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人ZP3精子受体相关的细胞表位嵌合肽的基因表达: 2001年; 曹佐武杨林刘穗玲肖銮娟谢琪璇王珣章龙綮新潘善培王自能; 关键词：基因表达

小鼠口服猪卵透明带DNA避孕疫苗pVAX1-pZP3α的抗生育研究被引量：4: 2004年; 　目的:评价口服卵透明带DNA避孕疫苗pVAX1-pZP3α壳聚糖纳米微粒诱发的黏膜免疫反应、抗生育作用和对卵巢结构的影响,探讨用黏膜免疫避免卵透明带抗原免疫引起卵巢功能紊乱的可行性。方法:制备pVAX1-pZP3α壳聚糖纳米微粒,10只昆明系小鼠口服免疫,第3周和第6周分别加强免疫一次,剂量为0 5mL/只,含pVAX1-pZP3αDNA50μg;对照组10只雌小鼠口服相同剂量不含pVAX1-pZP3α的壳聚糖。免疫前和免疫后隔周取小鼠血清、阴道冲洗液,用ELISA法检测抗pZP3IgA和IgG。首次免疫后第12周雌雄合笼交配,统计雌鼠怀孕情况;解剖取出双侧卵巢,制作石蜡切片,光镜观察卵巢病理学变化。结果:免疫组80%小鼠的血清和50%小鼠的阴道冲洗液可检测到抗pZP3IgA,反应强度与持续时间有明显的个体差异;免疫组5只小鼠未怀孕,对照组全部怀孕,抗生育效果与合笼时抗pZP3IgA反应有关;免疫组未怀孕小鼠卵巢组织结构与免疫组怀孕小鼠及对照组小鼠无差别。结论:口服pVAX1-pZP3α壳聚糖纳米微粒免疫小鼠能诱发生殖道黏膜免疫反应,发挥抗生育作用,对卵巢组织结构没有影响。黏膜免疫是克服卵透明带抗原免疫引起卵巢功能紊乱的一种值得深入研究的方法。; 董志炜潘善培谢琪璇肖銮娟孙彩军余巍何柳媚; 关键词：卵透明带避孕疫苗

重组人巨细胞病毒嵌合肽基因在毕赤酵母中的克隆和表达被引量：3: 2005年; 为了在毕赤酵母中表达带有组氨酸纯化标记的重组人巨细胞病毒嵌合肽 (rHCMVp) ,根据其基因序列 ,设计引物从pPIC9K rHCMVp上扩增得到目的基因片段 ,并导入毕赤酵母诱导型表达载体pPICZαA中。通过电击将线性化的重组质粒转化到毕赤酵母X33细胞中 ,筛选获得表达量较高的重组菌株 ,研究了该菌株生长的培养条件 ,包括不同诱导时间、甲醇浓度、pH值对人巨细胞病毒嵌合肽表达的影响。 2L发酵罐进行了高密度发酵 ,经 1 %的甲醇、pH6 0的条件下诱导48h ,最终菌体密度OD60. 0 达到 1 80 ,每升发酵液中含目的蛋白 78. 7mg ,产量比摇瓶提高了 4 8倍。rHCMVp可通过高密度发酵大量获得。; 谢琪璇余巍潘善培肖銮娟彭雅林张春雪; 关键词：人巨细胞病毒 HCMV 诱导型目的基因毕赤酵母重组质粒

重组人卵透明带蛋白(rhZP3)对人精子顶体反应的诱导作用被引量：1: 2005年; 目的:观察重组人卵透明带蛋白(rhZP3)对人精子顶体反应的诱导作用。方法:正常生育力人精子经过获能后,分别用BSA、孕酮和含不同浓度的重组人ZP3蛋白的培养液共孵育,诱导精子顶体反应,对实验组和对照组的精子的顶体发生状态用考马斯亮蓝染色法进行评价。结果:精子与培养液共孵育30 min后,rhZP3组与BSA组之间差异有显著性(P<0.05),顶体反应率随rhZP3质量浓度增加而升高。结论:重组人ZP3蛋白对人精子顶体反应有显著的诱导效应,且在一定范围内与质量浓度成正相关,重组人ZP3蛋白具有发展精子顶体反应试剂盒的潜能。; 谢琪璇史卫卫张韫李文星张春雪肖銮娟潘善培; 关键词：精子顶体反应

利用H_2O_2提高GS115rhZP3培养中的溶氧和目的蛋白产量被引量：2: 2004年; 目的:提高毕赤酵母摇瓶培养中的溶氧,从而提高目的蛋白的表达量.方法:在rhZP3工程菌培养过程分别加入不同浓度的H2O2,甲醇诱导培养后,取培养液上清进行SDS-PAGE电泳和Westernblot,并与不加H2O2的对照组比较,分析H2O2对重组人卵透明带ZP3蛋白(rhZP3)在毕赤酵母中表达量的影响.结果:H2O2可提高培养基的溶氧量.当H2O2浓度为5mmol/L时,目的蛋白的表达量最高.结论:在rhZP3毕赤酵母工程菌摇瓶培养中,加入H2O2可提高rhZP3的表达量.; 肖銮娟谢琪璇潘善培唐键; 关键词：过氧化氢毕赤酵母溶氧

CTRP3蛋白的应用: 本发明公开一种CTRP3蛋白的应用，属于生物技术及医药领域。本发明提供了CTRP3蛋白可以增强发育中卵泡对卵泡刺激素的敏感度。并通过鉴定CTRP3蛋白在人和小鼠卵巢中的表达表明其为卵巢自体就拥有的一种蛋白，可作为一种药物...; 禹艳红卢小圣毛周飞杨柳红齐绪峰蔡冬青冯珊珊肖銮娟; 文献传递

猪卵透明带ZP3α真核表达载体的构建及体外瞬时表达被引量：3: 2004年; 目的 :构建猪卵透明带ZP3α真核表达载体 ,为探讨卵透明带DNA疫苗避孕疫苗奠定基础。方法 :采用PCR法获得了去除N端信号肽序列和C端跨膜区序列的猪卵透明带ZP3α的cDNA序列片段 ,以专门用于发展DNA疫苗的质粒pVAX1为载体构建了真核细胞表达质粒pVAX1-pZP3α。通过脂质体转染将之导入HeLa细胞进行体外瞬时表达 ,然后采用RT -PCR和间接免疫荧光技术 (IIF)检测pZP3α在mRNA水平的转录和蛋白质水平上的表达。结果 :真核细胞表达质粒pVAX1-pZP3α构建成功 ,用RT -PCR和IIF技术检测到了pZP3α在HeLa细胞中的转录与表达。结论 :真核表达载体pVAX1-pZP3α的成功构建和表达为研制开发有效的人用卵透明带DNA避孕疫苗奠定了基础。; 孙彩军潘善培谢琪璇肖銮娟唐键; 关键词：猪卵透明带 DNA疫苗免疫避孕

一种水循环自净繁殖和养殖蛙的装置: 本实用新型公开了一种水循环自净繁殖和养殖蛙的装置。该装置包括蛙养殖缸、蛙-蝌蚪两用养殖缸和过滤缸；蛙养殖缸和蛙-蝌蚪两用养殖缸分别与过滤缸连接。本实用新型提供的装置，可在同一水体上，在不同的缸，同时和分别繁殖和养殖蝌蚪、...; 蔡冬青杨吉锋齐绪峰李瑞怀陈夷林李慧敏沈晓涛郑馨李艳梅肖銮娟; 文献传递

重组人卵透明带蛋白及其多克隆抗体对精子-透明带结合的影响被引量：1: 2006年; 为了探讨毕赤酵母表达的重组人卵透明带ZP3蛋白(recombinant human zona pellucida-3 protein,rhZP3)及其多克隆抗体对小鼠和人精卵结合的影响,采用不同浓度的rhZP3以及空白培养液分别处理小鼠精子,然后再与小鼠卵子进行结合实验,观察经过不同处理的精子对透明带黏附及体外受精率的影响;用rhZP3以及空白培养液分别处理人精子,然后再与人卵子进行结合实验,观察经过不同处理的精子对透明带黏附的影响;用抗rhZP3抗体与阴性血清分别处理小鼠和人卵子,再与精子进行结合实验,观察多克隆抗体对精子粘附以及小鼠体外受精率的影响。实验结果表明,rhZP3和抗rhZP3多克隆抗体既能抑制人的体外精卵结合,也能抑制小鼠体外精卵结合,提示rhZP3具有天然透明带的特性,有发展成避孕疫苗和作为检测透明带抗体检测试剂的可能。; 谢琪璇马丽潘善培张韫张春雪肖銮娟史卫卫李文星; 关键词：卵透明带多克隆抗体避孕疫苗

大鼠骨髓间充质干细胞的分离纯化及生物特性的初步鉴定: 目的：比较两种大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells，MSCs)的体外分离纯化方法，并初步鉴定MSCs的生物特性，为进一步研究其分化调控机制和应用打下基础。方法：本研究分别利用人淋巴细胞分离液...; 肖銮娟; 关键词：骨髓间充质干细胞 CD抗原细胞周期染色体核型; 文献传递

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