梁婷
- 作品数:39 被引量:70H指数:4
- 供职机构:山东大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金中国博士后科学基金山东省卫生厅科技基金更多>>
- 相关领域:医药卫生文化科学化学工程生物学更多>>
- 巨噬细胞移动抑制因子研究进展被引量:19
- 2004年
- 梁婷侯桂华
- 关键词:巨噬细胞移动抑制因子巨噬细胞单核细胞糖皮质激素基因结构生物学特点
- 小鼠巨噬细胞移动抑制因子(MIF)原核表达载体pQE31-MIF的构建被引量:3
- 2002年
- 目的 :获得小鼠巨噬细胞移动抑制因子(MIF)全长基因克隆 ,并构建重组表达载体pQE3 1 MIF。方法 :用RT PCR技术 ,以特异性寡核苷酸为引物 ,从小鼠脾脏总RNA中扩增MIF基因 ,插入pMD1 8 T载体 ,用限制性核酸内切酶和DNA序列分析鉴定重组克隆。构建并鉴定原核表达载体pQE3 1 MIF。结果 :成功克隆了小鼠MIF基因 ,构建了重组质粒pMD1 8 MIF及重组原核表达质粒。序列分析显示获得的MIF基因cD NA序列与文献报导一致。结论 :成功构建了重组表达质粒pQE3 1 MIF 。
- 于敏侯桂华韩建奎杨富勇刘德宜张超李璐娜梁婷
- 关键词:巨噬细胞移动抑制因子原核表达小鼠
- 自噬对^(125)I-anti-TLR5同种移植排斥靶向显像的影响被引量:2
- 2017年
- 目的探讨自噬对放射性碘125标记抗Toll样受体5(^(125)I-anti-TLR5)靶向同种移植排斥显像的影响及特点。方法建立小鼠皮肤同种移植模型,分为对照组(无药物处理)、雷帕霉素组、3-甲基腺嘌呤(3MA)组和联合组(雷帕霉素+3MA处理)。采用Iodogen法常规制备^(125)I-anti-TLR5,测定其在生理盐水和血清中的稳定性;体外根据浓度不同将细胞分为对照组、雷帕霉素组(10 ng/mL)、3MA组(10 mmol/L)和联合组(10 ng/mL雷帕霉素+10 mmol/L3MA),研究^(125)I-anti-TLR5与处理细胞的结合与解离;在移植后9 d,在小鼠同种皮肤移植模型尾静脉注射^(125)I-anti-TLR5,72 h后进行生物学分布研究,24、48、72 h进行全身磷屏自显影显像,分析T/NT比值(靶与非靶比值);采用病理及免疫组化染色法分析移植皮片Beclin1/TLR5的表达。结果^(125)I-anti-TLR5标记率高,稳定性好。与雷帕霉素组相比,联合组细胞与^(125)I-anti-TLR5结合率与解离率无明显改变。注射^(125)I-anti-TLR5后72 h,标记物主要经肝肾代谢。移植皮片放射性浓聚,雷帕霉素组和联合组T/NT比值显著高于对照组(P<0.001,P<0.001)。全身动态磷屏放射自显影显像显示,各组48 h移植皮片即可显像,其中雷帕霉素组移植皮片放射性浓聚最明显(P<0.001);雷帕霉素组和联合组72 h显像明显,放射性活度比均显著高于对照组(P<0.001)。移植后12 d对照组移植皮片炎症细胞浸润明显,而雷帕霉素组与联合组炎性浸润减少;对照组及雷帕霉素组自噬分子Beclin1表达增高,而联合组无明显降低;雷帕霉素组及联合组TLR5表达无显著变化。结论自噬抑制对雷帕霉素作用下TLR5表达及^(125)I-anti-TLR5靶向同种移植排斥显像无明显影响,^(125)I-anti-TLR5可用于免疫耐受状态下同种移植排斥显像。
- 赵姗姗李晓梅梁婷张超宋静侯桂华
- 关键词:TOLL样受体5自噬
- ^(131)I-rFliC的制备及乳腺癌荷瘤鼠体内生物学分布特征
- 2012年
- 目的探讨放射性碘131(131I)标记基因重组鞭毛蛋白(rFliC)在乳腺癌荷瘤小鼠体内的生物分布特征及意义。方法逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、蛋白质印迹法(Western blot)及免疫荧光检测人乳腺腺癌细胞系(MCF-7)中rFliC的受体TLR5的表达;四氯二苯基苷脲(Iodogen)法131I标记rFliC,检测其放射化学纯度、稳定性、细胞摄取状况;制备MCF-7荷瘤鼠,注射131I-rFliC后,观察其生物学分布及肿瘤靶向性。结果①MCF-7表达TLR5的mRNA及蛋白;随着rFliC浓度的增加,TLR5 mRNA及蛋白表达逐渐减弱;②131I-rFliC标记率达95.19%;放射化学纯度为96.46%;在血清中稳定性高,可被MCF-7稳定摄取;③131I-iFliC主要经肝肾代谢,肿瘤靶向性明显,24 h靶/肌肉(T/M)放射性比值为7.09,可获得清晰放射自显影像。结论131I-rFliC肿瘤靶向明显,有望作为一种新型分子探针监测乳腺癌的发生发展。
- 杨欢梁婷张超宋静郝静侯桂华
- 关键词:鞭毛蛋白TOLL样受体5放射性碘标记
- Rapamycin和CyclosporinA诱导同种移植耐受机制的研究
- 陈富强曲莉莉张超梁婷宋静徐佳侯桂华
- 131I-Flagellin的制备及在乳腺癌荷瘤小鼠的生物学分布研究
- 目的通过制备~(131)I-细菌鞭毛蛋白(Flagellin),探讨其在乳腺癌荷瘤小鼠体内的生物分布及乳腺癌的靶向性。方法(1)利用Westem B1oting检测TLR5表达;(2)Iodogen法标记,Sephade...
- 杨欢梁婷张超宋静郝静侯桂华
- ^(125)Ⅰ标记抗MIF单克隆抗体制备及其生物学活性的研究
- 2010年
- 目的:建立125Ⅰ标记抗巨噬细胞移动抑制因子(MIF)单克隆抗体(mAb)方法,探讨其在体内外生物学活性。方法:①利用Iodogen法,Na125Ⅰ标记Anti-mMIF mAb,用Sephadex G-25柱凝胶过滤层析法分离纯化,测定其标记率。纸层析法测定放射化学纯度和稳定性。②采用ELISA和改良MMI鉴定其免疫活性及生物学活性。③观察小鼠体内的生物学分布情况。结果:①标记的最佳条件为Iodogen 40~100μg、抗体20~50μg[Iodogen(m)∶抗体(m)=2∶1],加入Na125I15~30 MBq、室温反应10~15 min,标记率为(90.40±3.34)%,放射化学纯度为(97.60±1.14)%,比活度为12.2~26.0 MBq/μg;标记物4℃条件下放置3周后放射化学纯度仍为90.36%。②125Ⅰ-mMIF mAb能与抗原MIF特异性结合,较好地保持其免疫活性及生物学活性。③体内生物学分布,在肺、肝、脾、肾内具有较高的放射性计数。结论:Iodogen法获得高标记率和放射化学纯度的125Ⅰ-mMIF mAb,具有很好的体外稳定性,其在体内外保持较好的生物学活性。为进一步应用125I-mMIF mAb进行放射免疫显像和靶向治疗奠定了实验基础。
- 宋静张超梁婷徐佳侯桂华
- 关键词:IODOGEN法放射免疫显像生物学活性
- MIF在小鼠同种皮肤移植排斥过程中的表达被引量:2
- 2004年
- 目的通过对巨噬细胞游走抑制因子MIF在小鼠同种皮肤移植排斥前后脾组织和移植皮片中的相对表达量分析探讨MIF表达与小鼠同种皮肤移植排斥的关系。方法:利用小鼠同种皮肤移植模型,对皮肤移植后不同时间的小鼠脾细胞和移植皮片进行RNA提取及逆转录聚合酶链反应RT-PCR,以β肌动蛋白β-actin作为对照,比较移植前后MIF的相对表达量。结果移植后的移植皮片中MIF的相对表达量有明显变化,移植后第1、7、14天,逐渐升高,在排斥高峰期第14天达到最高,第21天皮片完全排斥后下降,但仍比移植前水平高。在移植过程中,脾细胞MIF相对表达量无明显变化。结论在移植排斥过程中,移植物局部MIFmRNA表达增强,提示MIF可能参与了小鼠同种皮肤移植的局部排斥反应。
- 李璐娜侯桂华梁婷刘德宜张超
- 关键词:巨噬细胞游走抑制因子逆转录聚合酶链反应小鼠
- 抗CD40L单抗(MR-1)对小鼠同种移植过程中T细胞的影响
- 目的:研究小鼠同种皮肤移植模型的组织学改变,并探讨体外条件下抗CD40L单克隆抗体(MR-1)在小鼠同种皮肤移植排斥过程中对T细胞增殖及IL-2分泌的影响。方法:1.小鼠同种移植模型的制备:纯系C57BL/6小鼠作为供体...
- 梁婷侯桂华李璐娜刘德宜张超
- 关键词:CD40L移植排斥T细胞IL-2
- 文献传递
- 人TPO的基因克隆、重组表达和生物学效应初探
- 研究目的:血小板生成素(TPO)是哺乳动物调节血小板生成的主要细胞因子,具有刺激巨核细胞集落生成的功能.体外实验表明,TPO既可以促进早期巨核细胞分化,如形成巨核细胞集落形成单位,也可作用于晚期巨核细胞的成熟,如影响巨核...
- 梁婷
- 关键词:血小板生成素RT-PCR基因克隆生物活性
- 文献传递