王西明
- 作品数：59 被引量：166H指数：7
- 供职机构：华中科技大学同济医学院基础医学院生物化学与分子生物学系更多>>
- 发文基金：湖北省卫生厅科研基金湖北省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- DDPH逆转增生后PASMC的时间相关性研究被引量：1
- 2008年
- 目的研究DDPH对低氧内皮细胞条件培养液(HECCM)促肺动脉平滑肌细胞(PASMC)增生后的逆转效应及时间相关性,探讨DDPH使增生后PASMC恢复为正常收缩表型的时间。方法利用HECCM建立猪PASMC增生模型;采用细胞培养、改良的四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)、免疫细胞化学染色测定α平滑肌肌动蛋白(α-SM-actin)等方法观察HECCM的促PASMC增生作用,及DDPH对PASMC增生后的逆转效应,并观察逆转效应与DDPH作用的时间相关性。结果(1)HECCM促PASMC增生后,PASMC由收缩表型转化为合成表型,胞质内的α-SM-actin含量下降,具有一定时间相关性。(2)在HECCM促PASMC增生后,加入DDPH可使PASMC由合成表型逆转为收缩表型,α-SM-actin含量回升,具有一定时间相关性。结论DDPH对HECCM促PASMC增生有逆转效应并呈一定时间相关性,DDPH作用一定时间后PASMC表型可基本逆转恢复至正常。
- 杜兵陈蓓蓓王西明段秋红何善述
- 关键词：DDPH肺动脉平滑肌细胞表型逆转低氧
- 移行上皮反应基因TERE1的结构与功能分析被引量：1
- 2011年
- 目的用生物信息软件分析移行上皮反应基因TERE1蛋白的跨膜结构,并预测分析其重要蛋白结构域功能。检测TERE1在细胞中表达定位。方法采用不同生物信息学软件预测分析TERE1的蛋白跨膜结构及重要结构域功能。采用分子克隆方法构建绿色荧光蛋白-移行上皮反应基因(pEGFP-TERE1)重组质粒,转染人膀胱癌细胞系T24,激光共聚焦显微镜观察TERE1在细胞中表达定位。结果 TERE1蛋白为多次跨膜的蛋白,保守的区域形成3个环loop 1、loop 2和loop 3;N端和loop 1含有高度保守的位点;以loop 2和loop 3之间的区域采用PROSITE软件分析显示UbiA类异戊烯转移酶家族具有一致性序列。采用菌液PCR、双酶切鉴定和DNA测序验证pEGFP-TERE1重组质粒构建成功。TERE1主要在T24细胞浆中表达。结论 TERE1为多次跨膜的蛋白,保守的区域形成3个环,UbiA类异戊烯转移酶家族具有一致性序列。TERE1主要在T24细胞浆中表达。
- 夏炎枝赵为魏雄吴时敏王西明红凌
- 关键词：膀胱癌生物信息
- 褪黑素对小鼠肝癌细胞凋亡及自然杀伤细胞活性的影响被引量：5
- 2003年
- 目的 探讨褪黑素 (MLT)在体内对H2 2肝癌细胞凋亡及免疫调节作用的影响及其机制。方法 应用免疫组织化学染色方法及原位末端脱氧核苷酸转移酶标记法 (TUNEL)对Bcl 2、Bax的表达及凋亡细胞进行检测 ,MTT比色法检测脾细胞NK杀伤活性。结果 实验发现MLT治疗组、预防组及 5 Fu组Bcl 2和Bax的表达及凋亡细胞数明显高于生理盐水组 (P <0 0 1)。Bax/Bcl 2比例在MLT预防组最大。NK杀伤活性在MLT治疗组、预防组较其它组明显增高 (P <0 0 5 )。结论 MLT在体内有促进肿瘤细胞凋亡的作用 ,且可使NK杀伤活性增高 ,推测Bcl 2。
- 宫丽华任大宏熊密鲁志强王西明
- 关键词：肝癌细胞凋亡自然杀伤细胞褪黑素免疫调节
- 褪黑素在培养的小脑颗粒细胞模拟缺血再灌注中的抗氧化作用研究被引量：8
- 2004年
- 目的 探讨褪黑素 (Melatonin ,MT)在模拟缺血再灌注中对神经元的保护机制 ,从而为褪黑素的临床应用提供可靠的理论依据。方法 分离SD乳鼠的小脑颗粒细胞进行原代培养 ,待细胞发育成熟后建立体外模拟缺血再灌注模型。采用相差显微镜进行细胞的形态学观察 ;通过TBA荧光法和联苯三酚自氧化法来检测模拟缺血再灌注过程中细胞内丙二醛 (MDA)生成量、超氧化物歧化酶 (SOD)的活性变化以及褪黑素在模拟缺血再灌注过程中对二者的影响。结果 模拟缺血 (OGD)后再灌注 12h的细胞 ,胞内MDA的生成比在OGD后再灌注 6h明显增多 (P <0 .0 5 ) ,OGD后再灌注 12hMDA生成最多随后降低 ;经OGD处理后细胞内SOD的活性较正常组明显降低 (P <0 .0 5 ) ,OGD后再灌注 2 4h降到最低随后升高。MT能显著降低细胞内MDA的生成 (P <0 .0 5 ) ,并存在着一定的剂量依赖关系。SOD的活性在加入MT后也明显提高(P <0 .0 5 )。结论 MT可能通过其抗氧化作用在模拟缺血 (OGD)再灌注中起到神经保护作用。
- 鲁志强王西明段秋红卢涛何善述
- 关键词：褪黑素小脑颗粒细胞缺血再灌注丙二醛超氧化物歧化酶
- PKC在软脂酸诱导的肝细胞胰岛素抵抗信号转导中的作用被引量：5
- 2008年
- 目的探讨蛋白激酶PKC在软脂酸(PA)诱导的肝细胞胰岛素抵抗中的作用。方法将DMEM培养基中含0.25mmol/L的软脂酸(PA组)与HepG2细胞共同培养24h,并设立正常对照组(Control组)。加入PKC抑制剂chelerythrine chloride(CC),胰岛素刺激后分光光度酶偶联速率法测定胞内糖异生限速酶磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)活性,Western blot测定胞内胰岛素受体底物2(IRS-2)蛋白水平。结果PA组与Control组相比,基础及胰岛素刺激的PEPCK活性升高(P<0.05);加入CC与否,Control组IRS-2蛋白水平存在明显差异(P<0.05),PA组中却无明显变化(P>0.05),而PEPCK活性在Control组、PA组均无明显改变(P>0.05)。结论细胞胰岛素抵抗时,糖异生的关键酶活性以及胰岛素信号通路的信号蛋白异常改变,胰岛素信号转导PKC通路可能存在传导障碍。
- 万学东陈宝生夏炎枝王西明
- 关键词：胰岛素抵抗
- 褪黑素抑制大鼠肝脏星状细胞增殖机制被引量：2
- 2004年
- 目的 观察褪黑素抑制大鼠肝脏星状细胞增殖的机制。方法 MTT法测定活细胞数量,流式细胞仪检测凋亡率和细胞周期, western blotting 检测NF-κB表达水平,放射免疫法检测细胞内cAMP浓度,免疫荧光法测定细胞内钙离子浓度。结果 Mel作用后HSCs增殖能力下降,亚G1凋亡峰增高,细胞内钙离子浓度、cAMP浓度和NF-κB表达水平下降。结论 Mel可能下调细胞内钙离子浓度、cAMP浓度及NF-κB表达水平而促进HSCs凋亡和G1期阻滞,从而抑制增殖。
- 王忠强郑启昌黄文广段秋红王西明
- 关键词：褪黑素肝脏星状细胞NF-KB
- SARS冠状病毒S蛋白DNA疫苗的构建及其免疫效果研究
- 目的构建SARS冠状病毒棘突糖蛋白(S蛋白)的两个片段S1和S2的真核表达质粒pVAC-S1 和pVAC-S2,检测它们在哺乳动物细胞中的表达,并观察它们在小鼠中诱导的体液和细胞免疫应答。方法采用PCR方法体外扩增SAR...
- 秦莉吴少庭王西明袁仕善林绮萍雷明军潘晖榕黄达娜温见翔高世同张仁利屈伸
- 关键词：SARS冠状病毒DNA疫苗
- 褪黑素对H22细胞抗增殖和促凋亡的机制研究
- 本课题旨在研究褪黑素(melatonin,MLT)抗肿瘤作用的分子机制,从而为MLT在肿瘤治疗中的应用提供理论依据。
- 佘美华陈蓓蓓王西明
- 关键词：褪黑素凋亡FAS
- 文献传递
- 褪黑素对小鼠肝癌H22细胞抗增殖和促凋亡的p53依赖性机制研究被引量：2
- 2004年
- 背景与目的本室已经证明了褪黑素(melatonin,MLT)对小鼠肝癌H22细胞的生长具有抑制作用,本研究旨在探讨其机理。方法(1)建立荷瘤小鼠模型并给予褪黑素处理,取肿瘤组织进行p53、cyclinE水平的免疫组化分析;(2)不同浓度褪黑素体外培养小鼠肝癌H22细胞,采用流式细胞技术(flowcytometry,FCM)检测细胞周期分布和凋亡率;免疫组化法分析培养细胞的p53和cyclinE的蛋白水平;采用RT-PCR方法检测FasmRNA的水平。结果(1)FCM显示褪黑素可引起H22细胞G0/G1期比例升高,从75.24%上升至85.46%,同时细胞凋亡增多,从5.07%升至12.77%;(2)褪黑素作用后p53水平较对照组增高42.5%(培养细胞)和19.5%(肿瘤组织),而cyclinE的水平则降低31.7%(培养细胞)和39.9%(肿瘤组织);(3)RT-PCR结果显示FasmRNA水平增高44.2%。结论MLT通过阻滞细胞周期和诱导细胞凋亡抑制H22细胞增殖。其机理可能是通过p53抑制下游的cyclinE的表达,阻止细胞进入S期;同时又通过p53上调Fas表达,从而诱导细胞凋亡。
- 佘美华陈蓓蓓王西明何善述
- 关键词：褪黑素P53CYCLINFAS
- DDPH对HECCM促PASMCs增殖的逆转效应研究
- 本实验以低氧内皮细胞条件培养液(hypoxial endothelia cells conditional medium,HECCM)培养猪肺动脉平滑肌细胞(pulmonary arterial muscle cells...
- 杜兵陈蓓蓓段秋红王西明何善述
- 关键词：DDPH骨桥蛋白表型转化肺动脉平滑肌细胞低氧
- 文献传递
