杨少锋
- 作品数：107 被引量：505H指数：12
- 供职机构：湖南中医药大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：湖南省自然科学基金国家自然科学基金湖南省教育厅科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生自动化与计算机技术更多>>
- 基于网络药理学和实验验证研究加味独活寄生合剂治疗腰椎间盘突出症的作用机制被引量：6
- 2023年
- 目的通过网络药理学预测加味独活寄生合剂治疗腰椎间盘突出症(lumbar disc herniation,LDH)的相关机制,并通过体外实验验证。方法应用TCMSP、BATMAN-TCM数据库检索加味独活寄生合剂组成药物的活性成分以及潜在靶点。通过GeneCards、OMIM数据库搜集LDH相关的疾病靶点,构建“药物-化合物-疾病靶标”网络模型,获取加味独活寄生合剂干预LDH的交集靶标。运用STRING数据库构建蛋白质-蛋白质相互作用(protein-protein interaction,PPI)网络获取核心靶点。使用R语言软件及Perl语言进行GO分析与KEGG通路分析获得可能的关键通路。提取原代终板软骨细胞,进行细胞形态学观察以及Ⅱ型胶原蛋白(CollagenⅡ)免疫荧光染色鉴定。将体外培养的第3代终板软骨细胞随机分成5组:空白对照组、模型对照组、加味独活寄生合剂低剂量组、加味独活寄生合剂中剂量组、加味独活寄生合剂高剂量组。其中后4组使用添加含有10 ng/mL的白细胞介素17(interleukin-17,IL-17)的DMEM培养基对细胞进行诱导退变造模。流式细胞技术检测各组细胞周期;ELISA检测各组细胞IL-6的含量;实时荧光定量PCR检测p-p65、MMP9 mRNA的表达;Western blot法检测p-p65、MMP9蛋白表达情况。结果网络药理学结果显示,根据ADME标准共筛选加味独活寄生汤19种药物共计295种活性成分,与LDH的疾病靶标相匹配得到交集靶标50个。通过PPI提取得到IL-6成为核心靶标可能性最大,GO分析和KEGG通路分析得到IL-17相关信号途径的富集因子较高。体外实验结果:相比于空白对照组,其他各组细胞生长情况明显受到抑制(P<0.05);相比于模型对照组,加味独活寄生合剂各组生长情况明显受到促进(P<0.05)。相比于空白对照组,模型对照组及加味独活寄生合剂各组IL-6、p-p65、MMP9表达显著升高(P<0.05);相比于模型对照组,加味独活寄生合剂各组IL-6、p-p65、MMP9表达显著降低(P<0.05)。�
- 蒋浩波段嘉豪刘恩旭陈茜李夏邵乐杨少锋张晓
- 关键词：网络药理学腰椎间盘突出
- 基于TLR4/NF-κB通路研究桃叶珊瑚苷联合ADSCs-exos对TBHP诱导的髓核细胞保护作用被引量：3
- 2023年
- 该文研究桃叶珊瑚苷(aucubin)协同脂肪间充干细胞外泌体(adipose-derived stem cells-exosomes,ADSCs-exos)对叔丁基过氧化氢(tert-butyl hydroperoxide,TBHP)诱导的人源髓核细胞(nucleus pulposus cells,NPCs)炎性损伤、衰老及凋亡的保护作用及机制。将TBHP诱导NPCs分为正常组、模型组、aucubin组、ADSCs-exos组及aucubin+ADSCs-exos组。细胞计数试剂-8(cell counting kit-8,CCK-8)检测细胞活力,EdU染色法检测细胞增殖,细胞染色-β-半乳糖苷酶活性染色方法(senescence-associated-β-galactosidase,SA-β-Gal)检测细胞衰老,流式细胞术检测细胞周期与凋亡,酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法检测白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)炎症因子的表达,实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)和蛋白免疫印记(Western blot)法检测聚集蛋白聚糖(aggrecan)、Ⅱ型胶原α1(collagen typeⅡalpha 1,COL2A1)、Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)及核因子-κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)的mRNA和蛋白表达情况。结果显示,与模型组比较,aucubin或ADSCs-exos组NPCs活性和增殖上升,G_(0)/G_(1)期细胞比例显著降低,S期细胞比例显著增加,凋亡减少,细胞衰老比例降低,IL-1β和TNF-α水平下降,TLR4和NF-κB mRNA及蛋白表达显著减少,IL-10水平上升,aggrecan和COL2A1 mRNA及蛋白表达均升高;与aucubin或ADSCs-exos单独处理组比较,aucubin+ADSCs-exos组NPCs活性和增殖进一步上升,G_(0)/G_(1)期细胞比例进一步降低,S期细胞比例进一步增加,凋亡水平和细胞衰老比例都进一步降低,IL-1β和TNF-α水平,TLR4及NF-κB mRNA和蛋白表达水平均进一步下降,而IL-10和aggrecan、COL2A1 mRNA及蛋白水平均进一步上升。综上所述,aucubin和ADSCs-exos均能通过抑制炎症反应,减少NPCs凋亡和衰老,促进细胞活性、增殖以及细胞外基质(ECM)的合成而发�
- 杨雷李兆勇马露郭彦涛杨少锋熊辉伍搏宇段嘉豪刘恩旭张超聂颖陈龙刘林券
- 关键词：髓核细胞桃叶珊瑚苷
- 桂枝新加汤对颈椎间盘退变大鼠模型椎间盘TNF-α及血清中炎症因子的影响
- 2024年
- 目的依据前期桂枝新加汤治疗颈椎病网络药理学研究结果,在动物实验中对桂枝新加汤治疗颈椎病的作用机制进行初步验证。方法前期网络药理学筛选出桂枝新加汤治疗颈椎病有关的磷脂酰肌醇4,5-二磷酸3-激酶催化亚基α(phosphatidylinositol 4,5-diphosphate 3-kinase catalytic subunitα,PIK3CA)、信号转导和转录激活因子3(signal transduction and transcription activator 3,STAT3)、肿瘤蛋白P53(tumor protein P53,TP53)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)、丝裂原激活蛋白激酶14(mitogen activated protein kinase 14,MAPK14)等主要作用靶点,涉及MAPK、磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol 3 kinase,PI3K)-蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)等多条与炎症调节相关通路。在动物实验中,采用动静力失衡法构建颈椎间盘退变大鼠模型,观察桂枝新加汤对模型大鼠疼痛阈值、椎间盘组织HE染色、椎间盘内TNF-α及外周血清TNF-α、P物质(substance P,SP)、前列腺素E_(2)(prostaglandin E_(2),PGE_(2))等炎症因子的影响,初步验证桂枝新加汤治疗颈椎病的作用机制。结果与模型组比较,桂枝新加汤干预颈椎间盘退变大鼠模型2、4、8周,降低外周血清PGE_(2)、SP、TNF-α含量(P<0.01);桂枝新加汤干预8周,能有效的降低颈椎间盘TNF-α水平(P<0.05)。结论桂枝新加汤能提高机械刺激疼痛阈值,降低颈椎间盘退变大鼠血清中SP、PGE_(2)、TNF-α及颈椎间盘内TNF-α表达,起到缓解颈椎病疼痛的作用,成功验证了网络药理学部分结果。
- 李兆勇杨雷郭彦涛陈龙李硕夫贺美宇张超杨少锋
- 关键词：桂枝新加汤网络药理学炎症因子
- 组织移植治疗脊髓损伤实验研究的进展
- 2001年
- 组织移植治疗脊髓损伤的实验研究近年来取得了一定进展 ,造模方法主要有Allen’s法 ,脊髓半切洞法 ,主要采用自体周围神经移植。
- 杨少锋姚共和
- 关键词：脊髓损伤
- 基于数据挖掘的产后腰痛中医古代文献方药研究被引量：1
- 2020年
- 目的:基于数据挖掘产后腰痛中医古代文献用药规律,为中医药治疗产后腰痛提供治疗思路。方法:检索《中华医典》,并从符合纳入标准方药中进行统计,运用SPSS 21.0软件对中药的频数、频率和聚类规则进行分析,SPSS Modeler软件进行关联规则分析。结果:选取符合统计要求的中药118味,共使用中药922次,其中当归、川芎、芍药等20味中药为高频用药。聚类分析结果:第一类为当归、芍药、桂心、川芎,为频次最多的4味中药。关联规则提升度最高的药对为独活-防风。结论:古代治疗产后腰痛善用补虚药,多与活血化瘀药、解表药配伍。
- 张晨阳吴肖男李兆勇聂颖杨少锋
- 关键词：产后腰痛数据挖掘用药规律
- 金刚健骨片调节去势大鼠整合素α_Ⅴβ_1、α_Ⅴβ_6表达水平的实验研究
- 2013年
- 目的:观察去势大鼠整合素表达水平,揭示补肾中药治疗骨质疏松症的作用机理。方法:10月龄雌性Wistar大鼠50只,随机分为5组:福善美组(FSM)、金刚健骨片组(JGJG)、骨松宝颗粒组(GSB)、模型组(MODEL)、假切组(SHAM)。假切组切除一段肠系膜,其余组均行卵巢摘除手术。饲养13周模型建立后,治疗组分别以相应药物连续给药13周,模型组及假切组以生理盐水替代。治疗结束后处死动物取出骨组织,进行骨密度测定、并利用免疫组化法测定整合素αⅤβ1及αⅤβ6表达水平。结果:骨密度测定结果显示,FSM组、JGJG组的股骨密度、整合素αⅤβ6均较MODEL组有明显提高,差异有统计学意义(P<0.05);FSM组、JGJG组及GSB组整合素αⅤβ1均明显低于MODEL组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:金刚健骨片能显著提高去势大鼠的股骨密度、整合素αⅤβ6的表达水平,并可降低整合素αⅤβ1的阳性表达率,从而干预成骨-破骨细胞偶联,达到治疗目的。
- 杨少锋向剑锋陈青邓博匡建军郭彦涛聂颖罗振华朱步奇
- 关键词：成骨细胞破骨细胞整合素偶联
- 腰椎退行性骨关节炎患者伴发Ⅰ型骨质疏松流行病学研究被引量：8
- 2009年
- 目的:调查腰椎骨关节炎患者并发Ⅰ型骨质疏松情况,探讨两者之间的发病关系。方法:调查湖南省长沙、湘潭、邵阳三地区323例腰椎骨关节炎患者的骨质疏松发病率、腰椎退行性骨关节炎并发Ⅰ型骨质疏松患者在人口学资料、临床学资料,采用频数分析、样本率的分析、指标(R型)聚类分析等方法进行分析。结果:腰椎退行性骨关节炎患者存在高比率的骨质疏松发病情况;进一步分析结果表明:骨质疏松对骨关节炎的程度、临床症状、骨密度、X线评分存在影响,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:腰椎骨关节炎患者中存在骨质疏松的高发病率,骨密度对骨关节炎的发病存在影响。骨质疏松的病理状态影响骨关节炎患者的临床症状。
- 刘新辉杨少锋何东姚共和罗振华
- 关键词：骨质疏松流行病学研究
- 阳和汤加减治疗膝骨关节炎临床回顾性研究被引量：6
- 2010年
- 刘存根彭再如杨少锋曹礼李少波
- 关键词：膝骨关节炎
- 经皮激光椎间盘减压术在椎间盘突出症中的应用被引量：2
- 2006年
- 罗振华姚共和郭彦涛杨少锋
- 关键词：经皮激光椎间盘减压术椎间盘突出症经皮椎间盘切除术化学溶核术DISC微创治疗
- 金刚健骨片对骨质疏松症去卵巢大鼠整合素αⅤβ_6受体水平调节作用的影响
- 2013年
- 目的:通过对去势大鼠整合素表达水平的观察,揭示金刚健骨片治疗骨质疏松症的作用机理。方法:将50只10月龄Wistar雌性大鼠随机分为5组:阿仑磷酸钠组、金刚健骨片组、骨松宝颗粒组、模型组、假手术组。治疗组及模型组行卵巢摘除术,假手术组切除相同重量的肠系膜。统一饲养13周造模成功后,治疗组分别以相应药物连续给药13周;模型组及假手术组以生理盐水替代。治疗结束后处死动物取出骨组织,进行骨密度测定,并利用免疫组化法测定整合素αⅤβ6表达水平。结果:治疗组的骨密度、整合素αⅤβ6均较模型组有明显提高,差异有统计学意义(P<0.05);金刚健骨片组与阿仑膦酸钠组对提高大鼠骨密度均高于骨松宝组(P<0.05),而两组比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗组的整合素αⅤβ6水平金刚健骨片组高于阿仑膦酸钠组及骨松宝组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:金刚健骨片能显著提高去势大鼠的骨密度、整合素αⅤβ6的表达水平,且较骨松宝颗粒疗效好,与阿仑磷酸钠治疗效果相当,为选出具有一定靶向性的治疗骨质疏松症的中药提供了新的思路。
- 杨少锋向剑锋陈青邓博匡建军郭彦涛聂颖罗振华
- 关键词：骨质疏松症
