林佳菲
- 作品数：15 被引量：30H指数：4
- 供职机构：上海交通大学医学院附属瑞金医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生交通运输工程水利工程电子电信更多>>
- 隐匿性乙型肝炎患者乙肝病毒preS／S基因突变分析被引量：8
- 2011年
- 目的隐匿性乙肝感染与严重慢性肝损伤的病毒学与免疫学机制尚未完全阐明，拟通过研究隐匿性HBVpreS／S区基因变异，初步揭示隐匿性乙肝发生及其致慢性严重肝损伤的病毒学因素。方法收集瑞金医院门诊及住院HBsAg阴性患者的血清，抽提DNA，利用巢式PCR方法对隐匿性感染进行检测；克隆阳性标本的preS／S区全长基因并测序分析，探讨其突变类型与严重慢性肝损伤的关系。结果在全部468份HBsAg阴性血清中共检出隐匿性HBV感染69例，HBcAb单独强阳性组、HBeAb单独强阳性组、HBeAg单独阳性组、HBcAb与HBsAb同时强阳性组和5项指标全阴性组的检出率分别为16％、8．7％、36．4％、18．3％和0％。隐匿性感染患者血清HBV．DNA水平明显低于HBsAg阳性感染患者，隐匿性HBVpreS／S区缺失突变、preS2基因M1I和Q2K突变，S基因Q129N／R／P、G185R和S210R突变的频率明显高于HBsAg阳性组。伴严重肝损伤的隐匿性感染较无严重肝损伤隐匿性感染患者在性别比例及血清HBV—DNA水平方面均有明显差异。伴严重肝损伤的隐匿性感染的HBV在preS2基因MII和Q2K，S基因G185R和S210R的突变频率明显高于无严重肝损伤者，但preS缺失和s基因Q129N／R／P的突变频率低于无严重肝损伤者。以伴严重肝损伤的隐匿性感染与HBsAg阳性严重肝损伤者相比，后者HBV—DNA水平明显高于前者，但preS2基因MII和Q2K、S基因G185R和S210R突变的频率明显低于前者。结论隐匿性感染与HBsAg阳性病人之间致慢性严重肝损伤的病毒学因素存在不同；preS2区MII和Q2K以及s区G185R和S210R等突变对于隐匿性乙肝患者而言，可能是评价其是否进展为严重慢性肝损伤的有用指标。
- 吴蓓颖蔡刚林佳菲陆秋涯李琳樊绮诗
- 关键词：乙型肝炎病毒前S/S基因突变分析肝损害
- 21基因复发风险评分在乳腺黏液癌中的临床应用价值被引量：1
- 2021年
- 目的探讨21基因复发风险评分在乳腺黏液癌(MBC)中的临床应用价值。方法选取接受手术治疗的96例雌激素受体(ER)阳性、人类表皮生长因子受体2(HER-2)阴性的MBC患者,收集所有患者的临床资料。提取所有患者肿瘤组织石蜡包埋标本中的RNA,采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测21基因的表达,计算21基因复发风险评分,根据评分结果将所有患者分为低危组(<18分)、中危组(18~30分)和高危组(>30分)。采用多因素Logistic回归分析评估21基因复发风险评分的独立影响因素。采用Kaplan-Meier生存曲线评估无病生存期(DFS)。结果96例MBC患者中低危组23例(24.0%)、中危组63例(65.6%)、高危组10例(10.4%)。低危组、中危组及高危组之间孕激素受体(PR)表达、分子分型及肿块大小差异均有统计学意义(P<0.05),年龄、绝经时间、stage分期、Ki67表达差异均无统计学意义(P>0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,PR低表达是MBC患者21基因复发风险评分为高危的独立危险因素[比值比(OR)=7.271,95%可信区间(CI)为0.728~3.240]。化疗的选择与Ki67表达、分子分型、PR表达及21基因复发风险评分有关(P<0.05),与年龄、肿块大小、绝经时间、手术方式、stage分期无关(P>0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,21基因复发风险评分及Ki67表达是选择化疗的独立影响因素(P<0.05)。Kaplan-Meier生存曲线分析结果显示,低危组、中危组及高危组之间DFS差异均无统计学意义(P>0.05)。结论在MBC患者中,21基因复发风险评分与PR表达密切相关,是辅助化疗选择的独立影响因素,但不能预测患者DFS的长短。
- 林佳菲陈小松吴蓓颖蔡刚林琳
- 关键词：乳腺黏液癌临床病理特征辅助化疗
- 肿瘤坏死因子受体相关因子4促表皮生长因子受体激酶活性及对肺癌的促进作用
- 2024年
- 目的探讨肿瘤坏死因子受体相关因子4(TRAF4)促进表皮生长因子受体(EGFR)异常激活的作用及其对肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法收集2015年1月至2017年5月于海军军医大学第一附属医院行肺腺癌切除患者的肿瘤组织,免疫组化检测肺癌组织中TRAF4和Ki-67的表达,实时荧光定量PCR检测Cyclin D和Vimentin mRNA的表达。通过异基因移植模型研究TRAF4对肺癌A549细胞的肿瘤生长能力的影响,采用细胞计数试剂盒8和BrdU实验检测TRAF4或EGFR对肿瘤增殖能力的影响,Transwell实验检测肿瘤细胞转移及侵袭能力。构建不同的TRAF4和EGFR结构域缺失表达载体转染细胞,通过免疫共沉淀实验研究TRAF4和EGFR相互作用方式。结果非小细胞肺癌(NSCLC)组织中TRAF4的表达与Ki-67、Cyclin D和Vimentin的表达呈正相关(r 2分别为0.438、0.695和0.736,均P<0.01)。NSCLC患者肿瘤组织免疫组化检测结果显示,高表达TRAF4的组织同时高表达Ki-67。TRAF4高表达(TRAF4阳性率>30%)患者较TRAF4低表达患者(TRAF4阳性率≤30%)的无进展生存时间缩短(中位无进展生存时间分别为12和19个月,P=0.034)。Traf4^(-/-)细胞较Traf4^(+/+)细胞增殖能力减弱,形成肿瘤体积小(P<0.05)。对形成的肿瘤组织进行Ki-67染色,Cyclin D和Vimentin mRNA表达水平检测,结果显示,Traf4^(-/-)细胞形成的肿瘤组织中Ki-67表达水平[(45.6±8.7)%]低于Traf4^(+/+)细胞形成的肿瘤组织[(62.3±10.3)%,P=0.015],Cyclin D mRNA表达水平(1.01±0.15)和Vimentin mRNA表达水平(1.01±0.12)均低于后者(分别为3.41±0.32和3.12±0.18,均P<0.05)。Western blot结果显示,随着细胞内TRAF4表达水平升高,无论是野生型还是活化突变型细胞,EGFR的磷酸化水平均明显升高。基因敲除EGFR后,A549细胞相对增殖、迁移和侵袭能力减弱(均P<0.01)。免疫共沉淀实验显示,TRAF4通过TRAF结构域与EGFR的近膜区肽段结合,TRAF4过表达条件下,EGFR分子之间的相互结合增�
- 聂小蒙董丹凤林佳菲吴蓓颖蔡刚
- 关键词：肺肿瘤表皮生长因子受体自身磷酸化
- 活动性系统性红斑狼疮患者外周血IL-17^+Foxp3^+调节性T细胞升高的意义被引量：6
- 2019年
- 目的多项研究已观察到Foxp3^+调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)具有Th17细胞可塑性,但其病理与生理意义并未阐明。本研究拟观察系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者外周血Foxp3^+Treg IL-17的分泌水平,并探讨其在SLE病理过程中的意义。方法研究共纳入32例SLE患者(包括14例活动性患者和18例非活动性患者)和13位年龄性别匹配的健康志愿者,通过流式细胞术分析受试者外周血IL-17在Treg及效应性T细胞中的表达及IL-17^+Foxp3^+Treg的表型特点,分析该细胞与疾病活动度等临床指标的关系。分离5例健康志愿者外周血CD4^+CD25^+T细胞,采用炎症因子处理,检测激素处理前后IL-17的表达水平。结果活动性SLE患者外周血IL-17^+Foxp3^+Treg的水平明显高于非活动性患者及健康对照者。活动性患者该亚群细胞Foxp3和CD45RA的表达水平下降,而IL-2、颗粒酶B、PD-1和GITR(糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体)的表达水平则明显升高。高IL-6等炎症因子水平能明显促进Treg表达IL-17。结论活动性SLE患者外周血高水平IL-17^+Foxp3^+Treg细胞可能与其体内高炎症水平有关,该群细胞表现出明显的效应性T细胞转化,提示其可能丢失部分免疫调节功能。
- 范臻佳薛明慧金丽兰林佳菲蔡刚
- 关键词：调节性T细胞白细胞介素17免疫表型
- PTEN及其突变体可诱导慢病毒表达系统的构建
- 2013年
- 目的:构建可诱导表达野生型或突变型第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN)的慢病毒表达体系,为进一步研究PTEN与肿瘤间的关系提供理想的实验工具。方法:提取甲状腺癌、肺癌及其癌旁组织的RNA,经反转录后扩增PTEN片段,将其连接入慢病毒载体,与病毒包装质粒共转染人胚肾T细胞(293T)细胞,获得病毒。将其感染MDA-MB-231细胞,用嘌呤霉素筛选,获得稳定表达的细胞株。采用蛋白印迹法检测稳定转染的细胞株中PTEN基因的表达情况,用软琼脂克隆形成实验检测细胞株的克隆形成能力。结果:在甲状腺癌和肺癌中发现PTEN突变体;蛋白印迹检测结果证实野生型和突变型PTEN的慢病毒表达体系构建成功。突变型PTEN的克隆形成能力强于野生型PTEN。结论:发现了PTEN突变体,并成功构建了野生型和突变型PTEN基因的可诱导慢病毒表达体系,突变型PTEN不但有抑癌作用,还有致癌作用。
- 林佳菲顾志冬倪培华刘湘帆方旭前樊绮诗
- 关键词：突变型慢病毒表达载体
- 血清胸苷激酶1在乳腺疾病患者血清中表达的探讨
- 目的研究血清胸苷激酶1(thymidine kinase 1,TK1)在健康人、乳腺良性疾病及乳腺恶性肿瘤患者血清中表达量的差异。方法采集单纯乳腺病患者血清12例,乳腺良性肿瘤患者血清13例及乳房浸润性导管癌患者血清34...
- 吴蓓颖蔡刚林佳菲樊绮诗
- 关键词：乳腺恶性肿瘤健康人乳腺良性肿瘤胸苷激酶乳腺病
- 文献传递
- HVEM过表达树突状细胞对自身免疫性心肌炎的作用
- 2011年
- 目的 探讨单纯疱疹病毒进入介导子（herpes virus entry mediator,HVEM）基因修饰的树突状细胞（dendritic cells,DC）能否防治肌凝蛋白诱导的小鼠心肌炎模型,并分析其机制.方法 以肌凝蛋白加弗氏佐剂免疫小鼠制备实验性自身免疫性心肌炎（EAM）动物模型,通过小鼠尾静脉输注肌凝蛋白冲击的HVEM基因修饰的DC,观察其对心肌炎的免疫保护作用,并探讨其可能机制.结果 HVEM基因修饰的DC能够抑制自身免疫应答造成的小鼠心肌损伤,其机制主要是通过分泌IL-10,并诱导产IL-10调节性T细胞（Tr1）抑制自身反应性T细胞的活化.结论 HVEM基因修饰的DC能抑制EAM的发生,并且HVEM介导的信号网络可能在不同的细胞中产生不同的作用.
- 蔡刚汪怀周吴蓓颖林佳菲沈茜
- 关键词：实验性自身免疫性心肌炎免疫调节树突状细胞
- 上海地区地中海贫血基因突变类型的研究
- 2024年
- 目的检测上海地区疑似地中海贫血(简称"地贫")患者珠蛋白基因的序列变化,分析常见及罕见地贫突变类型及频率,为遗传咨询提供参考。方法以2016年6月至2019年12月间在上海交通大学医学院附属瑞金医院儿科、血液科和妇产科就诊的4644例疑似为地贫的患者作为研究对象。采用跨越断裂点聚合酶链反应(Gap-PCR)和反向斑点杂交法(RDB)对患者进行常见地贫基因检测。对血液型表型与常见地贫基因检测不符、疑似携带罕见突变的样本,采用Gap-PCR及Sanger测序法进行检测。结果在4644例标本中,共检出常见地贫基因突变2194例(47.24%),包括α-地贫701例(15.09%),β-地贫1448例(31.18%),α-复合β-地贫45例(0.97%)。检出罕见珠蛋白基因突变46例,包括α-珠蛋白基因突变17例,β-珠蛋白基因突变29例,其中α-珠蛋白基因突变CD77(CCC>ACC)(HBA2:c.232C>A),β-珠蛋白基因突变NG_000007.3:g.70567_71015del449、Codon102(-A)(HBB:c.308_308delA)和IVS-Ⅱ-636(A>G)(HBB:c.316-215A>G)为新发现的基因突变类型。结论上述研究中上海地区常见地贫基因的检出率为47.24%,检出罕见突变46例,地贫基因突变类型多样,可为更准确的基因诊断及遗传咨询提供参考。
- 顾燕英吴蓓颖陆一一顾鸣敏林佳菲
- 关键词：地中海贫血基因突变
- 生存素检测在膀胱癌实验诊断中的意义被引量：3
- 2005年
- 目的:检测膀胱癌患者血液和尿液细胞中生存素(survivin)基因的表达并评价其临床意义。方法:取40例膀胱移行细胞癌患者(TCC组)、19例其他泌尿系统疾病患者(对照组)和20名健康成人(正常人组)的外周血和新鲜尿液,以实时逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测外周血有核细胞及尿液脱落细胞中生存素基因的表达,并检测甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)基因的表达作为对照。结果:TCC组患者外周血生存素25例阳性(62.5%),对照组和正常人组均为阴性;尿脱落细胞检测结果示TCC组28例阳性(70.0%),对照组仅2例阳性(10.5%),而正常人组均为阴性。TCC组阳性率与其他2组差异有显著性(P<0.01),而在不同病理分级的TCC患者的阳性率无统计学差异(P>0.05)。合并分析血液和尿液中的生存素检测结果对TCC的总检出率达87.5%,对TCC组Ⅱ级和Ⅲ级的检出率(96.6%)显著高于Ⅰ级(63.6%)(P<0.05)。结论:生存素基因在膀胱癌患者血液和尿液细胞中重新表达,运用实时RT-PCR法测定血液和尿液细胞中生存素表达具有较好的肿瘤特异性,可作为一种新的检测膀胱癌的无创性方法。
- 徐锋曹文俊吴华成王枕亚林佳菲樊绮诗
- 关键词：生存素移行细胞癌膀胱外周血
- 用LABType SSO检测HLA-B分型与流式细胞分析技术检测HLA-B27结果的差别初探
- 目的：通过LABType SSO实验对HLA B进行分型,与流式细胞分析技术的结果作对比,以讨论HLA B27的值在cut off值附近时阴阳性的判读方法.方法：抽取本院门诊康复科、伤科、骨科及消化科的41例患者EDTA...
- 林佳菲
- 关键词：流式细胞术
