王小利
- 作品数：8 被引量：80H指数：4
- 供职机构：首都医科大学附属北京世纪坛医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 靶向敲低核蛋白1抑制HepG2肝癌细胞的增殖及迁移被引量：5
- 2015年
- 目的观察应激相关核蛋白1(Nupr1)在不同肝癌细胞系中的表达,通过靶向敲低Hep G2肝癌细胞Nupr1,观察其对肝癌细胞增殖及迁移的影响。方法通过实时定量PCR检测BEL-7402、QSG-7703、SMMC-7721、Hep G2肝癌细胞中Nupr1的表达。采用RNA干扰技术敲低Hep G2细胞中Nupr1的表达,通过MTT法及集落形成实验比较细胞的增殖能力的变化,用流式细胞术进行细胞周期分析,利用TranswellTM实验观察Nupr1对细胞迁移能力的影响。结果 Hep G2人肝癌细胞中Nupr1的表达显著高于其他肝癌细胞系。靶向Nupr1的2个短发夹RNA(shRNA)均能有效敲低Hep G2肝癌细胞中Nupr1的表达,抑制效率分别为72.25%和84.25%。Nupr1表达降低能够抑制细胞增殖,导致细胞周期发生G1期阻滞。Nupr1敲低显著降低细胞的迁移能力及集落形成能力。Western blot结果显示Nupr-1表达降低能够上调细胞周期负性调控因子p21和p27的表达水平。结论靶向敲低Nupr1抑制Hep G2肝癌细胞的增殖及迁移。
- 黄红艳张彦斌王小利周心娜李莎王嫚娜任军
- 关键词：肝癌增殖迁移细胞周期
- 中晚期胃癌患者外周血T细胞亚群检测的临床意义被引量：21
- 2017年
- 目的:研究胃癌患者外周血T淋巴细胞亚群变化的临床意义。方法:选取2015年10月至2016年5月北京世纪坛医院肿瘤内科收治的67例胃癌患者,抽取外周血,采用流式细胞术检测T细胞及其亚群,同时抽取外周血检测肿瘤标记物CEA、CA199,对结果进行分析比较,并对患者进行随访。结果:67例胃癌患者中,Ⅲ期患者Tc(CD8+CD28+)均值为12.3±5.1,Ⅳ期患者Tc(CD8+CD28+)均值为9.9±4.6,两者比较差异具有统计学意义(P=0.043);CEA升高的患者Tc(CD8+CD28+)均值为9.3±3.6,而CA199未升高的患者Tc(CD8+CD28+)均值为12.1±5.6(P=0.025)。CA199升高的患者Tc(CD8+CD28+)均值为9.3±4.2,而CEA未升高的患者Tc(CD8+CD28+)均值为12.1±5.3(P=0.029),Tc(CD8+CD28+)下降的患者较未下降的患者的总生存时间(overall survival,OS)降低(8.1个月vs.15.1个月,P=0.008)。结论:胃癌患者随着TNM分期的提高,其机体的细胞免疫功能呈现逐渐下降的趋势;CEA、CA199升高的患者Tc(CD8+CD28+)降低,二者呈负相关;Tc(CD8+CD28+)降低,患者的OS缩短。
- 周蕾姜妮王小利周心娜司文任军
- 关键词：胃癌淋巴细胞亚群免疫功能
- PD-1/PD-L1阻断剂免疫治疗不良反应及其处理原则被引量：42
- 2017年
- 免疫治疗成为继手术、放疗、化疗后又一种重要的抗肿瘤手段。其中抗程序细胞死亡蛋白1(programmed death-1,PD-1)及配体(PD-1 ligand,PD-L1)免疫检查点阻断剂,在肿瘤治疗中取得了突破性进展,已被美国食品药品管理局(FDA)批准用于恶性黑色素瘤、转移性鳞状非小细胞肺癌、晚期肾癌、头颈鳞状细胞癌、尿路上皮癌等治疗,但随着PD-1/PD-L1阻断剂在临床上逐步推广,越来越多的免疫相关副反应(immune-related adverse events,ir AEs)引起关注。本文对PD-1/PD-L1阻断剂治疗引起的各器官的免疫相关不良反应以及对应临床处理方法进行综述,有助于临床医护工作者诊断、预防及治疗其相关不良反应。
- 黄乐富邸岩徐小寒孙元元王苗苗贺子轩景句周心娜王小利任军
- 关键词：PD-1PD-L1免疫治疗
- 两种方法分离免疫细胞用于高通量测序TCR组库分析的比较被引量：1
- 2015年
- 目的探讨两种方法分离免疫细胞进行高通量T细胞表面的T细胞变体(TCR),组库分析的区别及可行性。方法分别采用免疫磁珠分选纯化CD3阳性T细胞和Ficoll-Paque梯度离心法分离外周血淋巴细胞的方法制备TCR测序所需样品各1例,提取DNA后多重聚合酶链式反应(PCR)扩增CDR3区域,将扩增得到的PCR产物纯化后构建免疫组库,进行高通量测序及生物信息学分析。结果两种方法获得的免疫细胞提取DNA后均能够满足TCR免疫组库建库需要,高通量测序结果显示互补决定簇3(CDR3)区域长度呈高斯分布,来自健康志愿者的TCR具有丰富多样性,肿瘤患者TCR多样性呈寡克隆分布。结论纯化的T细胞或者直接分离得到的淋巴细胞均可用于免疫组库构建及后续TCR CDR3受体库高通量测序分析,TCR CDR3多样性可能直接反应机体免疫状态。
- 黄红艳王小利周心娜张彦斌李莎任军
- 关键词：T细胞受体高通量测序
- 四个半LIM结构域蛋白1对人肝癌细胞紫杉醇耐药影响的研究被引量：3
- 2017年
- 目的探讨四个半LIM结构域蛋白1(FHL1)对肝癌细胞紫杉醇耐药的作用机制。方法按照FHL1的表达状态,设置敲低FHL1表达的肝癌细胞株为实验组,表达FHL1的肝癌细胞株为对照组,分别给予紫杉醇药物处理,并同时以奥沙利铂作为实验参照。细胞活性测定不同表达的细胞活性的改变,细胞克隆实验检测不同表达细胞的克隆形成。实验组和对照组的细胞克隆接种于裸鼠,并给予紫杉醇治疗,观察两组的成瘤情况以及对紫杉醇的反应。进一步的凋亡蛋白Caspase-3活性测定实验分别对两组Caspase-3活性进行测定。结果紫杉醇药物处理后,实验组和对照组的细胞活性分别为0.41±0.02和0.70±0.02(HepG2细胞);0.44±0.02和0.63±0.03(SMMC 7721细胞),差异均有统计学意义(均P<0.05),且加入奥沙利铂后,实验组和对照组的细胞活性分别为0.70±0.02和0.71±0.02(HepG2细胞);0.64±0.02和0.63±0.03(SMMC 7721细胞),差异无统计学意义(P>0.05)。实验组与对照组的克隆形成计数分别为93.52±14.58和302.48±21.56(HepG2细胞);55.14±10.82和192.28±19.47(SMMC 7721细胞),差异均有统计学意义(均P<0.05);在裸鼠实验中,实验组与对照组肿瘤体积分别为0.02±0.02和1.89±0.51,差异统计学意义(P<0.05)。此外,Caspase-3活性实验显示,实验组与对照组Caspase-3表达分别为10.27±0.47和26.72±0.54,差异有统计学意义(P<0.05);加入抑制药Z-VAD-FMK后,实验组与对照组Caspase-3表达分别为8.87±0.36和29.96±0.68,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 FHL^(-1)是紫杉醇耐药基因,FHL^(-1)敲低后,紫杉醇的抗肿瘤作用增强,促进Caspase-3激活,紫杉醇诱导的细胞凋亡作用增强。
- 周蕾姜妮周心娜王小利任军
- 关键词：紫杉醇肝癌细胞耐药
- 敲低SET7慢病毒载体的构建及对乳腺癌细胞生长的影响被引量：1
- 2016年
- 目的为了探讨组蛋白甲基转移酶SET7在乳腺癌发生发展中的功能,构建SET7基因的RNA干扰(RNAi)慢病毒表达载体,研究其对乳腺癌细胞ZR75-1生长的影响。方法根据人SET7的c DNA序列,设计SET7基因短发夹RNA(shRNA)引物,并克隆到p SIH-H1-Puro载体上,包装成慢病毒,感染人乳腺癌细胞ZR75-1,通过实时定量(real-time)PCR以及Western印迹检测干扰效果,并通过生长曲线研究敲低SET7对ZR75-1细胞生长的影响。结果 DNA测序结果表明,SET7 shRNA慢病毒表达载体构建成功。实时定量PCR和Western印迹结果显示,SET7 shRNA能有效抑制SET7基因的表达。生长曲线实验表明,敲低SET7可抑制人乳腺癌细胞ZR75-1的生长。结论成功构建了SET7 shRNA慢病毒表达载体,感染人乳腺癌细胞ZR75-1后,有效抑制了内源SET7基因的表达,敲低SET7能抑制ZR75-1细胞的生长,为进一步研究SET7在乳腺癌中的功能奠定了基础。
- 周蕾姜妮王小利刘婕丁丽华
- 关键词：慢病毒载体RNA干扰乳腺肿瘤
- 树突状细胞-细胞因子诱导杀伤细胞免疫治疗预计生存期低于3月的晚期恶性肿瘤患者被引量：2
- 2014年
- 目的探讨预计生存期小于3月的晚期肿瘤患者是否会从DC-CIK治疗中获益。方法对13例预计生存期小于3月、ECOG评分大于3的患者进行DC-CIK治疗,同时检测治疗前后T淋巴细胞亚群的变化,对比治疗前后ECOG评分的变化,统计OS,观察不良反应。结果末次DC-CIK治疗后两个月与治疗前对比,CD3+T细胞的增加和CD8+CD28-T细胞的减少差异有统计学意义。通过DC-CIK治疗11位患者ECOG评分得到改善,11位患者OS大于预计的3月,而且有7位患者至随访末仍然生存(均已大于6月),无明显不良反应发生。结论预计生存期小于3月的晚期肿瘤患者行DC-CIK治疗,是安全有效的。
- 赵艳杰宋雨光张红梅姜妮朱希山王小利周心娜杨化兵任军
- 关键词：恶性肿瘤免疫治疗细胞因子诱导杀伤细胞
- 免疫治疗背景下提高临床肿瘤教学水平的探讨被引量：5
- 2014年
- 肿瘤发病率的日益攀升以及临床肿瘤学的迅速发展,对培养专业的临床肿瘤学人才提出了更高的要求。随着第一个细胞免疫治疗药物Sipuleucel-T被美国FDA批准用于晚期前列腺癌的治疗,肿瘤治疗进入免疫治疗的新时代,现有传统临床肿瘤学教学方法及观念已经不能适应目前的要求,因此必须提高临床教学水平。本文在肿瘤免疫治疗迅速发展背景下,对如何提高临床肿瘤教学水平进行思考与探讨,通过加强肿瘤分子生物学及细胞分子免疫学理论教学,以及在教学过程中贯穿循证医学与个体化治疗相结合的理念、引入多学科参与的肿瘤综合治疗模式,并强调心理干预和人文关怀的重要性,兼顾教学理论和临床实践最新进展及趋势,有效地帮助学生树立全面、科学的临床肿瘤治疗理念,掌握改善临床肿瘤治疗的有效方法,切实提升临床肿瘤学的教学质量和水平,培养出能胜任现代临床肿瘤学实践需求的专业人才。
- 黄红艳王小利周心娜宋清坤任军
- 关键词：临床肿瘤学免疫治疗教学
