李孜
- 作品数:2 被引量:0H指数:0
- 供职机构:中国药科大学生命科学与技术学院更多>>
- 发文基金:北京市科委基金更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- 重组人VEGF_(165)的表达纯化及单抗的初步筛选
- 2011年
- 血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)是抑制肿瘤生长和转移的重要靶点。为获得抗VEGF单抗细胞株,构建了rhVEGF165工程菌,并利用复合自动诱导获得高效表达。经纯化获得高纯度rhVEGF165蛋白,经检测具有促人脐静脉内皮细胞(human umbilicalvein endothelial cells,HUVECs)增殖活性,其EC50为2.4ng/ml。免疫小鼠,获得了3株能稳定分泌抗VEGF单抗的杂交瘤细胞株,为开发VEGF治疗性单抗提供了重要基础。
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- 关键词:血管内皮细胞生长因子原核表达增殖活性
- OAS1蛋白单克隆抗体的制备及其表征
- 2011年
- 目的:用OAS1蛋白免疫小鼠,获得OAS1特异性单克隆抗体,为OAS1的含量测定提供基础。方法:通过全基因合成的方法获得目的基因序列,转化大肠杆菌BL21细胞诱导His-OAS1及OAS1蛋白表达,纯化后用作抗原免疫小鼠,取脾融合,筛选稳定分泌抗体的阳性细胞株,制备并纯化单抗,通过SDS-PAGE,ELISA,Western blot等方法进行检测。结果:体外高效表达OAS1蛋白,并成功制备特异性单克隆抗体,效价在5×10-11mol/L以上,亲和常数为3.37×108 L.mol-1。结论:获得高亲和力OAS1单克隆抗体,为其含量的检测奠定了基础。
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- 关键词:细胞融合单克隆抗体