谢殿洪 作品数:24 被引量:161 H指数:9 供职机构: 上海中医药大学附属普陀医院 更多>> 发文基金: 上海市教育委员会创新基金 国家中医药管理局中医药重点学科建设项目 上海市卫生局科研基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 历史地理 更多>>
塞来昔布对人滑膜细胞和人软骨细胞共培养体系相关因子的调控作用 被引量:4 2016年 目的观察塞来昔布对Wnt/β-catenin信号通路活化的人滑膜细胞和人软骨细胞共培养体系相关因子的调控作用,初步阐释塞来昔布治疗骨关节炎的分子作用机制。方法通过β-catenin慢病毒载体转染正常人滑膜细胞,激活其Wnt/β-catenin信号通路。Wnt/β-catenin信号通路活化的人滑膜细胞与正常人软骨细胞置于Transwell小室中共培养。倒置显微镜观察Wnt/β-catenin信号通路活化的人滑膜细胞对人软骨细胞形态学变化的影响。塞来昔布混悬液干预共培养体系,采用Western blot方法检测塞来昔布对滑膜细胞β-catenin蛋白表达的影响;采用ELISA方法检测塞来昔布对滑膜细胞、软骨细胞培养上清液基质金属蛋白酶-7(MMP-7)、Ⅱ型胶原羧基端肽(CTX-Ⅱ)、软骨寡聚基质蛋白(COMP)表达的影响。结果β-catenin慢病毒载体转染正常人滑膜细胞后成功激活Wnt信号通路并与软骨细胞共培养。随着培养时间的延长,软骨细胞生长逐渐受到抑制,软骨细胞胞体边缘与板壁接触处发白,折光度增加,细胞贴壁强度降低。塞来昔布干预后,Western blot检测发现滑膜细胞中β-catenin蛋白的表达明显下调(P<0.01);ELISA法检测发现滑膜与软骨细胞上清液中MMP-7、CTX-Ⅱ、COMP的表达与正常对照相比明显升高(P<0.01)。结论滑膜细胞Wnt/β-catenin信号通路的激活可以使软骨细胞生长受到抑制。塞来昔布可以降低滑膜细胞β-catenin表达,且与干预时间长短相关。塞来昔布可以抑制滑膜细胞Wnt/β-catenin信号通路,下调MMP-7、CTX-Ⅱ、COMP的表达。塞来昔布可能通过抑制OA滑膜Wnt/β-catenin信号通路,改善滑膜炎症、调控滑膜-软骨共同体系微环境、达到抑制软骨降解,促进软骨细胞功能恢复而治疗骨关节炎。 王德刚 许传勇 姜玉祥 阚卫兵 肖志锋 姚丽 刘婉 谢殿洪 汤豪 张玉婷关键词:细胞共培养 MMP-7 塞来昔布 骨关节炎的中医药治疗及代谢组学应用前景 被引量:2 2011年 为探讨代谢组学在中医药治疗骨关节炎研究中的应用前景,对骨关节炎的中医药治疗、代谢组学在骨关节炎研究中的应用进行了文献分析。发现代谢组学对研究中医药治疗骨关节炎具有独特的优势,能够更好地探索骨关节炎的发病机制;发现骨关节炎致病的生物标志物,寻求中医药干预骨关节炎的可能途径,能够为中医药治疗骨关节炎的客观化提供理论上和技术上的支持。 杨贵尊 姜玉祥 谢殿洪 阚卫兵 王拥军关键词:代谢组学 骨关节炎 中医药 补肾活血方对家兔膝骨关节炎滑膜组织基因表达谱的影响 被引量:7 2012年 目的:观察补肾活血方对家兔膝骨关节炎(OA)滑膜组织基因表达谱的调控作用。方法:Hulth方法建立家兔膝骨关节炎模型,给予补肾活血方干预、常规抽提和纯化RNA,采用AffymetrixRat230 2.0Array芯片检测滑膜组织的基因表达变化。结果:芯片结果显示补肾活血方对模型组滑膜组织基因表达具有明显调控作用,补肾活血方有明显上调作用的基因中,中药组比模型组上调1.8倍以上的有10个;具有明显下调作用的基因中,中药组比模型组下调2倍以上的有4个。结论:补肾活血方可能通过调控目前在骨关节炎发生、发展中作用尚不明确的基因,起到抑制滑膜病变进展、促进软骨修复,从而达到治疗骨关节炎作用。 阚卫兵 姜玉祥 宋朋飞 袁琴 谢殿洪关键词:膝骨关节炎 补肾活血方 基因芯片 家兔 Wnt/β-catenin信号通路活化的人滑膜细胞对软骨细胞的影响 被引量:1 2017年 目的:研究Wnt/β-catenin信号通路活化的人滑膜细胞对软骨细胞的作用探讨骨关节炎(OA)发生及进展的可能途径和分子机制。方法:β-catenin过表达慢病毒载体转染正常人滑膜细胞,荧光显微镜观察病毒转染情况.Western blot方法:检测滑膜细胞核内β-catenin蛋白表达。Transwell小室共培养人滑膜细胞与正常人软骨细胞,倒置显微镜观察滑膜细胞对软骨细胞生长形态变化的影响。酶联免疫吸附(ELISA)法检测不同时间点共培养体系中软骨细胞培养上清液中MMP-7的变化找出MMP-7变化最明显的时间点。同时在最佳时间点ELISA方法:检测软骨细胞培养上清液CTX-Ⅱ、COMP的水平。结果:慢病毒转染滑膜细胞后茨光显微镜下可见多数滑膜细胞表达荧光.Western blot检测发现滑膜细胞胞浆及胞核中β-catenin表达明显上调(P<0.01)。通路活化的人滑膜细胞与软骨细胞共培养后,光镜下观察软骨细胞生长形态变化不明显,但随共培养时间的延长软骨细胞生长受到抑制胞体边缘发白壁强度降低。ELISA结果:显示通路活化的人滑膜细胞与软骨细胞共培养后软骨细胞上清液中MMP-7表达明显升高,与正常组相比有显著差异(P<0.01)软骨细胞上清液MMP-7的变化有一定的时间依赖性在共培养2h、6h、12h时逐渐升高;24h时略有降低且在共培养6h时变化最为明显。而共培养6h时通路激活组软骨细胞培养上清液中COMP、CTX-Ⅱ水平与正常对照组相比均明显升高(P<0.01)。结论:β-catenin过表达慢病毒转染正常人滑膜细胞可成功激活Wnt/β-catenin信号通路,Wnt/β-catenin信号通路活化的滑膜细胞可影响正常软骨细胞的生长,并引起滑膜-软骨体系内环境异常,促使软骨基质的降解这可能是滑膜炎促进OA发生、发展的机制之一。 肖志锋 王德刚 许传勇 姜玉祥 阚卫兵 姚丽 刘婉 谢殿洪 汤豪 张玉婷关键词:滑膜细胞 软骨细胞 细胞共培养 MMP-7 膝骨关节炎的生化代谢指纹谱及与证候相关性研究 目的:探索膝(关节)骨关节炎与正常对照组人群血清中小分子生化物质群的表达差异,构建膝(关节)骨关节炎血清中小分子生化物质群的生化表达指纹谱;同时区别膝骨关节炎不同中医证型间的生化表达特征;确立膝骨关节炎新的生化诊断指标,... 谢殿洪关键词:骨关节炎 气相色谱-质谱联用 证候分析 补肾活血方对人滑膜细胞Wnt/β-catenin信号通路的调控作用 被引量:11 2014年 目的:观察补肾活血方对人滑膜细胞Wnt/β-catenin信号通路的调控作用。方法:采用GSK-3β选择性抑制剂SB-216763作用于正常人滑膜细胞,然后提取和检测胞核蛋白β-catenin的表达,确定激活正常人滑膜细胞的Wnt/β-catenin信号通路的最佳时间点,然后给予补肾活血方含药血清干预,采用Western Blot检测人滑膜细胞胞核蛋白β-catenin及其下游基因MMP-7和Cyclin D1的表达,酶联免疫吸附法(ELISA)检测滑膜细胞上清液中MMP-7和Cyclin D1的表达。结果:Western Blot结果显示:成功激活正常人滑膜细胞Wnt/β-catenin信号通路,与正常组比较,SB-216763干预组的人滑膜细胞核蛋白β-catenin、MMP-7和Cyclin D1的表达明显升高(P<0.05);补肾活血方含药血清干预后,滑膜细胞胞核蛋白β-catenin及其下游基因MMP-7和Cyclin D1有显著下调(P<0.05)。ELISA结果显示:与正常组滑膜细胞比较,SB-216763干预的滑膜细胞上清液中MMP-7和Cyclin D1的表达明显升高(P<0.05)。而补肾活血方干预后较SB-216763干预组明显下调(P<0.05)。结论:补肾活血方具有调控人滑膜细胞Wnt/β-catenin信号通路的作用,其结果有助于从单一通路阐释补肾活血法中药治疗膝骨关节炎的作用机制。 宋朋飞 阚卫兵 赵婧 姜玉祥 谢殿洪 肖志峰关键词:补肾活血方 WNT/Β-CATENIN信号通路 中医药治疗骨关节炎基础研究进展 被引量:14 2012年 为了探讨中医药治疗骨关节炎的机制,文章将近年来中医药治疗骨关节炎的基础研究文献进行了整理和分析,发现中医药对骨关节炎的一些基因具有调控作用,这可能是中医药治疗骨关节炎的内在机制所在,为进一步深入研究中医药治疗骨关节炎的机理奠定了基础。 袁琴 阚卫兵 宋朋飞 谢殿洪 姜玉祥 王拥军关键词:骨关节炎 中医药治疗 正常人滑膜细胞Wnt/β-catenin信号通路激活后对MMP-2、MMP-7和MMP-9的调控作用 被引量:3 2014年 目的观察人滑膜细胞Wnt/β-catenin信号通路激活后对其下游基因MMP-2、MMP-7和MMP-9的影响。方法采用GSK-3β选择性抑制剂SB-216763作用于正常人滑膜细胞,提取胞核蛋白β-catenin,采用Western blotting检测胞核蛋白β-catenin的表达变化;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测人滑膜细胞上清液中MMP-2、MMP-7和MMP-9的表达变化。结果 Western blotting结果显示,GSK-3β选择性抑制剂SB-216763作用于人滑膜细胞后,β-catenin在胞核蛋白中的表达水平明显升高,并随着GSK-3β选择性抑制剂作用时间的延长,β-catenin的表达逐渐增强,呈时间依赖性,而在其干预的第48小时,胞核蛋白β-catenin的表达变化最明显,是正常组滑膜细胞的5.8696倍,具有统计学意义(P<0.05);酶联免疫吸附法(ELISA)结果显示,与正常组滑膜细胞比较,SB-216763干预的滑膜细胞上清液中MMP-2、MMP-7和MMP-9的表达分别是正常滑膜细胞的4.6188、3.2443和2.9979倍,具有统计学意义(P<0.05)。结论①SB-216763成功激活人滑膜细胞Wnt/β-catenin信号通路;②MMP-2、7、9在人滑膜细胞Wnt/β-catenin信号通路激活后其表达显著升高,证明激活Wnt/β-catenin信号通路对MMP-2、MMP-7和MMP-9的表达有一定的调控作用。③Wnt/β-catenin信号通路在骨性关节炎患者中是激活的,而其对MMP-2、MMP-7和MMP-9的调控可能是导致关节软骨降解,促进骨关节炎形成的作用机制之一。该实验结果有助于从单一通路阐释Wnt/β-catenin信号通路对膝骨关节炎的作用机制。 宋朋飞 阚卫兵 赵婧 姜玉祥 谢殿洪 肖志峰关键词:MMP-2 MMP-7 MMP-9 上海许氏伤科治疗桡骨远端骨折临床疗效 被引量:1 2012年 目的:探讨运用上海许氏伤科"动静结合"治疗原则治疗桡骨远端骨折的临床疗效。方法:对临床56例患者应用手法整复小夹板固定配合我科自制"星竭消肿散"(胆南星、血竭、石菖蒲、防风等)外敷及功能锻炼,并观察临床疗效。结果:本组56例经4~8个月,平均半年的随访,优46例(82%),良8例(14%),差2例(4%),总优良率96%。结论:手法复位小夹板固定中药外敷及功能锻炼治疗桡骨远端骨折疗效确切,优势明显。 宋朋飞 姜玉祥 阚卫兵 谢殿洪关键词:桡骨远端骨折 手法整复 胆南星 血竭 基质金属蛋白酶与骨关节炎的关系 被引量:15 2011年 骨性关节炎(osteoarthritis,OA)是影响人类健康最常见的关节疾患之一,其发生率随年龄的增加而增高。OA对关节的所有结构产生着影响,通常伴随着软骨的降解、骨赘形成和软骨下骨的改变。 宋朋飞 阚卫兵 袁琴 谢殿洪 姜玉祥 王拥军关键词:骨关节炎 基质金属蛋白酶 软骨下骨 骨性关节炎 关节疾患 骨赘形成