赵毅 作品数:27 被引量:105 H指数:6 供职机构: 广东医学院 更多>> 发文基金: 广东省自然科学基金 国家自然科学基金 广东省医学科学技术研究基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 生物学 更多>>
EBV融合基因Z2A腺病毒的制备及其在诱导EBV阳性细胞凋亡的应用 2014年 目的:构建EB病毒基因LMP2A及BZLF1的融合基因(Z2A)重组腺病毒表达载体,探讨Z2A融合蛋白对EBV+细胞凋亡的作用。方法:利用AdEasy系统构建重组腺病毒载体pAd-Z2A,而后将之转染293细胞(人胚肾细胞)产生重组腺病毒rAd-Z2A。后者用于感染EBV阳性及阴性细胞,RT-PCR、Western-blotting检测Z2A的mRNA和蛋白表达,以及流式细胞术检测其对EBV阳性细胞凋亡的调控。结果:序列测定和酶切实验均证实,Z2A融合基因正确插入穿梭质粒,并成功获得重组腺病毒表达载体pAd-Z2A及重组腺病毒rAd-Z2A。感染rAd-Z2A的NEC靶细胞检测到Z2A的表达。流式细胞术检测发现,与EBV-细胞组及EBV+空白质粒转染组相比,接种rAd-Z2A的EBV+细胞组48h(P<0.05)凋亡细胞显著增多,72h时细胞近乎全部凋亡(P<0.01)。结论:重组腺病毒rAd-Z2A可有效感染EBV+及EBV-细胞,从而显著促进EBV+细胞凋亡而不影响EBV-细胞,为进一步特异性靶向EBV+肿瘤的基因治疗奠定基础。 王森 赵毅 康海仙 丁伟斌 姚运红 胡新荣 王云 罗兵 朱伟关键词:LMP2A 融合基因 腺病毒载体 EBV 滋补肾阴方左归饮对老年小鼠自由基代谢及免疫功能的影响 被引量:5 2007年 目的研究补肾阴方左归饮延缓衰老的作用机制。方法测定老年小鼠血清中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性及总抗氧化能力(T-AOC);胸腺指数、脾指数,脾脏T淋巴细胞增殖活性及血清白介素-2(IL-2)水平,并观察左归饮对上述指标的影响。结果与青年小鼠比较,老年小鼠血清中SOD和T-AOC下降,MDA水平升高,同时胸腺指数、脾指数、T淋巴细胞活性和血清中细胞因子IL-2水平降低,左归饮明显改善上述指标,且差异显著。单味熟地仅能明显降低老年小鼠血清中MDA含量和显著增强老年小鼠T淋巴细胞增殖活性,对其他指标影响不大,显示整方抗衰老的优势。结论左归饮可从改善自由基代谢和增强免疫两方面发挥延缓衰老的作用。 赵毅关键词:衰老 自由基 免疫 研究生医学免疫学实验课改革初探 被引量:6 2009年 赵汉宁 刘仿 米娜 吴瑗 冯胜军 赵毅关键词:医学免疫学 实验课程 生命科学 空肠弯曲菌制备自身免疫综合征动物模型的研究近况 2005年 以空肠弯曲菌(Campylobacter jejuni,CJ)制备全身性自身免疫病动物模型,始于上世纪八十年代,兴于九十年代.由我国学者[1]首次制备成SLE样自身免疫综合征表现的小鼠动物模型,因其模型稳定可靠[2],涉及多脏器组织的免疫病理损害,自身免疫病拟似性强,经济易行,试验周期短,已成为研究自身免疫病机理及中药免疫作用研究的重要试验支撑条件.本文就空肠弯曲菌制备自身免疫病模型动物的机理和试验研究作一概述. 赵毅 董群关键词:空肠弯曲菌 自身免疫综合征 动物模型 CJ 免疫反应 阴沟肠杆菌Ι类整合子可变区耐药基因的研究 被引量:3 2011年 目的研究阴沟肠杆菌Ι类整合子可变区基因盒的种类及位置,探讨Ι类整合子携带的耐药基因盒特点,分析耐药基因盒与阴沟肠杆菌耐药性的关系。方法采用纸片扩散法(K-B法)测定抗生素的敏感性;PCR扩增阴沟肠杆菌Ι类整合子阳性株中的可变区基因盒,并测序分析。结果可变区一共扩增出15种基因盒,其中耐药基因盒7种:aadA2-dfrA12、aadA2-aadB、aadA2、aadB、dfrA12、aac(6')-Iica-catB3和blaIMP-4,以aadA2-dfrA12(1913bp)最常见。许多质粒DNA和染色体DNA的PCR扩增产物相同。结论Ι类整合子可变区携带的耐药基因盒以耐氨基糖苷类和耐甲氧苄氨嘧啶类抗生素基因为主。耐药基因在阴沟肠杆菌中存在水平播散和垂直传播的现象。 刘军 李国明 赵毅 胡小行 杨维青 杨锦荣关键词:阴沟肠杆菌 整合子 基因盒 耐药性 调强放疗同期顺铂时辰化疗联合西妥昔单抗对局部晚期鼻咽癌患者的影响 被引量:12 2015年 目的探讨调强适形放射治疗(IMRT)同期正弦曲线式顺铂时辰化疗联合西妥昔单抗方案治疗局部晚期鼻咽癌的疗效、不良反应和对细胞免疫功能的影响。方法将2009年4月至2012年12月收治的68例局部晚期鼻咽癌患者随机分为实验组(35例)和对照组(33例),实验组采用IMRT同期顺铂正弦曲线式时辰化疗联合西妥昔单抗方案治疗,对照组采用IMRT同期顺铂常规化疗联合西妥昔单抗方案治疗。统计两组的疗效及化疗、放疗引起的急慢性不良反应和T细胞亚群变化。结果两组的完全缓解(CR)、部分缓解(PR)、稳定(SD)、进展(PD)和有效(CR+PR)、疾病控制(CR+PR+SD)的构成比在任何时间段差异均无统计学意义(P均>0.05)。在急性不良反应中,黏膜炎、消化道反应、血红蛋白下降、肝功能异常的发生率实验组低于对照组(P均<0.05)。在放疗引起的慢性不良反应中,实验组黏膜炎的发生率低于对照组(P<0.05)。治疗前两组T细胞亚群水平相近(P均>0.05),治疗后两组T细胞亚群水平有不同程度的下降,而对照组的CD4水平和CD4/CD8比值均低于实验组(P均<0.05)。结论 IMRT同期顺铂正弦曲线式时辰化疗联合西妥昔单抗治疗局部晚期鼻咽癌的疗效明确,可减少急性不良反应和放疗引起的慢性不良反应发生率,减轻对细胞免疫功能的损害,但疗效与IMRT同期顺铂常规化疗联合西妥昔单抗无差别。 刘清壮 赵毅 王燕关键词:时辰化疗 调强适形放射治疗 顺铂 西妥昔单抗 盐酸米托蒽醌诱导人鼻咽癌细胞CNE-2凋亡的研究 2013年 目的探讨盐酸米托蒽醌诱导人鼻咽癌细胞CNE-2凋亡作用和机制。方法用CCK-8细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒检测盐酸米托蒽醌对CNE-2细胞生长的抑制作用,流式细胞仪检测细胞内药物积聚量与细胞凋亡率之间的关系,共聚焦检测盐酸米托蒽醌在细胞中的定位。结果盐酸米托蒽醌对CNE-2细胞生长具有抑制作用,呈时间和剂量依赖性,并能有效诱导细胞凋亡,其在细胞中主要以斑点形式分布在细胞质中。结论盐酸米托蒽醌能抑制人鼻咽癌细胞CNE-2细胞生长,并诱导细胞凋亡,CNE-2细胞的药物敏感性与药物在细胞内的分布位置有直接关系。 王炜 刘斌 童春义 程小广 陈稚 赵毅 胡新荣关键词:盐酸米托蒽醌 鼻咽癌 凋亡 大补阴丸含药血清对自身免疫病模型小鼠T、B淋巴细胞活性影响的时效关系 被引量:5 2006年 目的应用中药血清药理学的方法,通过时间一效应关系研究,探讨大补阴丸(汤)含药血清对CJ(Campylobacter jejuni,空肠弯曲菌)致敏的自身免疫病模型小鼠(CJ小鼠)T、B淋巴细胞活性的影响及其时间-效应关系。方法将健康雌性ICR小鼠随机分为正常对照组(normalcontrolgroup,N)、模型组(modelgroup,M)、模型对照组(model control group,MC)以及5个时相给药组(30min、1h、1.5h、2h、3h),共8组。除正常对照组外,其他各组均用空肠弯曲菌免疫小鼠制备自身免疫病模型。从造模第15d起,开始以大补阴丸(汤)(0.4g生药饮片/ml)给不同时相用药组小鼠灌胃,连续用药10d。并分别于第10次给药后30min、1h、1.5h、2h、3h取血,分离血清;同时也分别取N组、MC组血,分离血清。继之处死小鼠,称量脾,计算脾指数。将上述血清与M组小鼠的脾细胞体外培养。检测DBYW含药血清对T、B淋巴细胞活性的影响,并绘出时-效关系变化曲线。结果大补阴丸(汤)在1~1.5h时相含药血清,可明显抑制CJ小鼠的T、B淋巴细胞增殖活性,降低CJ小鼠体内异常升高的ds-DNA、ss-DNA抗体水平和脾指数,改善其因自身免疫反应所致的肝肾病理损害。结论大补阴丸(汤)含药血清对异常免疫机能状态下的T、B淋巴细胞活性具有明显的免疫抑制作用,且在1~1.5h时作用最明显。 赵毅 董群关键词:空肠弯曲菌 血清药理学 时效关系 淋巴细胞活性 放疗后复发鼻咽癌微卫星不稳定和杂合性缺失改变的研究 被引量:1 2014年 目的比较放疗后复发鼻咽癌(NPC)与初诊NPC中染色体微卫星不稳定(MSI)和杂合性缺失(LOH)发生情况。方法选择1p、3p、3q、4q、9q、11q、13q、14q的12个微卫星多态性位点,显微切割分离22例初诊和18例放疗后复发NPC组织和正常组织,提取DNA,经PCR扩增及聚丙烯酰胺凝胶电泳和硝酸银染色,进行MSI及LOH分析研究。结果(1)8个位点发生了LOH:复发癌与初诊癌相比,LOH发生率在D1S2697位点为28.6%比20.0%,在D13S133位点为30.0%比20.0%,在D9S1682位点为7.7%比9.1%;D5S433和D14S65位点只在复发癌中发生LOH,分别为33.3%和6.7%;D13S263、D4S350、D14S258位点只在初诊癌发生LOH,分别为20.0%、33.3%、16.6%。(2)11个位点发生了MSI:4个位点在复发癌和初诊癌中都发生MSI,4个位点只在复发癌中发生MSI,3个位点只在初诊癌中发生MSI。结论 D1S2697、D13S133、D5S433位点可能含有与放疗后复发NPC相关的肿瘤抑制基因,放疗后复发NPC中MSI发生率呈增高趋势,提示部分放疗后复发NPC与原发癌可能属不同细胞克隆起源。 曾华 丁伟斌 赵毅 姚运红 胡新荣关键词:鼻咽癌 复发 微卫星不稳定 杂合子丢失 2型糖尿病患者血浆甘露聚糖结合凝集素与血糖糖化血红蛋白的相关性分析 被引量:1 2015年 目的探讨2型糖尿病(T2DM)患者血浆甘露聚糖结合凝集素(MBL)水平及其与血糖、糖化血红蛋白(HbA1c)的关系。方法选取T2DM患者及健康人各60例,测定血浆MBL、空腹血糖(FPG)和HbA1c水平,观察MBL水平变化及与FPG、HbA1c的关系。结果 T2DM患者血浆MBL、FPG、HbA1c水平均高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.01);Pearson相关性分析显示,血浆MBL水平与HbA1c呈明显正相关(r=0.257,P=0.047)。结论 MBL在T2DM患者血浆中明显增高,可能参与了T2DM的发病过程,检测MBL对T2DM的诊断和预后具有潜在的临床价值。 王燕 翁玉玲 李国明 刘仿 米娜 赵毅关键词:2型糖尿病 甘露聚糖结合凝集素 血糖 糖化血红蛋白