王红艳
- 作品数:29 被引量:78H指数:4
- 供职机构:广州医科大学更多>>
- 发文基金:广东省医学科学技术研究基金广东省自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域:医药卫生文化科学更多>>
- 氧化型低密度脂蛋白诱导大鼠血管平滑肌细胞增殖及周期素D1的表达被引量:2
- 2009年
- 背景:氧化型低密度脂蛋白可通过Ras/Raf/丝裂原活化蛋白激酶激酶/丝裂原活化蛋白激酶途径诱导血管平滑肌细胞增殖及细胞周期蛋白的表达。目的:观察胞外信号调节激酶是否参与了氧化型低密度脂蛋白诱导的血管平滑肌细胞周期推进以及周期素D1的表达。设计、时间及地点:对照观察细胞学实验,于2008-02/10在广州医学院完成。材料:人血浆低密度脂蛋白来自健康志愿者血清。SD大鼠由广州医学院实验动物中心提供。方法:采用超速离心法分离人低密度脂蛋白进行氧化修饰及鉴定。以酶消化法培养大鼠血管平滑肌细胞,采用免疫组织化学染色法鉴定。主要观察指标:在静止的血管平滑肌细胞中加入MEK1/2选择性抑制剂10μmol/LPD98059和/或50mg/L氧化型低密度脂蛋白,以CCK-8和细胞计数法测定细胞增殖,流式细胞术观察细胞周期,蛋白印迹检测周期素D1蛋白表达及胞外信号调节激酶的活性。结果:CCK-8和细胞计数法显示,氧化型低密度脂蛋白能明显诱导血管平滑肌细胞增殖,PD98059抑制氧化型低密度脂蛋白诱导的血管平滑肌细胞增殖,并且呈时间依赖性。流式细胞术分析表明,经氧化型低密度脂蛋白处理24h后,血管平滑肌细胞从G0/G1期进入S期,S期细胞百分比明显增高(P<0.01),加入PD98059处理24h后,血管平滑肌细胞由G0/G1期向S期的推进受到抑制。蛋白印迹结果显示,氧化型低密度脂蛋白能明显诱导周期素D1蛋白表达及胞外信号调节激酶的磷酸化,PD98059抑制氧化型低密度脂蛋所诱导的周期素D1蛋白表达以及胞外信号调节激酶的磷酸化。结论:氧化型低密度脂蛋白能诱导血管平滑肌细胞增殖,促进细胞由G0/G1期向S期转换以及周期素D1表达,其作用部分是由胞外信号调节激酶所介导。
- 涂永生王红艳
- 关键词:氧化型低密度脂蛋白细胞周期素D1血管平滑肌细胞胞外信号调节激酶
- 辛伐他汀抑制鼻咽癌细胞增殖和亲环素A表达被引量:2
- 2009年
- 目的研究辛伐他汀对鼻咽癌细胞株CNE2细胞增殖和细胞周期的作用以及对亲环素A表达的影响。方法用CCK-8方法观察辛伐他汀对鼻咽癌细胞株CNE2细胞增殖的抑制作用,用流式细胞仪检测辛伐他汀对鼻咽癌细胞株CNE2细胞周期分布的影响,用蛋白免疫印迹检测亲环素A蛋白表达。结果CCK-8方法结果显示,辛伐他汀抑制鼻咽癌细胞株CNE2细胞增殖,作用72h时IC50为2.0μmol/L。流式细胞仪结果表明辛伐他汀将鼻咽癌细胞株CNE2细胞阻滞在细胞周期的G0/G1期,蛋白免疫印迹结果显示辛伐他汀明显抑制亲环素A蛋白表达,以上效应均呈浓度依赖性。结论辛伐他汀能浓度依赖性地抑制CNE2细胞增殖,将细胞阻滞在G0/G1期,同时伴随有亲环素A表达减少。
- 涂永生王红艳李建华彭妙茹
- 关键词:亲环素A辛伐他汀鼻咽癌
- 大鼠心肌肥厚过程中亲环素A表达时程变化
- 2008年
- 目的探讨大鼠压力负荷性心肌肥厚过程中左心室心肌组织中亲环素A表达的时程变化。方法采用腹主动脉缩窄法建立压力负荷性大鼠心肌肥厚模型。术后4周和8周,检测左心室重量和体质量比值观察心肌肥大程度。然后用蛋白免疫印迹检测左心组织中亲环素A表达变化。结果在术后4周和8周,腹主动脉缩窄组左心/体质量比值比假手术对照组分别增加38.10%和37.70%。蛋白免疫印迹结果显示,两组亲环素A的表达均随鼠龄的增长而增加,但在术后4周和8周,腹主动脉缩窄组左心室心肌组织中亲环素A表达明显高于假手术对照组,亲环素A表达分别增加26.06%和31.95%。结论大鼠心肌肥厚的同时伴随亲环素A表达增多,提示心肌肥厚发病机制可能涉及亲环素A。
- 涂永生何国炜林泳婷戴小敏李丽娟王红艳
- 关键词:心肌亲环素A
- MicroRNA-29b在非小细胞肺癌转移中的作用及机制研究
- 研究背景与目的: 肺癌是目前人类发病率及死亡率最高的恶性肿瘤。肺癌的主要病理类型包括非小细胞肺癌和小细胞肺癌两大类,其中非小细胞肺癌占肺癌总数的80%~85%。导致非小细胞肺癌临床治疗失败和患者死亡的主要原因之一是肿瘤...
- 王红艳
- 关键词:非小细胞肺癌肿瘤转移临床诊治
- 基因芯片筛选CD133^+/CD133^-肺腺癌细胞中新的耐药基因被引量:3
- 2014年
- 背景与目的肿瘤干细胞可能是肿瘤多药耐药的主要原因,CD133是目前较为公认的肿瘤干细胞标记物。本研究旨在应用功能分类基因芯片筛选CD133+和CD133-肺腺癌细胞中差异表达的肿瘤耐药基因,寻求新的肺癌耐药相关基因。方法免疫磁珠分选法分选A549细胞,采用功能分类基因芯片筛选CD133+和CD133-肺腺癌细胞中差异表达的肿瘤耐药基因,并使用RT-qPCR验证。顺铂半数有效抑制浓度(half inhibiting concentration,IC50)、阿霉素IC50作用A549细胞48 h后,RT-qPCR检测肿瘤耐药基因CYP2C19、CYP2D6、CYP2E1、GSK3α、PPARα和PPARβ/δ的表达变化。结果共筛查出31个差异表达的肿瘤耐药基因,与CD133-细胞相比,CD133+细胞有30个基因表达上调,1个基因表达下调。RT-qPCR结果与芯片一致。A549细胞经1.97μg/mL顺铂或0.61μg/mL阿霉素作用48 h后,CYP2C19、CYP2D6、CYP2E1、GSK3α、PPARα和PPARβ/δ等肿瘤耐药基因表达上调。结论利用功能分类基因芯片筛选出31个可能与CD133+肺腺癌细胞耐药相关的基因,其中CYP2C19、CYP2D6、CYP2E1、GSK3α、PPARα和PPARβ/δ为新发现的肺癌耐药相关基因。
- 王红艳郑少秋涂永生张雅洁
- 关键词:CD133耐药
- CXCR4启动子的条件复制型腺病毒对肺癌细胞的靶向杀伤作用
- 2015年
- 目的:构建CXCR4启动子的条件复制型腺病毒载体CRAd-CXCR4-GFP,探究CRAd-CXCR4-GFP对肺癌细胞的靶向杀伤效应。方法:PCR法扩增人CXCR4-E1A基因并克隆至穿梭质粒p DC316-GFP,将骨架质粒p BHG-lox-E1,3Cre和重组质粒p DC316-CXCR4-GFP共转染293细胞,产生重组腺病毒CRAd-CXCR4-GFP并扩增,扩增后进行PCR鉴定和腺病毒滴度测定;real-time PCR检测5种肺癌细胞株CXCR4的mRNA表达,筛选出表达最高的A549细胞;将CRAd-CXCR4-GFP和Ad-NULL分别转染A549细胞,检测两者转染后CXCR4启动子活性和腺病毒复制数;将CRAd-CXCR4-GFP和Ad-NULL分别转染A549细胞和16HBE细胞,流式细胞术检测各组细胞凋亡情况,CCK-8检测各组细胞活性。结果:成功构建重组质粒p DC316-CXCR4-GFP,与骨架质粒p BHG-lox-E1,3Cre共转染293细胞后第11天可见片状绿色荧光;PCR表明目的基因CXCR4-E1A已成功整合在重组腺病毒基因组中;测定重组腺病毒滴度为1×1013PFU/L;CRAd-CXCR4-GFP转染A549细胞后E1A的mRNA和E4表达较Ad-NULL组明显上升;与Ad-NULL组和空白对照组相比,CRAd-CXCR4-GFP组前4 d A549细胞凋亡率和活性无明显差异,第5天细胞凋亡率明显增加,细胞活性明显降低,各组间5 d内16HBE细胞的细胞凋亡率和细胞活性均无明显变化。结论:成功构建条件复制型腺病毒表达载体CRAd-CXCR4-GFP,该载体对肺癌细胞具有靶向杀伤作用。
- 李龙光李书华王红艳龙捷谢晓斌张雅洁
- Cyc1慢病毒干扰载体的构建及在鼻咽癌细胞中干扰效率检测被引量:1
- 2010年
- 目的检测Cyc1在鼻咽癌中的表达。构建稳定干扰Cyc1慢病毒载体及检测其在鼻咽癌细胞中的干扰效率。方法应用基因芯片技术检测Cyc1基因在鼻咽癌组织中的表达。Real-time PCR确证Cyc1基因在鼻咽癌组织和细胞中高表达。构建重组靶向Cyc1的shRNA慢病毒质粒pLentiU6/Cyc1-shRNA。建立稳定干扰Cyc1基因的鼻咽癌细胞系,荧光定量PCR检测干扰效率。结果基因芯片检测显示,Cyc1基因在鼻咽癌组织中高表达。qRT-PCR确证了基因芯片结果的可靠性。在8个鼻咽癌细胞株中,Cyc1基因基本上都显示了高表达,其中最高的为鼻咽癌5-8F细胞。测序验证pLentiU6/Cyc1-shRNA重组质粒构建成功。重组质粒能明显稳定地抑制Cyc1基因在鼻咽癌细胞中的表达。结论 Cyc1基因在鼻咽癌中高表达。构建的靶向Cyc1基因的慢病毒载体能明显抑制其表达。这为研究Cyc1基因在鼻咽癌中的功能及分子机制奠定了基础。
- 刘真王红艳龙捷方唯意
- 关键词:重组质粒RNA干扰鼻咽癌细胞
- 人miR-29b过表达慢病毒载体的构建及其对A549细胞迁移的影响
- 2015年
- [目的]构建能高效表达人mi R-29b的慢病毒载体,研究其对人肺腺癌A549细胞迁移的影响。[方法]PCR扩增mi R-29b前体序列,克隆入慢病毒表达载体,测序鉴定。包装好的慢病毒感染A549细胞,流式细胞仪分选后用荧光定量PCR检测mi R-29b表达水平,划痕实验观察过表达mi R-29b对A549细胞迁移的影响。[结果]测序结果证明成功构建人mi R-29b过表达慢病毒载体。mi R-29b过表达慢病毒感染效率为88.56%,使A549细胞中mi R-29b表达升高2.78倍。与A549细胞相比,稳定过表达mi R-29b的A549-mi R-29b细胞的迁移能力显著性降低。[结论]成功构建mi R-29b过表达慢病毒载体,过表达mi R-29b可抑制A549细胞的迁移,为进一步研究mi RNA对肿瘤转移的调控作用奠定了基础。
- 王红艳涂永生方茅张雅洁
- 关键词:MI慢病毒载体细胞迁移
- 腹腔镜结、直肠癌手术的护理被引量:3
- 2006年
- 目的探讨腹腔镜结、直肠癌手术护理。方法对83例腹腔镜结、直肠癌病人进行术前、术后心理护理、健康教育、病情观察。结果83例病人积极配合治疗护理,术后病情稳定,生活质量得到了提高。结论加强腹腔镜结、直肠癌病人的心理护理、肠道准备、病情观察、饮食护理、人工肛护理是非常重要的护理环节,同时可降低并发症的发生。
- 王红艳
- 关键词:腹腔镜直肠癌手术护理
- CDA-Ⅱ对人胶质瘤细胞增殖抑制和诱导分化的实验研究
- 目的:探讨人尿萃取物CDA-Ⅱ(cell differentiation agent-Ⅱ,细胞分化剂)对人胶质瘤细胞SWO-38增殖和分化的影响及其可能的作用机制,为CDA-Ⅱ作为新的诱导分化剂用于胶质瘤的治疗提供科学的...
- 王红艳
- 关键词:胶质瘤增殖诱导分化
- 文献传递