能力(0.48±0.43、0.54±0.59,P<0.05);流式细胞术结果显示,与对照组(41.38±1.53)%相比,ADAM17 siRNAs可显著增加G1期细胞数量[(61.83±2.41)%、(59.78±1.92)%,P均<0.05]、降低S期细胞数量[从(33.51±1.47)%减少到(23.64±2.56)%、(25.24±1.86)%,P均<0.05],同时伴随着cyclin D1蛋白的表达下降而p21蛋白的表达升高。结论:ADAM17 siRNA可以通过下调cyclin D1、上调p21的表达而抑制前列腺癌PC-3细胞增殖,ADAM17可能成为前列腺癌基因治疗的靶点。
- 林锋林平刘鑫李栋刘紫君邹海峰姜颖赵雪飞冯金发于晓光
- 关键词：前列腺癌ADAM17PC-3细胞CYCLIN
- PDCD5蛋白联合米非司酮对前列腺癌细胞增殖及相关基因表达的影响被引量：4
- 2009年
- 目的观察PDCD5蛋白协同米非司酮（MIF）对前列腺癌细胞增殖及相关基因表达的影响。方法MTT法分别检测10、20、50和100μmol/L MIF作用于PC-3M细胞24-96 h的吸光度（A）值。扩增包含PDCD5序列的真核表达载体PCI-neo-PDCD5，用脂质体介导的方法转染前列腺癌PC-3M细胞。在转染PDCD5的细胞中分别加入10、20μmol/L MIF，继续培养24 h，MTT比色法检测细胞增殖，RT-PCR方法检测细胞增殖相关基因CyclinD1、Ki-67的表达。结果MTT实验表明，与对照组相比，10μmol/L MIF组的A值差异无统计学意义（P〈0.05），20、50和100μmol/L MIF组的A值显著降低（P〈0.05），MIF对前列腺癌PC-3M细胞的抑制作用呈剂量依赖性；PDCD5真核表达载体成功转染PC-3M细胞并得到了瞬时表达，转染PCI-neo-PDCD5并加入MIF后，与对照组及单独应用MIF组相比，细胞增殖受到明显抑制（P〈0.05），增殖相关基因CyclinD1、Ki-67表达降低。结论PDCD5蛋白能够协同米非司酮抑制前列腺癌PC-3M细胞增殖，可能是通过调节某些增殖相关基因的表达来实现的，并有望成为前列腺癌的辅助治疗药物。
- 杜彦丹于靖赵雪飞林平刘紫君于晓光
- 关键词：前列腺癌PC-3M细胞PDCD5米非司酮细胞增殖
- 靶向抑制ADAM-17对人前列腺癌细胞侵袭和转移影响的研究
- 目的：研究人去整合素域和金属蛋白酶-17(ADAM-17)反义寡核苷酸(ASODN)转染对前列腺癌PC-3M细胞侵袭和转移的影响。
方法：设计并合成靶向ADAM-17的ASODN及正义寡核苷酸(SODN),用脂...
- 赵雪飞
- 关键词：前列腺癌细胞侵袭靶向抑制反义寡核苷酸
