田男 作品数:35 被引量:62 H指数:4 供职机构: 浙江中医药大学生命科学学院 更多>> 发文基金: 浙江省自然科学基金 吉林省科技发展计划基金 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 化学工程 生物学 更多>>
佛手柑内酯通过PI3K/Akt信号通路诱导人肝癌细胞HepG2和Hep3B凋亡的机制 被引量:16 2020年 目的:探究佛手柑内酯通过磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路诱导人肝癌细胞Hep G2和Hep3B凋亡的机制。方法:设立佛手柑内酯(5,50,200μmol·L-1)组和空白组;采用噻唑蓝(MTT)比色法检测佛手柑内酯作用Hep G2和Hep3B细胞24,48 h细胞增殖;磷脂结合蛋白V/碘化丙啶(Annexin V-FITC/PI)双染检测细胞凋亡;实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(Real-time PCR)及蛋白免疫印迹法(Western bolt)检测相关m RNA和蛋白的表达含量;进行平板细胞克隆形成实验评价各组Hep G2和Hep3B细胞的克隆形成率与效果。结果:MTT实验表明,佛手柑内酯能明显抑制Hep G2和Hep3B细胞的增殖活性,且呈浓度依赖性;流式细胞仪分析结果表明,佛手柑内酯200μmol·L-1组作用于Hep G2和Hep3B细胞48 h,有明显促凋亡作用(P <0. 05);Western blot结果显示,佛手柑内酯可以上调半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-3,Caspase-8蛋白表达量(P <0. 05),并且下调B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2),PI3K蛋白表达(P <0. 05);Real-time PCR显示PI3K,Akt m RNA相对表达量降低(P <0. 05);平板细胞克隆形成实验的结果显示,随着佛手柑内酯浓度的增加,各组细胞克隆形成率呈递减趋势,且佛手柑内酯200μmol·L-1组作用降低明显(P <0. 05)。结论:佛手柑内酯对人肝癌细胞Hep G2和Hep3B的增殖存在抑制作用,其可能是通过PI3K/Akt信号通路诱导Hep G2和Hep3B细胞的凋亡。 赵丽萍 王超 田男 范春雷关键词:佛手柑内酯 信号通路 Micro RNA在酒精性肝病中的表达及作用机制的研究 张福利 潘然 杜仲燕 于晨辉 田男 窦晓兵长链非编码RNA的研究进展 被引量:1 2016年 长链非编码RNA(long non-coding RNA,lnc RNA)是位于真核细胞内,长度超过200nt的不具阅读框的非编码RNA。在哺乳动物基因组中被普遍转录,其表达具有时空特异性。lnc RNA参与X染色体沉默、基因组印记、染色质修饰、转录激活、转录干扰、核内运输等多种重要的调控过程,并与疾病的发生、发展、诊断和治疗有密切的关系。lnc RNA覆盖面之广、潜力之大,使得其成为当今生物学中最热门最前沿的研究领域之一。本文将从lnc RNA的研究历程、来源与分类、作用机制和功能研究、在疾病中的作用这几个方面进行总结和论述。 吴王亲 张婷 田男关键词:长链非编码RNA 疾病 凋亡抵抗与人肝癌细胞对紫杉醇耐药关系的研究 被引量:4 2015年 [目的]体外建立紫杉醇(Taxol)耐药的人肝癌细胞株Hep3B/TAX,并以此为模型对凋亡抵抗现象与紫杉醇耐药的相关性进行研究。[方法]采用浓度梯度间歇刺激法建立Hep3B/TAX耐药细胞株,MTT法检测Hep3B/TAX对紫杉醇的耐药性,流式细胞术检测Hep3B/TAX的细胞凋亡水平,荧光定量PCR检测Hep3B和Hep3B/TAX细胞株中Bcl-2、Bax、caspase3、caspase8和caspase9基因的表达水平,蛋白质免疫印迹(Western-blot)检测Hep3B、Hep3B/TAX细胞株中Bcl-2、Bax、caspase3、caspase8和caspase9的蛋白表达。[结果]Hep3B细胞对紫杉醇的IC50为0.2mΜ,而耐药细胞株Hep3B/TAX对紫杉醇的IC50升为4.33μM。耐药指数(RI)为21.65。流式细胞术结果显示,0.1μM、0.2μM紫杉醇处理24h后,亲本细胞Hep3B的凋亡率显著高于耐药细胞株Hep3B/TAX。RT-PCR结果显示,与Hep3B细胞株相比,Hep3B/TAX细胞株中Bcl-2 m RNA的表达量显著升高(P<0.01),而caspase3、caspase8、caspase9和Bax m RNA的表达量显著降低(P<0.01)。Western-blot实验结果显示,与Hep3B细胞株相比,Hep3B/TAX耐药细胞株的抗凋亡蛋白Bcl-2的表达量显著升高,相关促凋亡蛋白caspase3、caspase8、caspase9和Bax的表达量降低。[结论]成功建立紫杉醇耐药的人肝癌细胞株Hep3B/TAX,人肝癌细胞株Hep3B对紫杉醇耐药的产生与改变凋亡相关因子的表达而导致的凋亡抵抗现象有关。 周明杰 韩子午 范春雷 钱颖 田男关键词:凋亡抵抗 原发性肝癌 紫杉醇耐药 线粒体 临床医学专业国际班《细胞生物学》教学模式改革初探 2017年 本文探讨医学院校临床医学专业本科留学生细胞生物学教育中遇到的问题,并提出相应的对策和解决方案。在留学生的教育中,根据留学生的特点,科学地制定教学计划,采用有效的教学方法以逐步提高留学生教育的质量。 田男 范春雷关键词:留学生 细胞生物学 教学模式 HMGA1对肝细胞癌的增殖、迁移和细胞周期的作用影响 被引量:3 2022年 目的:探究HMGA1对肝癌细胞增殖、迁移及细胞周期的影响。方法:通过生物信息学、qRT-PCR、蛋白质印迹法分析HMGA1在正常肝组织与肝癌组织、正常肝细胞与肝癌细胞中的表达及其表达量与患者生存期的关系;通过GO和KEGG通路分析HMGA1及其相关基因在肝癌细胞生理活动中可能发挥的作用;MTT、克隆形成、Transwell实验及流式细胞术用于分析下调HMGA1对肝细胞癌的增殖、迁移、凋亡和细胞周期的影响。结果:与正常肝组织比较,肝癌组织HMGA1表达上调,且表达水平与患者生存期呈负相关;筛选得出451个正相关基因和398个负相关基因在TCGA-LIHC和GSE15765两个数据集中都具有统计学意义,KEGG和GO分析结果表明HMGA1及其相关基因参与组成细胞组分,并主要影响肿瘤细胞的分裂增殖、转录调控、氧化还原过程和代谢过程等;下调HMGA1抑制肝癌细胞的细胞活力、迁移,诱导细胞凋亡并阻滞细胞周期;敲低HMGA1使肿瘤体积缩小、重量减轻。结论:HMGA1可能作为原癌基因促进肝癌细胞的生长。 应函妤 邢家恒 孙江川 钱颖 胡林峰 田男关键词:肝癌 细胞周期阻滞 增殖 基于HOXA9 DNA甲基化的两位点联合预测模型可用于脑膜瘤进展风险的早期筛查 2024年 目的探讨同源异形盒基因(HOXs)在脑膜瘤中的甲基化模式,筛选对脑膜瘤复发风险分层有临床指导意义的HOXs基因,建立预测模型并评估其预测效能。方法利用GEO数据库下载脑膜瘤相关数据集。通过甲基化差异分析和ROC曲线分析筛选有预后评估价值的HOXs基因,再通过Cox回归分析、分子特征分析对特征基因的临床应用价值进行验证。进一步筛选差异CpG位点并评估其预测效能,通过Lasso-cox回归分析建立预测模型,根据cut off值将患者分成高、低风险组并进行分析。最后通过甲基化特异性PCR(MS-PCR)在细胞和组织水平验证差异CpG位点的甲基化水平,并纳入脑膜瘤组织样本验证该模型的预测效能。结果HOXA9甲基化水平在脑膜瘤中显著上调(P<0.001),且具有较高诊断效能(AUC=0.884)。验证分析表明HOXA9甲基化是影响脑膜瘤患者总生存期的独立危险因素(P<0.01),与脑膜瘤恶性程度和不良预后正相关(P<0.05),且基于HOXA9甲基化水平的分组方法在预测患者复发和生存时间时比WHO分级精度更高。筛选出的CpG位点cg03217995和cg21001184对脑膜瘤诊断的AUC均大于0.8,预测脑膜瘤患者复发的AUC均大于0.6。构建的两位点联合预测模型cut off值为1.226,以此分组的患者临床特征均有显著性差异(P<0.001),并且该模型预测评分是脑膜瘤的独立预后因素(P<0.05)。MS-PCR结果显示,位点cg03217995和cg21001184甲基化水平在脑膜瘤细胞中升高(P<0.0001),在不同WHO分级患者间无统计学差异。临床样本分析表明联合模型有较高预测效能(AUC=0.857),预测状态与患者真实临床进展结果高度一致。结论HOXA9甲基化是脑膜瘤预后不良的有效预测指标,基于其CpG位点的联合预测模型有望成为恶性进展风险病例早筛的新方法。 谭茹雪 包晓樟 韩亮 李朝晖 田男关键词:脑膜瘤 HOXA9 DNA甲基化 预后 德育功能在医学细胞生物学课程的探索与实践 发掘专业课程的思想政治教育资源,发挥专业课程的育人功能,落实专业教师的育人职责是课程思政的基本理念。细胞生物学课程以"课程思政"为抓手,牢牢抓住提高人才培养能力这个核心,通过"课程思政"引领"三模块",即把工匠精神、价值... 胡林峰 窦晓兵 田男 钱颖关键词:德育 医学细胞生物学 以科研为导向的细胞生物学教改探索 被引量:5 2014年 19世纪以来,科学与技术的结合越来越紧密,几乎所有重大技术变革都基于新的科学原理和方法,科学技术对人类经济社会发展有重大的引领作用。我国近10年来创新能力明显增强,正在从量的扩张转向质的提升,科技的发展离不开人才的培养,因此,培养具有创新素质的人才是当前教育的核心任务。 杜仲燕 窦晓兵 胡林峰 钱颖 田男 范春雷关键词:细胞生物学 教改 经济社会发展 miRNA与常见肝病发生发展关系的研究进展 被引量:5 2014年 [目的]综述近10年来miRNA与常见肝病发生发展关系的研究进展。[方法]通过文献检索,查阅2003年以来发表的有关miRNA与相关肝病临床研究的文献,总结综述miRNA在肝脏疾病中的调控机制。[结果]miRNA作为转录后水平调节基因,参与机体的各种重要的生理和病理过程。近年发现,miRNA参与调控多种肝病相关基因,其表达量在原发性肝细胞癌、病毒性肝炎、肝纤维化、肝硬化、酒精性与非酒精性脂肪肝病等常见肝病的发生发展过程中的有着不同程度的改变。其中部分miRNA的作用机制已经相当明确,暗示一些miRNA可作为相关肝病的治疗靶点应用于临床。[结论]miRNA在肝脏疾病中的调控机制对于肝病的预防和治疗有着重要意义。这些miRNA的发现,为常见肝病的检测,预防,治疗提供了新的思路。但其表达调控网络、生物学功能及其与疾病的关系等仍有许多问题亟待阐明,尚有待做更深入的研究。 罗阳 韩子午 田男关键词:MIRNA 原发性肝细胞癌 病毒性肝炎