王振达
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
- 供职机构：四川大学华西基础医学与法医学院免疫学教研室更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- PDGFR单克隆抗体的制备和鉴定被引量：1
- 2007年
- 目的通过谷胱甘肽转硫酶偶联的血小板衍生因子受体氮端的融合蛋白(GST-PDGFR-N)制备有生物活性的单克隆抗体。方法用GST-PDGFR-N融合蛋白作为免疫原,通过杂交瘤技术制备抗PDGFR的单克隆抗体,用间接ELISA、Western blot、免疫组化等方法对抗体的抗原结合特性进行鉴定。结果获得两株能稳定分泌抗PDGFR单克隆抗体的细胞3B12F5和3C6H7C11,亚类鉴定两种单抗均为IgG1。间接ELISA法测定两株细胞腹水抗体的效价分别为1∶102400为和1∶25600。Western blot法显示PDGFR单克隆抗体特异性地识别免疫原和胶质瘤细胞株U251中的抗原成分。细胞免疫组化显示此单抗可以特异的识别胶质瘤细胞株U251和膀胱癌细胞株BIU87中表达的PDGFR抗原。结论成功制备PDGFR单克隆抗体,为研究PDGFR的表达情况和临床检测提供了一个有用的工具。
- 王振达方丽魏大鹏章崇杰
- 关键词：单克隆抗体
- 抗AFP重链可变区单域抗体融合蛋白的构建、表达及初步鉴定
- 2007年
- 目的构建抗甲胎蛋白(AFP)重链可变区(VH)单域抗体融合蛋白基因在大肠杆菌中的表达,并初步鉴定表达产物的活性。方法从已构建的抗AFP单链抗体(ScFv)的载体中,经PCR扩增出VH单域抗体基因,再克隆到融合蛋白表达载体pET32a(+)中进行表达;用SDS-PAGE及Western-blot鉴定表达产物;并通过竞争抑制ELISA分析TrxA-VH融合蛋白的结合活性;细胞免疫组化染色分析其内化及结合情况。结果VH单域抗体基因全长339 bp,将其克隆到pET32a(+)中,转化大肠杆菌可获得高效表达,Western-blot证实在相应分子质量处,有TrxA-VH融合蛋白的显色条带。经初步纯化和复性后,获得抗AFP的VH单域抗体融合蛋白。竞争抑制ELISA及细胞免疫组化证明,表达产物具有与AFP特异结合的活性。结论成功构建了抗AFP的V单域抗体融合蛋白,为临床的应用研究奠定了基础。
- 方丽王振达张平赵宗蓉章崇杰
- 关键词：甲胎蛋白单域抗体克隆
- PDGFR单克隆抗体的制备和鉴定
- [目的]：通过GST-PDGFR α-N融合蛋白免疫雌性BALB/C小鼠，采用杂交瘤技术，建立能够稳定分泌高亲和力的抗GST-PDGFR α-N的杂交瘤细胞株。将复苏培养的杂交瘤细胞打入预先用石蜡处理过的经产鼠腹腔收集腹...
- 王振达
- 关键词：单克隆抗体ELISA检测免疫组化肿瘤组织
- 文献传递
