许松梅 作品数:5 被引量:4 H指数:1 供职机构: 四川大学生命科学学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 生物学 医药卫生 更多>>
增强型绿色荧光蛋白基因转染CHO细胞研究 2006年 目的:探讨增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)在中华仓鼠卵巢细胞(CHO-DHFR)细胞中的作用。方法:将增强型绿色荧光蛋白基因的真核表达载体pcDNA3.1(+)-EGFP,转染至培养的中华仓鼠卵巢细胞(Chinese Hamster Ovary,CHO-DHFR-)中。结果:成功表达并产生绿色荧光。结论:证明EGFP是一种良好的报告基因和筛选标志,为进一步研究应用最广泛的哺乳动物细胞表达系统—CHO细胞表达系统奠定了基础。 郑立恒 魏会平 许松梅 孙伟华 李保国 胡火珍 刘全胜关键词:增强型绿色荧光蛋白 转染 EGFP-IgG4融合基因真核表达载体的构建及其表达 被引量:3 2007年 构建增强型绿色荧光蛋白(Enhanced Green Fluorescent Protein,EGFP)和IgG4基因的融合蛋白真核表达载体pMM-EGFP-IgG4/WG,转染至中华仓鼠卵巢细胞(Chinese HamsterOvary,CHO)中成功表达,并发出绿色荧光,证明pMM-EGFP-IgG4/WG是一种良好的生产分泌型外源融合蛋白的阳性对照. 郑立恒 许松梅 何波 张青 熊华辉 刘全胜关键词:CHO细胞 转染 CTLA-4//IgG4融合蛋白在CHO//DG44细胞中的高效表达 目的:研究在中华仓鼠卵巢细胞/(Chinese hamster ovary cell,CHO/)真核表达系统中CTLA-4/IgG4融合蛋白的表达,将质粒pMMGR和pMM-CTLA4-IgG4/WG共转染CHO/DG4... 许松梅关键词:转染 纯化 文献传递 CTLA-4/Ig在CHO/DG44细胞中的高效表达 2007年 目的研究CTLA-4/Ig融合蛋白在CHO真核表达系统中的表达,并纯化所表达的CTLA-4/Ig融合蛋白,为其功能研究和临床应用奠定基础。方法将线性化的pMM-CTLA-4-IgG4/WG和pMMGR转染CHO/DG44细胞,对阳性克隆进行无血清悬浮培养,Western blot检测细胞培养液中CTLA-4/Ig融合蛋白的表达,筛选出高效稳定表达CTLA-4/Ig融合蛋白的CHO细胞;Protein A亲和层析纯化所表达的CTLA-4/Ig融合蛋白;SDS-PAGE电泳、Western印迹等对纯化的CTLA-4/Ig融合蛋白的相对分子质量、纯度、抗原特异性进行生物学鉴定。结果筛选出了能高效稳定表达CTLA-4/Ig融合蛋白的CHO细胞;纯化后的CTLA-4/Ig融合蛋白在SDS-PAGE电泳后出现一条与预期相对分子质量大小相符的蛋白条带;该蛋白能与羊抗人IgG-HRP抗体特异结合。结论获得了能够高效稳定表达具有生物学活性的CTLA-4/Ig融合蛋白的CHO细胞。 许松梅 郑立恒 刘全胜关键词:转染 地塞米松 纯化 EGFP基因转染骨髓间充质干细胞的实验研究 被引量:1 2006年 目的:探讨外源性EGFP基因转染修饰兔骨髓间充质干细胞(m esenchymal stem cells,MSCs)的可行性。方法:用增强型荧光绿色蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)作为报告基因,以脂质体法转染骨髓间充质干细胞,观察转染结果、表达情况及对靶细胞活力的影响。结果:经荧光显微镜下观察证实:成功地对骨髓间充质干细胞实现了基因转染。结论:兔骨髓间充质干细胞能够在体外适宜的条件下进行长期培养;骨髓间充质干细胞可直接作为基因靶细胞,建立稳定表达EGFP的骨髓间充质干细胞系具有可行性,为进一步做标记的MSCs细胞的移植研究奠定基础。 郑立恒 魏会平 许松梅 何波 杨明理 王黎明 刘全胜关键词:转染