贾琳娜
- 作品数:5 被引量:5H指数:2
- 供职机构:山西医科大学法医学院更多>>
- 发文基金:国家教育部博士点基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学社会学经济管理更多>>
- MAZ基因启动子区顺式作用元件的EMSA分析
- 目的:MAZ参与细胞生理、病理状态下多种基因的转录调控,被调控的基因如基质金属蛋白酶、血清淀粉样蛋白A等与类风湿性关节炎、动脉粥样硬化、心脏疾病、癌症等疾病的发生密切相关。目前研究报道多集中于MAZ介导下游基因的表达调控...
- 贾琳娜
- 关键词:EMSA顺式作用元件
- 转录因子Elk-1调控MAZ基因启动子转录活性的体外研究被引量:2
- 2017年
- 该文旨在探究血清淀粉样蛋白A激活转录因子(serum amyloid A activating transcription factor,SAF),或称myc相关锌指蛋白(myc-associated zinc finger protein,MAZ)基因,除已证实的转录因子MAZ和Sp1(specificity protein 1)外,是否存在其他转录因子对MAZ基因启动子的转录激活具有调控作用。在生物信息学预测基础上,利用凝胶电泳迁移实验(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)筛查MAZ启动子区的转录因子结合位点。在EMSA筛查出MAZ启动子区包含转录激活因子ETS样蛋白1(ETS-like 1 transcription factor,Elk-1)结合位点后,通过该实验室构建的由MAZ启动子驱动的双荧光报告系统分析观察过表达转录因子Elk-1后MAZ启动子的转录激活情况。结果显示,转录因子Elk-1可结合MAZ启动子–525~–504 nt区的DNA序列;过表达Elk-1及Sp1均可使MAZ的两个转录子SAF-1和SAF-3转录水平降低且后一转录子被抑制尤甚。结果提示,Elk-1与Sp1共同参与调控MAZ基因两个转录子SAF-1和SAF-3的转录调控,在MAZ基因参与的细胞诸多生理疾病过程中,Elk-1可能通过该途径发挥其作用。
- 王博贾琳娜王小怡张潮王雪伟任剑波高哲郭大玮
- 关键词:转录因子
- H19差异甲基化位点MSRE-qPCR分析识别精子DNA新方法的可行性探究
- 2017年
- 目的:研究位于H19转录起始点-3390 bp的HhaI位点是否为差异甲基化位点,为精子DNA识别提供新依据。方法:从51份血样和20份精子样本提取基因组DNA,每个样本分别在同一反应体系中进行甲基化敏感酶HhaI消化和荧光定量PCR反应(MSRE-qPCR),扩增包含上述HhaI位点的114 bp片段。得到每个样本酶切前后的Ct值,用2^(-△△Ct)计算各样本酶切前后模板DNA相对表达量,将其作为DNA甲基化水平。结果:51份血样中该HhaI位点甲基化水平为(44.4±23.8)%,20份精子DNA甲基化水平为(120.5±52.5)%,差异有统计学意义(P<0.001)。结论:甲基化水平高于94%可识别精子DNA,H19差异甲基化区114 bp序列的MSRE-qPCR分析为精子DNA的识别提供了一种新方法。
- 贾琳娜王小怡王博郭大玮
- 关键词:实时定量PCR精子DNA
- Chelex-100法提取DNA用于差异甲基化基因座检测的研究
- 2014年
- 目的通过对Chelex-100提取法提取的DNA用于酶切的研究,为差异甲基化在法医实际工作中的应用性研究提供一种快速提取酶切底物的方法。方法 HhaⅠ酶切基因组DNA,PCR扩增,2%琼脂糖凝胶电泳检测,254 nm紫外灯下观察。结果 Chelex-100提取法提取的杂合子样本DNA加酶组只观察到来自父源的等位基因片段,而未加酶组能够观察到来自父源和母源的等位基因片段。结论 Chelex-100提取法提取的DNA能够作为酶切底物应用于差异甲基化基因座的研究。
- 成振严鹏白丽娟贾琳娜郭大玮
- 关键词:聚合酶链反应
- MSRE-qPCR法检测少弱精子症患者父源印记基因H19上游区域甲基化水平被引量:2
- 2014年
- 目的建立精子中父源印记基因H19上游区域MSRE-qPCR检测方法,并分析男性少弱精子症患者精子父源印记基因H19上游区域甲基化水平。方法收集20例正常精液样本,同时筛选30例少弱精子症患者精液样本,应用甲基化敏感性限制性内切酶法并结合定量PCR对所有样本父源印记基因H19上游区域甲基化水平进行分析。结果正常精液样本父源印记基因H19上游区域平均甲基化率为(99.8±2.72)%,高于少弱精子症患者精液样本的(82.4±15.30)%,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 MSRE-qPCR法可用于父源印记基因H19上游区域甲基化水平的检测,少弱精子症者精液样本父源印记基因H19上游区域甲基化水平显著低于正常人。
- 严鹏任丽娟成振郭大玮白丽娟贾琳娜
- 关键词:少弱精子症DNA甲基化