王剑波 作品数:5 被引量:43 H指数:2 供职机构: 第二军医大学 更多>> 发文基金: 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
数量可变的串联重复(VNTR):个体识别的新武器 被引量:1 1991年 数量可变的串联重复(Variable number of tandem repeats,简称VNTR)是1980年Wyman等无意中在人DNA文库中分离到的一个高变重复区。1982年Bell等在人胰岛素基因上游363 bp处也发现一类似高变区,它由—14 bp的序列重复40~170次而成。之后,类似高变区又在α-球蛋白、H-rras、肌球蛋白及HBV的X区等基因中发现。1985年Nakamura把这种高变重复区称为“VNTR”。现已证实VNTR分布广,种类多,是一很好的遗传标志。其特征是同一序列(往往是9~60 bp)重复几次到几百次。VNTR高度多态,因而有极强的个体特异性,它按孟德尔方式遗传且突变率低。现已成功地应用于个体识别、亲子鉴定、案证分析、物种鉴别、基因诊断等各个方面。一。 王剑波关键词:VNTR 串联重复短序列的若干生物学特性 被引量:5 1992年 串联重复短序列是大量重复序列中的一种,目前对其研究越来越多。其中的VNDR、VNTR在人群中杂合率高、多态性强,已成功应用于基因诊断,基因制图等方面,是一有前途的遗传标记系统。此外,串联重复短序列还有活跃的生物学功能,它能引起DNA结构变化、影响基因调控、直接编码蛋白质,有的还有自身特异结合蛋白。本文就此作一综述,以期对其引起一定的重视。 王剑波 蒋左庶VNTR在临床研究中的应用 被引量:2 1992年 “数量可变的串联重复序列(VNTR)”是新发现的一种遗传标志,以同一短序列重复串联为特征。其重复单位种类多,重复次数具有高度个体特异性。就一特定位点而言,人群中杂合率在75%以上。它分布于人整个基因组,酶切片段呈经典遗传,突变率低。用任一种酶内切群体DNA后均可得到多个等位基因。目前已成功地应用于个体鉴别、基因诊断、人类基因制图等各个方面,是一种比RFLP更有前途的遗传标记。 王剑波 蒋左庶关键词:串联重复序列 VNTR 成纤维细胞基因治疗血友病B的临床Ⅰ期试验 被引量:35 1993年 本文首次报道了以皮肤成纤维细胞为靶细胞,对血友病B患者实施基因治疗的监床Ⅰ期试验。首先用构建有人凝血因子Ⅸ cDNA的反转录病毒载体(XL-Ⅸ和N2 CMV-Ⅸ)感染血友病B患者皮肤成纤维细胞(HBSF),选择得到表达有人Ⅸ因子蛋白的细胞,而后进行一系列安全性检测,包括细胞连续传代形态观察;染色体分析,软琼脂试验;裸鼠接种试验;胶原过敏试验;内毒素试验等,在确定表达人Ⅸ因子蛋白的细胞的安全性后,大量扩增细胞,最后,细胞用胶原包埋,直接注射到血友病B患者腹部或背部皮下。患者1体内凝血因子IX浓度从71ng/ml上升到约240 ng/ml,至今维持在220ng/ml,持续表达6个月,凝血因子Ⅸ的凝血活性也从2.9%上升到6.3%,该患者的临床症状改善;患者2体内凝血因子Ⅸ浓度亦从130 ng/ml上升到约280 ng/ml,至今维持在220 ng/ml,持续表达5个多月,但活性增加不稳定。两名受试者至今没有发现任何副作用和危害,正在随访之中。我们认为反转录病毒介导的基因转移自体皮肤成纤维细胞,用胶原包埋,皮下移植是安全可靠的,也是简便易行的,从而成功地完成了血友病B基因治疗的临床Ⅰ期试验。 薛京伦 卢大儒 周洁民 邱信芳 王建民 孟沛霖 韩凤来 闵碧荷 王肖鹏 王剑波 梁嘉靖 蒋左庶关键词:基因治疗 血友病 DNA的异常构型及检测方法 1992年 自从B-DNA右手双螺旋模型揭示以后,人们又陆续在质粒、原核细胞、真核细胞中发现了其它非B-DNA的构型。采取这些构型的是各种重复序列,尤其是串联重复序列。因非B-DNA构型不太常见,故又称之为异常构型。它们的作用涉及DNA重组、复制起止、基因转录及染色体浓缩等方面,也可能是各种诱变剂的作用热点。DNA构型与功能可能象蛋白质结构与功能一样,是颇有意义的研究领域。 1.DNA异常构型的存在 王剑波关键词:脱氧核糖核酸 构型