申聪香
- 作品数:40 被引量:120H指数:6
- 供职机构:南方医科大学珠江医院更多>>
- 发文基金:广东省自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生农业科学生物学自动化与计算机技术更多>>
- 增强型表达载体调控TK基因靶向杀伤鼻咽癌的体内外实验研究
- 目的探讨经改良构建的增强型表达载体hTERTp/CMV/TK/egfp/pGl3调控TK基因靶向杀伤鼻咽癌细胞及裸鼠移植瘤的效应。方法将改良构建后的增强型载体hTERTp/CMV/TK/egfp/pGl3及单启动子载体h...
- 文忠申聪香牟少凤关小芳赖肖芬于超生
- 鼻内镜术后囊泡形态学变化及其对鼻腔预后转归影响的临床观察研究
- 目的探讨慢性鼻窦炎(伴或不伴鼻息肉)鼻内镜术后术腔囊泡形成过程、形态学变化规律对鼻腔术后黏膜愈合转归过程的影响,为缩短术后恢复时间提供理论依据。方法1对象按照慢性鼻窦炎、鼻息肉诊断和治愈标准(2007 EPOS),纳入慢...
- 文忠王军旗申聪香于超生赖肖芬王海丽钟品能杨柯柯
- 文献传递
- 缺氧调控端粒酶活性及抑制鼻咽癌细胞增殖实验研究
- 2015年
- 目的探讨缺氧及siRNA沉默缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)后对鼻咽癌细胞中端粒酶催化亚单位(telomerase catalytic subunit,hTERT)、细胞周期和化疗耐药的影响。方法采用三气培养箱对鼻咽癌细胞5-8F和CNE2进行缺氧处理(1%O2),蛋白质印迹法检测不同乏氧时相(0~72h)HIF-1α和hTERT蛋白的表达。将HIF-1α基因特异性siRNA分别转染鼻咽癌细胞株5-8F和CNE2,筛选出沉默效率最高的siRNA,实验分为未处理组(常氧)、未处理组(缺氧)、Negative-siRNA(缺氧)和HIF-1α-siRNA(缺氧),荧光定量PCR及蛋白质印迹检测瞬时转染后hTERT及HIF-1α的表达。流式细胞术(flow cytometry,FCM)分析缺氧或沉默HIF-1α后对细胞周期的影响。MTT法检测缺氧或沉默HIF-1α后,鼻咽癌细胞对顺铂(DDP)和5-氟尿嘧啶(5-FU)的化疗敏感性。结果缺氧处理0~72h后鼻咽癌5-8F细胞HIF-1α(F=37.147,P〈0.001)和hTERT(F=70.069,P〈0.001)蛋白的表达上调,差异有统计学意义。HIF-1α-siRNA对5-8F细胞瞬时转染率〉98%。HIF-1α-siRNA组hTERT mRNA表达量为0.37±0.05,显著低于未处理组(缺氧)的1.00±0.00和Negative-siRNA(缺氧)的0.95±0.01,F=360.339,P〈0.001;hTERT蛋白表达量为(0.27±0.05),显著低于未处理组(缺氧)0.54±0.00和Negative-siRNA组(缺氧)0.53±0.01,F=24.010,P〈0.001。未处理组(缺氧)G0/G1期细胞比例明显增加(45.63±2.01)%,显著高于未处理组(常氧)的(26.75±1.28)%,P〈0.001。5-8F细胞未处理组(常氧)对5-FU的IC50分别为(17.30±3.31)μg/mL,未处理组(缺氧)为(32.04±12.75)μg/mL,Negative-siRNA组为(33.90±0.87)μg/mL,HIF-1α-siRNA组为(13.72±2.36)μg/mL,F=3.704,P〈0.001。5-8F细胞缺氧组对DDP的化疗敏感性也降低,沉默HIF-1α后,5-8F细胞对DDP的化疗敏感性明显提高。除细胞周期外,CNE2与5-8F的结果均一致。结论缺氧促使鼻咽癌细胞发生G1/S阻滞及
- 史欣刘艳慧申聪香文忠李冠雪付新洒
- 关键词:鼻咽肿瘤缺氧诱导因子端粒酶逆转耐药
- 人鼻咽癌CD133^+干细胞的生物学特性及意义被引量:11
- 2012年
- 背景:有研究表明肿瘤细胞株中存在肿瘤干细胞,是肿瘤复发、转移的根源,但人鼻咽癌细胞株CNE-2中肿瘤干细胞的表达及生物学特性至今少有报道。目的:观察人鼻咽癌CD133+干细胞生物学特性及意义。方法:采用流式细胞仪检测人鼻咽癌细胞株CNE-2中CD133的表达情况。免疫磁珠分选技术获得人鼻咽癌CD133+干细胞,分别采用无血清培养法、CCK-8法、平板克隆形成试验及裸鼠体内成瘤实验检测CD133+干细胞的体外增殖及体内成瘤能力,并将其与CD133-及未分选鼻咽癌细胞进行比较,以了解CD133+干细胞的生物学特性。结果与结论:免疫磁珠富集的CD133+细胞在无血清培养基中呈悬浮生长,并可以形成肿瘤干细胞球。CD133+细胞与CD133-细胞比较具有较高的克隆形成能力(P<0.01);CD133+细胞在裸鼠体内的成瘤率高于CD133-细胞(P<0.05)。结果证实,鼻咽癌CD133+干细胞能在体外分离培养,形成干细胞球,增殖能力强,在裸鼠体内具有极强的成瘤能力。
- 王海丽文忠申聪香钟品能王军旗
- 关键词:鼻咽癌肿瘤干细胞干细胞培养
- hTERT及CMV双调控TK基因靶向杀灭鼻咽癌细胞的实验研究被引量:2
- 2010年
- 目的探讨hTERT启动子及CMV增强子双调控表达载体调控TK基因靶向杀灭鼻咽癌细胞的效应。方法将双调控增强型载体及hTERT单启动子载体(作为对照组)分别转染两种端粒酶(+)的人鼻咽癌5-8F细胞及对照组人乳腺癌MCF-7细胞及端粒酶(-)的正常人血管内皮ECV细胞,StretchPCR法验证5-8F细胞、MCF-7细胞及ECV细胞中端粒酶活性,荧光显微镜下观察TK基因绿色荧光蛋白表达差异,MTT法分析杀灭鼻咽癌细胞的效果。结果①Stretch PCR法验证人鼻咽癌细胞5-8F、人乳腺癌细胞MCF-7端粒酶活性呈阳性,人血管内皮ECV细胞端粒酶活性呈阴性。②增强型表达载体转染上述两种端粒酶(+)肿瘤细胞均有很强的荧光表达及TK基因的mRNA表达,单启动子亦有较强的荧光表达,但比增强型表达载体要弱,而ECV细胞几乎无绿色荧光。③加入GCV后,增强型表达载体对两种端粒酶(+)肿瘤细胞体外增殖均有明显抑制作用,且均高于单启动子组、空载体组及空白对照组,而增强型表达载体转染ECV细胞体外增殖无明显抑制作用。结论以hTERT启动子及CMV增强子双调控TK基因的表达载体能够靶向杀灭鼻咽癌细胞,且作用明显强于单启动子载体组。这种新型高效、靶向增强型载体有可能成为一种鼻咽癌临床靶向基因治疗的新策略。
- 申聪香文忠关小芳牟少凤
- 关键词:鼻咽癌端粒酶
- 外周血循环hTERT mRNA和CK19 mRNA的表达与鼻咽癌肿瘤微转移的相关性研究被引量:6
- 2018年
- 目的探讨鼻咽癌患者外周循环血人端粒酶逆转录酶(hTERT)mRNA和细胞角蛋白19(CK19)mRNA表达与肿瘤微转移的相关性。方法采用实时荧光定量PCR技术(qRT-PCR)定量检测44例鼻咽癌患者治疗前后外周循环血hTERT mRNA及CK19mRNA定量表达,并分析其与临床病理特征的关系,同时以20例健康体检者作为对照。结果对照组外周血中CK19mRNA相对表达量为0.85±0.50,鼻咽癌患者外周血中CK19mRNA水平为10.97±4.60,差异有统计学意义(t=-14.39,P<0.01);健康体检者外周血中hTERT mRNA相对表达量为1.09±0.40,鼻咽癌患者外周血中hTERT mRNA水平为10.45±3.81,差异有统计学意义(t=-16.64,P<0.01)。鼻咽癌患者外周血hTERT mRNA和CK19mRNA的表达与临床分期、T分期、N分期、M分期有相关性(P<0.05)。治疗后鼻咽癌患者hTERT mRNA的表达量由10.75±3.81降低至5.46±2.00,而CK19mRNA的表达量(5.63±1.91)较治疗前(10.97±4.60)亦明显下降(P<0.01)。结论鼻咽癌外周血hTERT mRNA和CK19mRNA的表达有可能作为预测外周血肿瘤细胞微转移和判断疗效的指标之一。
- 付新洒曹彦洋李冠雪陈芳王晓琪杨梦雪蔡智谋钟庆雯文忠申聪香
- 关键词:HTERTMRNACK19MRNA外周血微转移
- 依据组胺及白三烯临床及实验相结合的变应性鼻炎个体化治疗策略探讨
- 目的:探讨将组胺及白三烯(Cys-LT)主要临床表现及实验室检测结合在变应性鼻炎临床分型及个性化治疗模式选择的作用及意义。方法:结合变应性鼻炎患者临床主要症状及外周血及鼻分泌物中组胺及白三烯含量测定综合评估后分为喷嚏组、...
- 文忠张鑫雨申聪香李冠雪王会刚陈芳
- 脂肪来源间充质干细胞(ADSC)调控变应性鼻炎模型鼠T细胞免疫状态的研究
- 目的 探讨体外分离培养小鼠ADSC,并在构建变应性鼻炎模型鼠的基础上进一步探讨ADSC对模型鼠辅助性T细胞、Treg细胞的调节作用及其机制.方法 采用胶原酶消化联合贴壁筛选法分离提取小鼠ADSC;OVA联合明矾构建变应性...
- 文忠申聪香李冠雪张沈华杨柯柯
- NLRs模式识别受体在变应性鼻炎患者发病中的作用和意义被引量:5
- 2015年
- 目的:探讨核苷酸结合寡聚化结构域(NLRs)样模式识别受体家族Nod1、Nod2及Nalp3在变应性鼻炎(AR)患者发病中的作用和意义。方法:分别采用Real-Time RT-PCR、免疫组织化学及Western blot检测Nod1、Nod2、Nalp3蛋白在AR患者下鼻甲组织中的表达,以鼻中隔偏曲(NSD)患者下鼻甲黏膜作为对照,分别通过Western blot检测观察AR患者舌下脱敏治疗6个月后外周血单个核细胞中Nod1的改变,通过ELISA检测观察外周血IL-4、IL-6、IL-10、IFN-γ的变化。结果:3种Nods样受体在AR及NSD组鼻黏膜组织中均有表达,且主要表达于鼻黏膜上皮细胞、腺体上皮、炎性细胞(如浆细胞、嗜酸粒细胞)。但在AR组中Nod1mRNA及蛋白表达均低于NSD组(P<0.05),Nalp3mRNA及蛋白表达均高于NSD组(P<0.05);2组中Nod2mRNA、蛋白比较差异无统计学意义。脱敏治疗后6个月,Nod1表达改变与外周血IL-10的改变呈负相关(r=-0.88,P<0.05);Nod1表达改变与外周血IL-6的改变呈正相关(r=0.57,P>0.05)。结论:1Nod1、Nod2及Nalp3在2组组织中均有表达,但AR组Nod1表达低于NSD组,Nalp3高于NSD组,说明Nod1、Nalp3可能参与AR的发病。2舌下脱敏治疗6个月后,Nod1表达降低,其表达降低与外周血IL-10的改变呈负相关,提示Nod1可能通过调控IL-10变化参与舌下脱敏治疗机制。
- 张沈华刘艳慧申聪香李冠雪杨柯柯史欣文忠
- 间充质干细胞靶向转运胸苷激酶基因联合更昔洛韦杀伤鼻咽癌细胞被引量:1
- 2012年
- 背景:研究证实,间充质干细胞能通过基因修饰成为肿瘤治疗的靶向载体。目的:观察转染胸苷激酶基因的胸苷激酶-间充质干细胞联合更昔洛韦对鼻咽癌细胞的靶向杀伤作用。方法:应用LipofectamineTM2000将表达胸苷激酶基因的重组质粒pGL3-EGFP-胸苷激酶转染至SD大鼠间充质干细胞,观察其增殖能力。应用Transwell小室观察胸苷激酶-间充质干细胞的归巢特性;将胸苷激酶-间充质干细胞植入裸鼠,观察其致瘤性;用胸苷激酶-间充质干细胞/更昔洛韦干预人鼻咽癌细胞5-8F,观察其对细胞的杀伤作用及旁观者效应。结果与结论:荧光显微镜观察及RT-PCR检测结果提示实验成功将胸苷激酶基因转染至间充质干细胞,CCK-8检测结果显示胸苷激酶-间充质干细胞与间充质干细胞增殖能力差异无显著性意义(P>0.05)。Transwell小室迁移实验显示胸苷激酶-间充质干细胞具有归巢特性,裸鼠移植瘤实验显示胸苷激酶-间充质干细胞无致瘤性。CCK-8检测检测发现胸苷激酶-间充质干细胞/更昔洛韦具有旁观者效应,可明显降低5-8F的生存率(P<0.01)。提示胸苷激酶-间充质干细胞/更昔洛韦对鼻咽癌细胞具有靶向迁移及杀伤作用,间充质干细胞可作为治疗鼻咽癌的理想靶向转运载体。
- 钟品能文忠申聪香王海丽王军旗
- 关键词:间充质干细胞归巢旁观者效应