李静 作品数:70 被引量:281 H指数:9 供职机构: 南京医科大学第二附属医院 更多>> 发文基金: 国家科技重大专项 湖北省自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 化学工程 更多>>
2013-2014年湖北省哨点医院A组轮状病毒G和P基因型遗传变异分析 被引量:3 2017年 人轮状病毒是引起婴幼儿腹泻最常见的病原体之一,轮状病毒广泛分布于世界各地。人轮状病毒分A、B、C三组,其中A群组轮状病毒(rotavirusA,RVA)是引起婴幼儿腹泻最主要的病原体,严重影响儿童的健康。轮状病毒于1973年由澳大利亚学者R.F.Bishop发现, 李静 官旭华 张婷 邢学森 赵耀儒 黄静 徐军强关键词:轮状病毒属 基因型 系统发育分析 手足口病配对标本病原学检测及流行病学特征分析 被引量:7 2019年 目的比较手足口病门诊患者疱疹液、咽拭液肠道病毒检出率及一致性,分析病例群流行病学特征。方法以准分层随机法抽取同人疱疹液和咽拭液配对标本451人份,用实时荧光定量逆转录多聚酶链反应检测柯萨奇病毒A组16型(coxsackievirus A group 16 strain,CVA16)、肠道病毒71型(enterovirus71,EV71)和总肠道病毒(Pan-enterovirus,EV)。统计分析用卡方检验、Kappa检验、秩和检验。结果疱疹液标本EV、CVA16、EV71阳性率为77.38%、39.47%、28.16%,咽拭液标本为64.97%、31.49%、26.39%,疱疹液检出率为高(χ^2值为39.20,24.92,3.06, P 值为0.000,0.000,0.077)。EV71、CVA16、EV检出一致性的Kappa检验K值为0.911,0.750,0.576, P<0.001,差异有统计学意义。疱疹液、咽拭液中EV、CVA16、EV71检出率顺序,与其Kappa检验K值顺序相反。病例星期分布性别比稳定,动态趋势一致但发病不均匀,呈以星期六为顶点并递降的峰形。结论手足口病门诊标本疱疹液优于咽拭液;病原检出率顺序与检出一致性K值顺序不一致;在一般流行病学特征下,手足口病发病星期分布可能不均并伴跨周单峰;2016年十堰市手足口病主要病原是 CVA16、EV71。 彭邦来 赵国兵 王喜云 赵长华 彭振桓 李静关键词:手足口病 肠道病毒71型 柯萨奇病毒A组16型 流行病学 镶嵌治疗小儿室间隔缺损的护理 目的:回顾镶嵌治疗小儿室间隔缺损的手术经过及护理实践.
方法:自2006年月1月于2008年9月,在经食管超声心动图(TEE)的辅助下,采用镶嵌手术治疗室间隔缺损24例,其中15例患儿经右室表面穿刺置入封堵器,... 罗志娟 王丽 李静 顾青 毛咏梅 杨玲慧关键词:小儿室间隔缺损 手术治疗 介入治疗 临床护理 文献传递 2012-2013年湖北省襄阳地区病毒性腹泻的病原学分析 被引量:4 2015年 目的了解湖北省病毒性腹泻的主要病原及其主要基因型别。方法采集襄阳市儿科腹泻门诊或住院患儿以及消化内科成人的粪便样本,采用逆转录PCR(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)方法检测轮状病毒、诺如病毒、星状病毒、札如病毒以及腺病毒,并对轮状病毒、诺如病毒和腺病毒进行基因分型和型别鉴定。结果湖北省襄阳地区收集的儿童和成人粪便样本217份中,病毒检测阳性率依次为轮状病毒A组24.88%、诺如病毒13.78%、星状病毒0.92%、腺病毒35.94%,未检测到B组和C组轮状病毒以及札如病毒,混合感染率10.60%。轮状病毒A组G型与P型组合依次为P[8]G9(57.45%),P[8]G3(34.04%),P[4]G9(4.26%),P[8]G2(2.13%),P[8]G4(2.13%)。诺如病毒的主要型别为GII.3型,同时检测到GII.4、GII.6、GII.12型以及GI.3型诺如病毒的感染。其中GII.4型主要与2012年、2013年澳大利亚株具有较高的同源性,系统发育分析发现其与2012年澳大利亚GII.4及其新变种GII.4Sydney株有较近的亲缘关系。腺病毒检测除发现肠道腺病毒Ad41型感染外,发现存在较多Ad31型感染,并同时检测到Ad1、2、5、7以及Ad55型腺病毒。结论湖北省襄阳地区病毒性腹泻的病原复杂,病原混合感染比例较大,轮状病毒主要流行株为P[8]G9,诺如病毒主要为GII.3型,腺病毒Ad31型以及其他呼吸道感染的腺病毒导致腹泻值得重视。 李静 李国明 张婷 徐军强 邢学森 吴杨 刘公平 蒋晓清 蒋嘉伟 占建波关键词:轮状病毒 诺如病毒 腺病毒 病毒性腹泻 病原分析 乙型脑炎减毒株SA14-14-2全长cDNA克隆感染性的研究 被引量:3 2010年 目的在获得乙型脑炎病毒(JEV)全长cDNA分子的基础上,建立感染性转录体,获得恢复病毒,为JEV致病机理、疫苗研制及分子病毒学研究提供方法。方法将全长JEV cDNA分子克隆入改造后的pBluescript KS I(I+)载体上,经T7启动子体外转录,在Lipofectamine2000介导下,将转录产物转染入BHK-21细胞,经RT-PCR、测序、间接免疫荧光试验及噬斑试验鉴定恢复病毒。结果转录产物转染BHK-21细胞后,观察到明显的细胞病变;收获恢复病毒,经RT-PCR、测序、间接免疫荧光试验及噬斑试验证实为JEV。结论已建立了JEV全长cDNA克隆经体外转录获得JEV感染性RNA的方法,为JEV分子生物学及疫苗研究等奠定了基础。 李静 俞永新 董关木 安祺 杨立宏 孔艳 景川关键词:日本乙型脑炎病毒 全长CDNA 体外转录 肾综合征出血热灭活疫苗毒株84Fli株的M和S基因核苷酸序列分析 2009年 目的对肾综合征出血热灭活疫苗毒株84Fli株的M和S基因进行核苷酸序列分析,了解该毒种的基因稳定性。方法根据汉坦病毒标准株设计特异的PCR引物,用RT-PCR技术分段扩增疫苗株84FLi株的M和S基因片段,PCR产物纯化后直接测序,并进行遗传进化分析。结果疫苗株84FLi株M基因片段的核苷酸序列与GenBank中收录的HTN型毒株的M基因核苷酸序列的同源性为83.5%~99.9%,而与SEO型毒株的同源性为70.2%~72.0%。其S基因与HTN型毒株的同源性为85.9%~99.6%,与SEO型毒株的同源性为69.4%~70.8%。疫苗株84FLi株的M和S基因的氨基酸序列与GenBank中收录的HTN型汉坦病毒84FLi株M和S基因的氨基酸序列的同源性分别为99.9%和99.5%。从遗传进化树上可以看出,疫苗株84FLi株与GenBank中收录的84FLi株位于一个独立的分支上,与其他HTN型病毒亚型分布于不同分支上,与其他HTN型病毒亚型亲缘关系较远。结论肾综合征出血热灭活疫苗毒株84FLi株M和S基因片段的核苷酸和氨基酸序列未发生较大变异,说明在传代过程中该疫苗株在基因水平上并未发生较大改变。 李静 孔艳 董关木 安祺 杨立宏 周荔葆 俞永新关键词:汉坦病毒 M基因 S基因 核苷酸序列 湖北地区季节性H1N1流感病毒NA和M基因特性分析 被引量:1 2012年 目的分析湖北省2000年以来甲型流感病毒株神经氨酸酶(NA)和M基因特性,以及耐药性位点的变异情况。方法从2000~2008年临床样品中分离毒株,运用RT-PCR扩增NA和M基因,对扩增片段进行序列测定,利用DNAStar软件与世界卫生组织推荐的流感疫苗毒株进行同源性比较,对NA和M基因重要功能性位点和耐药性位点进行分析,利用Mega软件进化分析。结果2000~2008年临床样品流感病毒分离株的NA和M基因与同年疫苗株相应基因的同源性分别为96.6%~99.7%和96.6%~99.6%,分离株NA基因中潜在的抗原性位点和糖基化位点与2000~2008年疫苗株基本相同,与2009年疫苗株有一定差异。NA基因未发生耐药性突变,但M基因在2005年以后的分离株中发生了S→N突变。NA和M基因进化分析表明不同年份分离株呈现出不同的亲缘关系。结论湖北省季节性甲型H1N1流感病毒分离株与2000~2008年世界卫生组织推荐的疫苗毒株有高度同源性,但与2009年疫苗株有所不同,未出现达菲类药物抗药性位点的核苷酸突变,但2005年后的分离株在M基因上均发生金刚烷胺类耐药性突变。NA和M基因进化树中可以看到甲型H1N1流感病毒进化关系在时间(年)上具有聚集性。 李静 方斌 刘琳琳 叶国军 邓渠 霍细香关键词:甲型流感病毒 疫苗株 神经氨酸酶 基质蛋白 RP-HPLC方法测定猪苓中麦角甾醇的含量 目的:建立猪苓药材中麦角甾醇的RP-HPLC含量测定方法。方法:猪苓经甲醇超声提取后,用HPLC测定。采用Diamosil C(250min×4.6mm,5μm)色谱柱,流动相为100%甲醇;流速为1.0 mL·min;... 赵英永 李静 王银红 赵晔 林瑞超 孙文基关键词:猪苓 麦角甾醇 RP-HPLC 文献传递 中国黄热疫苗减毒株和世界卫生组织黄热疫苗标准株基因全序列分析 被引量:4 2009年 目的研究中国黄热疫苗生产用减毒株与世界卫生组织(WHO)黄热疫苗标准株的基因序列,了解其核苷酸序列变异程度,和与其相关的氨基酸是否发生突变。方法根据基因库(GenBank)中收录的黄热病毒(Yellow Fever Virus,YFV)17D序列设计引物,提取该两株YFV的核酸,逆转录后进行聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)扩增病毒各部分基因片段,PCR产物纯化后直接测序,5'和3'端TA克隆后进行测序,然后进行遗传进化分析。经核苷酸序列测定进行序列比对分析。结果经序列测定后,进行两株YFV的序列比对,并与GenBank中收录的其它相关YFV17D疫苗株和野毒株进行序列比对,发现中国黄热疫苗生产株与WHO黄热疫苗标准株间的核苷酸序列并未发生较大变异,核苷酸和氨基酸的同源性分别约为99%和99%。其重要病毒抗原E蛋白也未发生较大突变,但发现E区与毒力密切相关的173位氨基酸发生回复突变,进一步通过系统发生分析说明两者亲缘关系十分接近。结论传代过程中,中国黄热疫苗株和WHO黄热疫苗标准株在基因水平上除个别外未发生较大改变,其基因组具有一定的稳定性。 李静 俞永新 董关木 孔艳 安祺 杨立宏关键词:黄热病毒 突变 2012—2015年湖北省麻疹病毒基因测定分析 被引量:3 2017年 目的通过对2012—2015年湖北省麻疹病毒流行株的基因型别和特征进行分析,了解湖北省麻疹病毒流行株基因特点,为制定消除麻疹策略提供依据。方法选取2012—2015年湖北省麻疹病例咽拭子标本126份,提取病毒核酸,对其中86份核酸阳性标本通过RT-PCR扩增麻疹病毒N基因并进行序列测定,对病毒基因型别进行分析。结果通过基因测序定型发现2012—2015年湖北省麻疹病毒基因型主要为H1a亚型,仅发现一例D8亚型,2例麻疹病毒疫苗株A基因。结论2012—2015年湖北省麻疹病毒主要为H1a基因亚型,首次发现一例麻疹D8基因亚型,存在少数疫苗相关病例。建议进一步加强麻疹病毒基因型别监测,实时了解全省麻疹病毒基因型别变化特征,为中国消除麻疹行动计划提供科学依据。 占建波 杨朝晖 占发先 李静关键词:麻疹 麻疹病毒 基因型别