公共文化服务平台

深低温保存温度及时间对椎间盘生物活性的影响被引量：2: 2011年; 目的:探讨深低温保存温度及保存时间对椎间盘生物活性的影响。方法:取1岁龄Beagle犬新鲜椎间盘72个,分为对照组(A组,n=8)、-80℃保存组(B组,n=32)和-196℃保存组(C组,n=32)。B和C组在冷冻保存液中分别保存于-80℃低温冰箱及-196℃液氮中,在保存2w、2m、6m及12m时每组每个时间点取8个椎间盘,通过溴化吡啶/二乙酸荧光素(EB/FDA)荧光染色法检测椎间盘组织中不同部位的细胞存活率,以二甲基亚甲蓝(DMMB)染色法检测髓核组织蛋白多糖(PG)含量,以羟脯氨酸检测法测定纤维环组织中的总胶原含量;对照组取标本后直接进行以上检测。结果:B和C组椎间盘在保存至2w时各部位细胞存活率较A组明显下降,2m^12m保存期间,B、C两组椎间盘各部位的细胞存活率均维持在相对恒定的水平,但均较2w时下降;B组及C组外层纤维环细胞存活率在保存2w和2m时无明显差别(P>0.05),在保存6m及12m时C组明显高于B组(P<0.05);C组内层纤维环及髓核组织细胞存活率在各检测时间点均明显高B组(P<0.05)。B、C两组在各检测时间点PG含量均较A组明显降低,在保存2m^12m期间,C组PG含量均高于B组(P<0.05)。B、C两组总胶原蛋白含量在保存期间随时间逐渐降低,但两组间未见明显差异(P>0.05)。结论:利用-196℃保存椎间盘组织,无论在细胞总的存活率及PG含量上均优于-80℃保存;-196℃保存12个月时椎间盘细胞存活率及PG含量均维持在相对稳定的水平,能满足同种异体椎间盘移植的要求。; 王超锋阮狄克张超辛洪奎徐成; 关键词：椎间盘深低温保存细胞活性细胞存活率

同种异体椎间盘复合表达外源性hBMP7因子的髓核细胞构建组织工程椎间盘的实验研究: 目的探讨利用液氮储存同种异体椎间盘及表达外源性人BMP7的髓核细胞体外构建组织工程椎间盘的方法。方法：取储存于液氮中2个月的犬椎间盘24个，分为EGFP对照组、1×104、1 ×105和1&#215...; 王超锋阮狄克

组织工程复合物腰椎间盘原位植入生物力学稳定性初步研究: 2011年; 目的观察组织工程复合物于犬腰椎间盘原位植入后的生物力学稳定性变化.方法以犬髓核（NP）细胞-聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物（PLGA）支架构建组织工程复合物.将24只12个月龄Beagle犬随机分为4组,A组为非手术对照组,B组行腰椎4～5（L4-5）NP摘除,C组行L4-5 NP摘除＋空白支架植入,D组行L4-5NP摘除＋NP细胞-PLGA支架复合物植入.于手术后第4、8、12周处死实验动物取L1～7节段脊柱,使用MTS-858 Mini Ⅱ型生物力学实验机测量标本L4～5节段在纯力偶距下屈伸及旋转动度,行各组间L4～5节段生物力学稳定性比较.结果 B、C、D组L4～5节段生物力学稳定性较A组均有不同程度降低;B组与C组牛物力学特性差异无明显统计学意义（P＞0.05）;而D组与前两组相比稳定性有明显提高（P＜0.05）.结论 NP细胞-PLGA支架复合物腰椎间盘原位植入能够恢复失稳节段的生物力学稳定性.; 徐成阮狄克辛洪奎李超王超锋张超; 关键词：髓核

去细胞髓核支架材料制备方法的比较学研究被引量：1: 2013年; 目的探索去细胞化天然髓核支架,以构建组织工程椎间盘修复脊柱退行性疾病。方法 1个月龄及1岁龄Beagle犬各4只,平均体质量分别为0.6kg、7.5kg。取结构完整椎间盘髓核组织各40块。随机分为4组,每组10块。分别采用化学萃取及酶消化2种方法分别处理Beagle犬椎间盘髓核组织,进行形态学和组织学比较研究,分析并比较不同方法及不同年龄髓核供体的去细胞效果及对基质结构的完整性。以噻唑蓝法进行间接接触细胞毒性实验检测去细胞髓核的细胞生物相容性。结果 1岁龄髓核去细胞处理后残余细胞分别为(4.32±4.15)个/高倍视野(化学萃取组)、(4.98±4.52)个/高倍视野(酶消化组),显著高于1个月龄髓核组,且结构完整性显著改善。化学萃取与酶消化2种方法制备的去细胞髓核浸提液在1周内的细胞毒性分级均为0级与1级。1个月龄髓核去细胞效果良好,但无论化学萃取或是酶消化法均对基质成分有严重破坏作用,不宜作为去细胞髓核支架的供体。结论酶消化法能够在去除犬1岁龄髓核细胞成分的同时更好地保留细胞外基质框架结构,无明显的细胞毒性,不影响细胞的正常功能;是制备去细胞髓核天然支架的良好方法。; 张超阮狄克王超锋石志远辛洪奎; 关键词：椎间盘退行性疾病去细胞

骨髓基质干细胞治疗椎间盘退变性疾病的研究进展被引量：1: 2009年; 椎间盘（intervertebral disc，IVD）退变能导致脊柱的生物力学功能紊乱，从而影响脊柱的正常功能。对于椎间盘退变机制的研究及认识是找到能有效治疗或者阻止椎间盘退变的前提，目前认为柞间盘退变是一种与椎间盘内炎症介质和金属蛋白酶的增多引起的髓核细胞、蛋白聚糖和水含量的减少有关的疾病，其最终形态表现存椎间盘形态和功能的改变。基于这些认识，能阻断椎间盘退变或者恢复椎间盘形态和功能的生物治疗，将会在椎间蕊退变性疾病的治疗中发挥重要作用。; 王超锋阮狄克; 关键词：椎间盘退变性疾病干细胞治疗骨髓基质金属蛋白酶 DISC

hBMP7基因修饰的髓核细胞与同种异体椎间盘复合后体内原位移植的实验研究: 2018年; 目的探讨用人骨形态发生蛋白7(human bone morphogenetic protein 7,hBMP7)基因修饰的犬髓核细胞与同种异体椎间盘复合后体内原位移植的方法阻止或延缓同种异体椎间盘移植后退变的能力。方法将18个比格犬椎间盘(L_(4-5))置于-196℃冻存液中保存2个月,随机分为A、B、C三组,A组以r AAV2-hBMP7转染犬髓核细胞,将能够表达hBMP7蛋白的髓核细胞悬液(5×10~6个/ml,20μl)注射入复温后的椎间盘中体外培养,B组以相同数量未转染的hBMP7的髓核细胞注入椎间盘后体外培养,C组以20μl DMEM/F12细胞培养液生理盐水注射后体外培养。将培养7d的3组椎间盘分别移植至15只比格犬的L4-5,在术前、术后即刻及术后1、3、6个月通过X线检测移植椎间盘的愈合情况及其高度变化;通过MRIT2像分析椎间盘的退变情况;术后6个月时处死动物取材,分析腰椎屈伸、侧弯及扭转的生物力学变化;组织学染色检测椎间盘的结构及退变情况;PCR法检测3组髓核组织中hBMP7 mRNA的表达。结果X线检测显示3组移植椎间盘高度变化指数(DHVI)差异无统计学意义(P>0.05);MRI检测结果显示:在术后12、24周时,B、C两组移植椎间盘的MRIT2像信号灰度比明显低于A组(P<0.05);生物力学检测结果显示:C组的左右扭转度明显大于A、B组(P<0.05),而A、B两组间的差异无统计学意义(P>0.05),而对屈伸及侧弯活动度检测发现3组间差异无统计学意义;PCR检测结果显示:6个月时A组仍可检测到hBMP mRNA的高表达;组织学检测结果显示:移植后6个月时仍有外源性髓核细胞存活,A组相对于B、C两组髓核结构更加完整,所含细胞外基质更多。结论表达hBMP7的髓核细胞能阻止同种异体椎间盘移植后的退变性。; 王超锋张超徐成何勍阮狄克; 关键词：髓核细胞体外构建椎间盘移植

γ射线照射对椎间盘生物学活性的影响: 2012年; 目的探讨γ射线照射处理异体椎间盘的可行性,同时进一步评估去细胞化椎间盘作为自然支架辅助生物学治疗椎间盘退变的性能。方法手术获取6例成熟比格犬的椎间盘,逐级冷冻保存,随机分为对照组及18 kGy、25 kGy、50 kGyγ射线照射组(n=8),处理各组椎间盘后进行细胞活性及生物力学检测并进行对比分析。结果椎间盘细胞活性与照射剂量成负相关,对照组纤维环及髓核细胞活性分别为92.6%、90.7%,18 kGy照射组为76.5%、70.6%,25 kGy照射组为52.7%、46.9%,50 kGy照射组为18.3%、10.1%,各组间差异有统计学意义(P<0.01)。不同组间椎间盘生物力学性能差异均无统计学意义(P>0.05),其中压缩、拉伸轴向力及左/右旋转扭力矩均维持在正常水平。结论优化γ射线照射可以作为异体椎间盘消毒灭菌的手段,但其确切效果有待体内实验进一步验证。去细胞化椎间盘具有较为理想的生物学及机械性能,有望作为自然支架用于椎间盘疾病的相关研究。; 丁宇阮狄克何勍王超锋; 关键词：椎间盘骨移植 Γ射线细胞存活

同种异体颈椎间盘移植的康复护理及一年疗效评价被引量：1: 2011年; 目的探讨同种异体颈椎间盘移植的康复护理,分析其对患者临床症状和体征的缓解情况以及颈椎活动度的影响。方法对15例颈椎盘伤病患者实施了颈椎前路同种异体颈椎间盘移植术,对患者进行相关围术期护理及出院康复护理指导;于手术前、术后1周、术后1年行日本矫形外科学学会(Japomese orthopedic Association,JOA)评分及颈椎活动度测量。结果所有病例神经、脊髓受损临床症状及体征均得到了明显的恢复或缓解。术后1年JOA评分为(14.7±2.1),比术前的(10.6±1.7)有了明显提高(P<0.05)。颈椎活动度术前(41.5±11.7)。术后1周(30.3±5.6)。1年后(37.6±20.5)。可见术后1周及1年后颈椎活动度均有减低(P<0.05),但1年后颈椎活动度与术后1周相比有明显提高(P<0.05)。结论同种异体颈椎间盘置换术的康复护理能对患者临床症状的缓解及颈椎活动度的维持发挥明显的促进作用,为同类手术的护理指导提供了一定的参考作用。; 吴淑华丁宇王超锋刘蕊李天; 关键词：康复护理

重组腺相关病毒介导人端粒酶逆转录酶基因转染对人髓核细胞功能的影响被引量：2: 2012年; 目的:研究重组腺相关病毒介导人端粒酶逆转录酶基因(recombinant adenoassociated virus vector-me-diated human telomerase reverse transcriptase,rAAV-hTERT)转染对体外培养人髓核细胞功能的影响。方法:利用机械与酶消化的方法获得均一性的人椎间盘髓核细胞,将构建好的rAAV-hTERT转染P2代体外单层培养的髓核细胞。用重组腺相关病毒-增强型绿色荧光蛋白(recombinant adenoassociated virus vector-mediatedenhanced green fluorescent protein,rAAV-EGFP)作为标记基因观察细胞转染效率,按感染复数(multiplicity ofinfection,MOI)103、104、105病毒基因组拷贝数/细胞(vector genomes/cell,v.g/cell)设组,流式细胞仪检测,筛选病毒转染的最佳MOI;设立rAAV-hTERT转染组、AAV空病毒转染组及空白细胞对照组,用反转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reareaction,RT-PCR)及免疫印迹(Western-blot)方法检测rAAV-hTERT转染后hTERT基因在髓核细胞内的表达,实时定量聚合酶链反应(real-time quantitative PCR)及酶联免疫法(enzyme linked immunosorbent,ELISA)检测髓核细胞合成Ⅱ型胶原及蛋白多糖能力的变化。结果:rAAV-EGFP转染细胞后第7天时,MOI为105v.g/cell组转染效率可达73.9%,明显高于MOI 103、104v.g/cell组(P<0.05);rAAV-hTERT转染组在转染后的第7、60、90、120天均可检测到hTERT基因的表达,而其他两组则无表达;转染rAAV-hTERT后120d之前,rAAV-hTERT转染组分泌蛋白多糖及Ⅱ型胶原较其他两组均明显增高(P<0.05),而两对照组之间则始终无明显差异(P>0.05)。结论:rAAV-hTERT能成功转染人椎间盘髓核细胞并正确表达,rAAV-hTERT转染能有效延长髓核细胞分泌Ⅱ型胶原及蛋白多糖功能。; 吴剑宏阮狄克王德利张超何勍王超锋张燕辛洪奎顾韬徐成刘玥; 关键词：髓核细胞腺相关病毒

选择性神经根封闭术对老年复杂多节段腰椎退行性疾病手术策略制定的指导作用: 目的探讨利用神经根封闭术在复杂多节段腰椎退行性疾病中定位责任节段的可行性。方法对我院确诊为多节段腰椎退行性疾病的患者,且符合相关纳入排除标准,随机分为选择性节段减压组(A组)及广泛节段减压组(B组),选择性节段减压组...; 王超锋张超何勍阮狄克; 关键词：腰椎退行性疾病多节段

渝B2-20050021-1　渝公网安备 50019002500403号　违法和不良信息举报中心　互联网出版许可证　新出网证(渝)字10号

王超锋

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户反馈

王超锋

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户登录

用户反馈