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胡连霞: 作品数：20 被引量：116H指数：7; 供职机构：河北出入境检验检疫局更多>>; 发文基金：国家质检总局科技计划项目质检公益性行业科研专项项目河北省自然科学基金更多>>; 相关领域：轻工技术与工程医药卫生农业科学生物学更多>>

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流式细胞术在微生物快速检测领域的研究进展被引量：17: 2010年; 概述了流式细胞术的发展历史、工作原理及其在微生物快速检测方面的应用。; 张峻峰刘道亮赵占民孙晓霞胡连霞; 关键词：流式细胞术微生物

副溶血性弧菌实时荧光单引物等温扩增方法的建立被引量：1: 2016年; 以副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus)gyr B基因特异序列为靶序列,设计RNA-DNA组合引物和链终止序列,优化反应体系,建立实时荧光单引物等温扩增(Real-time fluorescence single primer isothermal amplification,实时荧光SPIA)检测副溶血性弧菌的方法。实时荧光SPIA在40 min反应时间内,对3株副溶血性弧菌和16株其他食源性致病菌进行实时荧光SPIA检测,结果表明除3株副溶血性弧菌外,其他细菌均未扩增出荧光曲线。进一步研究表明,实时荧光SPIA检测副溶血性弧菌纯培养DNA的灵敏度为8.2 fg/μL,对副溶血性弧菌菌悬液的检测灵敏度为13.5 CFU/m L;对鳕鱼、海蟹、牡蛎和咸鸭蛋等4种模拟样品中副溶血性弧菌的检出限均为14.7 CFU/g。研究结果表明,实时荧光SPIA检测副溶血性弧菌灵敏度高,特异性强,耗时短,方法简便。; 王建昌胡连霞段永生李静王金凤; 关键词：副溶血性弧菌 B基因

应用流式细胞技术快速检测液态商品中的细菌总数被引量：11: 2011年; 建立应用流式细胞技术(flowcytometry,FCM)快速检测液态商品牛奶、果汁中的细菌总数的方法。采用膜过滤、离心技术对果汁样品进行前处理,去除影响FCM检测的基质颗粒,使样品达到FCM可检测状态,检测限达到101CFU/mL数量级。对液态商品牛奶进行重复性和验证实验,检测结果经Q检验法和方差分析,在一定范围浓度下,FCM检测液态商品中的细菌总数与平板法成线性相关。FCM是一种比平板法检测细菌总数更加快速、准确的方法。; 刘道亮赵占民胡连霞张峻峰孙晓霞; 关键词：流式细胞技术细菌总数

降解黄曲霉毒素M1菌株筛选方法的建立与菌株鉴定被引量：3: 2017年; 为实现对黄曲霉毒素M1(Aflatoxin M1,AFM1)的生物降解,建立从环境中筛选AFM1降解菌株的方法并得到降解菌株。结果表明:对采自农田、粮库、牛场的300个土壤或粪便样品,初筛选出能在以香豆素为唯一碳源的培养基上生长的菌株37株;用液相色谱法测定降解率进行复筛,得到3株降解率在50%以上的菌株;进而对复筛菌株进行生长条件和耐受性实验,筛选出降解率为78.6%,生长速度快、长势好、稳定期长,且降解过程中热稳定性好的菌株102807。经过菌落细胞形态学、生理生化特征及16S r DNA序列系统发育分析,鉴定为纤维纤维微菌(Cellulosimicrobium cellulans)。首次发现了纤维纤维微菌对AFM1的生物降解功能。; 孙晓霞胡连霞姜彦芬陈志敏付琦; 关键词：黄曲霉毒素M1 生物降解

美国和澳大利亚进境棉花中的霉菌测试及危害分析: 2019年; 为了解进境棉花中有害霉菌的情况,对美国和澳大利亚2017年进境我国的棉花样品进行了菌落检测。结果表明,进境棉花中均含有有害霉菌,只是种类及含量不同,美棉、澳棉中均含有黄曲霉、黑曲霉、阿曲霉、土曲霉以及芽孢杆菌。因而建议从事进境棉花检验或接触者应做好安全防范措施。; 连素梅孙晓霞娄巧哲李轲胡连霞牛增元郭会清; 关键词：美棉危害分析

马铃薯中黑胫病菌的实时荧光LAMP检测方法及试剂盒: 本发明提供了一种马铃薯中黑胫病菌的实时荧光LAMP检测方法及试剂盒，采用6条特异性引物对马铃薯中黑胫病菌进行实时荧光LAMP检测方法，不仅可实现肉眼观察和荧光呈色结果的判定，同时可通过实时荧光LAMP分析仪实现对马铃薯黑...; 朱杰华杨志辉胡连霞赵冬梅杨毅清; 文献传递

单核细胞增生李斯特氏菌实时荧光SPIA方法的建立被引量：2: 2017年; 以单核细胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes,L.monocytogenes)hly A基因为靶序列,设计5'端为RNA序列,3'端为DNA序列的嵌合引物和链终止Blocker序列,经过优化,建立实时荧光单引物等温扩增(Real-time fluorescence SPIA)方法,进行特异性、检出限实验,并对不同DNA提取方法进行比较。结果显示,确定荧光染料SPIA法的最佳反应温度为58℃,反应30 min,引物特异性良好,只有4株不同来源的L.monocytogenes DNA产生典型的S型荧光扩增曲线。对L.monocytogenes纯培养DNA的检出限为3.6×10~1fg/μL,相应菌液浓度为1.2×10~1CFU/m L;Realtime fluorescence SPIA检测试剂盒法、水煮法、溶菌酶-蛋白酶K法、饱和酚提取法四种方法提取DNA,均产生典型的扩增曲线,Ct值没有明显差异。对人工添加猪肉火腿样品中的L.monocytogenes,采用水煮法提取DNA的检出限为1.1×10~2CFU/g。结果表明,所建立的L.monocytogenes的Real-time fluorescence SPIA新型等温扩增方法,特异性强、灵敏度高、不受DNA纯度的影响、快速、简便。; 王建昌胡连霞孙晓霞李静; 关键词：荧光单核细胞增生李斯特氏菌 A基因

实时荧光单引物等温扩增(SPIA)技术检测大肠杆菌O157的方法研究被引量：7: 2016年; 建立一种快速、灵敏的食品中肠出血性大肠杆菌O157的检测方法。以大肠杆菌O157的特异性基因(rfbE)为靶序列,设计相应的RNA/DNA组合引物和链终止序列,优化引物浓度、Mg2+浓度、温度等反应条件,建立实时荧光单引物等温扩增(Real Time Fluorescence Single Primer Isothermal Amplification,实时荧光SPIA)检测大肠杆菌O157的方法,并对该方法的特异性、灵敏度以及人工污染检出限进行检测。确定了实时荧光SPIA法的最适反应条件,该方法可以在55 min内完成检测工作,除大肠杆菌O157外,其他细菌均未产生特异性荧光扩增曲线,而且实时荧光SPIA检测大肠杆菌O157的灵敏度为2.0 CFU/m L,对猪肉人工污染样品中大肠杆菌O157的检出限是4.0 CFU/g。实时荧光SPIA方法检测大肠杆菌O157具有耗时短,灵敏度高,特异性强,方法简便的优越性,为检测食源性致病菌构建了一个技术平台。; 李瑞王建昌李静胡连霞张伟; 关键词：大肠杆菌O157

应用环介导等温扩增检测阪崎肠杆菌被引量：2: 2011年; 建立环介导等温扩增检测阪崎肠杆菌的方法,通过肉眼可见的白色沉淀,判断检测结果。将阪崎肠杆菌(ATCC29544)的16S-23SrRNA间区序列作为靶基因,设计2对特异引物,优化反应条件,进行LAMP扩增。对产物进行酶切分析,与理论上的预期结果相一致。通过测序比对,与GenBank上报道的同源性达到99%。用25株食源性致病菌证实该引物特异性强。LAMP扩增20min,其灵敏度为4.3×102 fg/tube,结果表明,LAMP方法检测阪崎肠杆菌,灵敏度高、特异性强、耗时短、方法简便。; 胡连霞; 关键词：环介导等温扩增 LAMP 阪崎肠杆菌

基于内参系统的阪崎肠杆菌实时荧光定量PCR检测方法的建立被引量：2: 2016年; 根据阪崎肠杆菌ompA靶基因设计特异性引物和探针,并加入内参(IAC),建立能够实时监控反应过程的荧光定量PCR检测方法。结果表明,该方法对阪崎肠杆菌基因组DNA的最低检测限为1pg;对细菌的最低检测限为1×10~4 CFU;对含有靶基因质粒的最低检测限为10~3拷贝;Ct值与模板拷贝数均呈良好的线性关系(R^2=0.999)。人工污染试验结果表明,在初始菌量为10CFU/25g奶粉样品时,采用水洗加试剂盒法和水煮法提取DNA,阪崎肠杆菌均在增菌10h时检出。研究结果为进一步优化和完善阪崎肠杆菌分子生物学方法的标准化提供了参考。; 王金凤王建昌胡连霞孙晓霞陈志敏姜彦芬; 关键词：阪崎肠杆菌 OMPA 实时荧光定量PCR 内参

胡连霞

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