赵世洪
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
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- 微柱离心结合氯化银胶体散射光猝灭法测量牛血清白蛋白脂质体中的痕量蛋白质
- 2010年
- 目的：运用DEAE-Sephadex A50微柱离心法结合Agcl胶体溶液散射光强度猝灭法测定BSA脂质体的包封率。方法：以BSA为模型药，采用逆向蒸发法制备脂质体；建立DEAE-SephadexA50微柱离心分离游离蛋白质和脂质体的方法，并结合AgCl胶体溶液散射光强度猝灭法测定脂质体包封率。结果：AgCl胶体溶液散射光强度猝灭法中能达到散射光强度和散射光猝灭效果的最佳Cl^-与Ag^＋摩尔比为1，选择反应体系为pH值4．8的醋酸-醋酸钠缓冲液，反应时间在50-80min较好，本实验中的反应时间为60min，不同的环境温度对测定结果有不可忽略的差异，应始终保证在同一环境温度下测定。本法的平均柱回收率为97．78％，RSD为0．18％（n=4），柱分离效率90％，柱分离效果较好，可以适用于游离蛋白与脂质体的分离和检测。结论：用DEAE-Sephadex A50微柱离心结合AgCl胶体溶液散射光强度猝灭法测定包封率的方法，可适用于给药剂量较低的蛋白质类药物脂质体包封率测定过程中痕量蛋白质的检测。
- 侯冬枝梁晓晖赵世洪刘长科平其能刘军
- 微柱离心结合双波长考马斯亮蓝法/酶标仪法测定牛血清白蛋白脂质体的包封率被引量：2
- 2011年
- 目的:测定牛血清白蛋白(BSA)脂质体的包封率。方法:采用微柱离心结合双波长考马斯亮蓝法/酶标仪法测定,即先用葡聚糖凝胶DEAE-Sephadex A50微柱离心法将游离药物与脂质体进行分离,再筛选样品与染料体积比及反应时间,确定了双波长(595、450nm)考马斯亮蓝法/酶标仪法的测定条件并进行了方法学考察;考察了微柱对空白脂质体的回收率和微柱的分离效率;对BSA脂质体的包封率进行了测定。结果:确定的测定条件为样品与染料体积比为1∶3、反应时间10min,该法平均回收率为99.56%,RSD小于2.73%;微柱对空白脂质体的平均回收率为97.78%,分离效率大于90%;BSA脂质体的平均包封率为32.91%(n=3)。结论:本法实现了游离蛋白质与脂质体快速有效的分离,方法简单易行,与普通凝胶层析柱分离法相比,本法对样品的稀释倍率大大降低,适用于测定痕量大分子蛋白质脂质体的包封率。
- 侯冬枝梁晓晖赵世洪刘长科平其能刘军
- 关键词：微柱离心法包封率
