赖名耀 作品数:5 被引量:12 H指数:2 供职机构: 昆明医科大学 更多>> 发文基金: 云南省自然科学基金 国家自然科学基金 云南省教育厅科学研究基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
莱姆病螺旋体优势抗原BmpA分子克隆与亚细胞定位研究 目的:1.以伯氏疏螺旋体标准株B31株基因组DNA为模板,PCR扩增bmpA全基因序列,定向克隆和高效表达重组bmpA并纯化.内容:1.BmpA基因的定向克隆与重组菌的产生:以伯氏疏螺旋体标准株B31株基因组DNA为模板... 宝福凯 赖名耀 文霞 董坚 柳爱华 陈明清关键词:莱姆病 伯氏疏螺旋体 分子克隆 伯氏疏螺旋体膜蛋白BmpA研究进展 被引量:5 2012年 莱姆病是一种人兽共患病,已严重威胁人类健康,成全球公共卫生问题,引起全球关注.伯氏疏螺旋体是莱姆病病原体,通过蜱叮咬传播而引起莱姆病,其表面存在的膜蛋白具有免疫性和致病性.BmpA(Borreliaburgdorferi membrance protein A)是伯氏疏螺旋体的主要抗原之一,为层粘连蛋白结合蛋白,是莱姆关节炎的重要致病因子,对蛋白功能、诊断应用和莱姆关节炎致病机理三方面的研究进展进行概述. 宝福凯 赖名耀 张云波 董坚 赵桂萍 陈明清 柳爱华关键词:伯氏疏螺旋体 莱姆病 恙虫病东方体检测及分型的分子生物学技术进展 被引量:5 2010年 恙虫病东方体是由恙螨幼虫叮咬传播而引起恙虫病的病原体。过去多用血清学的方法对其进行检测和分型,随着分子生学的发展,分子生物学技术开始大量应用于恙虫病东方体的检测和鉴别其基因型。本文对应用于恙虫病东方体检测和分型的分子生物学技术进行了综述。 赖名耀 吴娜 柳爱华 宝福凯关键词:恙虫病东方体 分子生物学技术 基因分型 PCR 莱姆病螺旋体优势抗原BmpA分子克隆、优势表达与纯化 研究目的:1.以伯氏疏螺旋体标准株B31株基因组DNA为模板,PCR扩增bmpA全基因序列,定向克隆和高效表达重组BmpA并纯化。2.用ELISA评估rBmpA在莱姆病血清学诊断中的敏感性和特异性。研究内容:1. bmp... 赖名耀关键词:莱姆病 伯氏疏螺旋体 分子克隆 文献传递 莱姆病螺旋体优势抗原BmpA分子克隆、高效表达与亚细胞地位 被引量:2 2012年 目的以伯氏疏螺旋体标准株B31株基因组DNA为模板,PCR扩增bmpA全基因序列,定向克隆和高效表达重组BmpA并纯化。方法 1)以伯氏疏螺旋体标准株B31株基因组DNA为模板,设计定向克隆引物,PCR扩增bmpA全基因序列,定向克隆入表达载体pGEX-6p-1,酶切鉴定后转化大肠埃希菌BL21菌株,获得bmpA重组菌;2)从重组菌培养温度,诱导时间,诱导剂的剂量,菌密度(A600)等方面优化诱导条件,确定高效表达重组BmpA的最佳方案;3)用GSH柱纯化重组BmpA,探索纯化BmpA的最佳条件。结果 1)在基因水平和蛋白水平上均得到目的条带和目标峰,确定表达载体bmpA-pGEX-6p-1构建成功并表达重组BmpA;2)重组质粒在37℃,IPTG诱导浓度为0.1mmol/L,诱导时间为6h,菌液的A600值为0.5~1.0以及在LB培养基上培养GST-bmpA融合蛋白表达量达到最大;3)在最佳表达条件下1L重组菌能得到2.9~3.1mg纯化BmpA蛋白。结论成功构建了表达重组蛋白BmpA的大肠埃希菌原核表达系统,确定了高效表达重组BmpA的最佳方案,并证明用GSH柱纯化重组BmpA效果较好。 宝福凯 赖名耀 文霞 董坚 柳爱华 陈明清关键词:莱姆病 伯氏疏螺旋体 分子克隆