童熹
- 作品数:9 被引量:1H指数:1
- 供职机构:重庆医科大学附属口腔医院更多>>
- 发文基金:重庆市教育委员会科学技术研究项目重庆市自然科学基金重庆市卫生局科研项目更多>>
- 相关领域:医药卫生化学工程生物学更多>>
- 舌鳞癌细胞微环境对小鼠树髓源性树突状细胞生长分化影响
- 目的:利用不同剂量的人舌鳞癌细胞Tca8113培养上清液模拟肿瘤发展不同时期肿瘤微环境对小鼠髓源性树突状细胞生长分化及功能的影响,并探讨其发生的可能机制。
方法:利用无菌小鼠长骨骨髓细胞,对照组在常规重组小鼠粒细胞...
- 童熹
- 关键词:细胞微环境髓源性树突状细胞生长分化培养上清液TCA8113
- 舌鳞状细胞癌对卡铂耐药过程中切除修复交叉互补基因的表达被引量:1
- 2011年
- 目的探讨Tca8113对卡铂(carboplatin)体外耐药过程中,切除修复交叉互补基因1(excision repair cross-complementation 1,ERCC-1)的表达与癌细胞耐药的关系。方法采用逐步递增法将不同质量浓度卡铂体外作用于Tca8113,设置1个对照组并筛选出6个耐药组(1~6组);采用甲基噻唑基四唑(MTT)法检测每组细胞的半数抑制浓度(half inhibitory concentraction,IC50),反转录聚合酶链反应法(RT-PCR)和蛋白质印迹法检测每组细胞ERCC-1在mRNA及蛋白水平的表达。结果随着耐药性的逐渐增加,各组细胞ERCC-1在mRNA水平的表达逐渐增加(对照组0.84±0.06,1组0.96±0.06,2组1.07±0.11,3组1.13±0.09,4组1.19±0.08,5组1.29±0.07,6组1.47±0.08),相邻或间隔数组间比较,差异有统计学意义(P〈0.05);各组细胞ERCC-1在蛋白水平的表达逐渐增加(对照组0.69±0.05,1组0.86±0.04,2组1.01±0.04,3组1.24±0.09,4组1.44±0.14,5组1.56±0.19,6组1.88±0.22),相邻或间隔数组间比较,差异有统计学意义(P〈0.05);各组细胞IC50值与RT—PCR条带灰度值呈正相关(r=0.91,P〈0.01);与蛋白质印迹条带灰度值呈正相关(r=0.88,P〈0.01)。结论ERCC-1的高表达可能为Tca8113对卡铂耐药的一个标志;为反转耐药提供了一个可能的作用靶点。
- 李显李勇邱丽华童熹王启明李婷
- 关键词:卡铂
- 甲基莲心碱对Tca8113/CBP卡铂耐药性的逆转作用
- 2011年
- 目的建立人舌鳞癌卡铂耐药细胞株Tca8113/CBP,探讨甲基莲心碱Nef对Tca8113/CBP卡铂耐药性的逆转作用及其机制。方法采用逐步递增卡铂浓度、体外间歇诱导法建立Tca8113/CBP耐卡铂细胞株;MTT法检测Nef对Tca8113/CBP卡铂耐药性的逆转作用;RT-PCR法检测Nef作用前后Tca8113/CBP内耐药相关基因肺耐药蛋白LRP与成纤维细胞肌型原肌球蛋白FMT的表达水平;免疫荧光观察Nef作用前后细胞形态结构变化。结果历时5个月建立的Tca8113/CBP细胞株对卡铂耐药性稳定,耐药指数为4.06。Nef对Tca8113/CBP的卡铂耐药性有逆转作用,逆转倍数达到2.12倍;与Tca8113/CBP细胞比较,经Nef干预后,Tca8113/CBP细胞内LRP与FMT mRNA表达水平明显降低(P<0.01),细胞内F-actin的含量也明显下降,排列整齐,分布趋于均匀,接近非耐药Tca8113细胞水平。结论 Nef对Tca8113/CBP的卡铂耐药性有逆转作用,其机制可能与干预Tca8113/CBP细胞内LRP和FMT表达,增加Tca8113/CBP细胞内卡铂的含量,改变微丝结构,降低细胞黏附能力,干扰细胞增殖周期有关。
- 王启明李勇李显童熹李婷
- 关键词:甲基莲心碱卡铂耐药性逆转
- 小鼠树突细胞成熟前后的形态及其微丝蛋白的适应性改变
- 2010年
- 目的研究树突细胞(DC)成熟前后的形态及其微丝蛋白的适应性变化。方法经重组小鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子、白细胞介素-4诱导小鼠骨髓单核细胞为未成熟树突细胞,培养至第6天时,用脂多糖(LPS)诱导成熟树突细胞(mDC),在倒置相差显微镜和荧光显微镜下观察并前后对比分析细胞在成熟前后的表面突起和内部微丝蛋白的变化。结果 mDC高表达CD11c、MHC-Ⅱ和CD86。成熟前的DC体积较小,随着细胞的成熟,直径逐渐增大。成熟过程中,DC表面突起逐渐增多、变粗且变长,呈怒张状,在第7天达到高峰,以后突起逐渐松弛变软,最后又回复至短细、稀疏状态。微丝蛋白主要集中于细胞膜和触突上,其平均荧光强度在LPS刺激24h后最高,48h后明显降低;细胞内F-肌动蛋白在成熟过程中逐渐减低,LPS刺激16h后达高峰,以后细胞内又重新出现F-肌动蛋白的表达,且与细胞膜、突起间基本均匀一致。结论树突细胞体积增大,突起增多增长,密度加大,旨在尽可能地增大细胞的表面积,最大限度地发挥DC提取、抗原呈递的功能;细胞核增大,暗示细胞核在抗原的处理、加工过程中发挥着重要的作用。
- 李代庆李勇季平童熹李显王启明
- 关键词:树突细胞脂多糖细胞骨架
- 甲基莲心碱对Tca8113/CBP卡铂耐药性的逆转作用的研究
- 目的:建立人舌鳞癌卡铂耐药细胞株Tca8113/CBP,探讨甲基莲心碱Nef对Tca8113/CBP卡铂耐药性的逆转作用及其机制.方法:采用逐步递增卡铂浓度、体外间歇诱导法建立Tca8113/CBP耐卡铂细胞株;MTT法...
- 王启明李勇李显童熹李婷
- 舌鳞癌细胞微环境对小鼠髓源性树突状细胞生长分化的影响
- 2011年
- 目的:探讨舌鳞癌微环境对小鼠髓源性树突状细胞生长分化的影响。方法:小鼠骨髓前体细胞,在含重组小鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子和重组小鼠白介素-4培养体系中体外培养。实验组在上述培养液中再加入Tca8113培养上清液模拟肿瘤微环境(Tumor microenvironment,TME);对照组不加Tca8113培养上清液;镜下观察DCs形态,台酚蓝染色法计活细胞数,流式细胞术检测DCs表型(CD86、CD11c、MHC-Ⅱ)表达。结果进行LSD-t统计学分析。结果:①Tca8113微环境下可诱导出具有典型形态及表型树突状细胞;②低剂量Tca8113培养上清液微环境刺激增强刺激DCs分化成熟,中等剂量Tca8113培养上清液微环境不影响成熟DC(Mature DC,mDCs)分化,但能促进骨髓前体细胞分化为未成熟DC(Immature DC,imDC);高剂量Tca8113培养上清液微环境抑制DCs分化成熟。结论:Tca8113微环境下可成功诱导骨髓前体细胞分化为树突状细胞;舌鳞癌微环境对树突状细胞分化影响的多样性与环境中免疫因子浓度密切相关。
- 童熹李勇李显王启明季平王涛
- 关键词:树突状细胞免疫逃逸免疫抑制因子
- 两种卡铂用药方法对人舌癌细胞株(Tca8113)耐药性的影响
- 2011年
- 目的:探讨2种不同卡铂用药方式对人舌鳞状细胞癌株Tca8113耐药性的影响。方法:将Tca8113细胞株随机设置为1个对照组、6个不同程度的用药组和1个大剂量冲击用药组,然后加入相应浓度卡铂体外作用。用MTT法检测每组细胞的IC50值(半数抑制浓度),RT-PCR法检测每组细胞ERCC1 mRNA的表达。结果:随着药物浓度和作用次数的增加,小剂量逐步耐药法诱导的各组细胞IC50值和ERCC1 mRNA表达量均呈逐步递增的趋势,且它们呈正相关(r=0.878,P<0.01);大剂量冲击用药组细胞IC50值和ERCC1 mRNA表达量界于小剂量逐步耐药法的较小剂量组和较大剂量组之间,且有统计学差异(P<0.05)。结论:小剂量逐步多次用药法易引起Tca8113对卡铂的耐药性。
- 李显李勇童熹王启明李代庆李婷
- 关键词:TCA8113卡铂耐药ERCC1
- 舌鳞状细胞癌(Tca8113)对卡铂耐药过程中ERCC1的表达
- 目的:探讨Tca8113对卡铂体外耐药过程中,ERCC1的表达与癌细胞耐药的关系.方法:采用逐步递增法将不同浓度卡铂体外作用于Tca8113,设置1个对照组和筛选出6个不同程度耐药组;采用MTT法检测每组细胞的IC50(...
- 李显李勇邱丽华童熹王启明
- 关键词:TCA8113DNA修复卡铂耐药ERCC1