曾思遥
- 作品数:5 被引量:8H指数:2
- 供职机构:华南农业大学更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 猪圆环病毒2型TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立被引量:6
- 2012年
- 本研究以猪圆环病毒2型(PCV2)核衣壳蛋白ORF2基因为目的基因,设计合成特异性引物和探针。PCR扩增得到目的基因,并克隆到pMD18-T载体,筛选得到标准阳性质粒。通过对荧光定量PCR反应条件的优化,建立了PCV2的TaqMan实时荧光定量PCR检测方法。试验结果表明,该方法特异性强,对猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)等猪常见病原的检测结果均为阴性;与普通PCR方法相比,其敏感性高出100倍,可达100拷贝/μL;对临床样品的检测证明,该方法可有效检测出淋巴结、肺脏等组织中的PCV2。
- 曾思遥张淑琼余绍华唐志玲陈瑞爱罗满林
- 关键词:猪圆环病毒2型荧光定量PCRTAQMAN探针
- rAd-ORF2-γ-IFN重组腺病毒灭活疫苗的制备与免疫效果研究
- 猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type2,PCV2)主要引起断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)、猪皮炎与肾病综合征(PDNS)、猪呼吸道疾病综合征(PRDC)、猪先天性震颤(CT)、母猪繁殖障碍...
- 曾思遥
- 关键词:猪圆环病毒2型疫苗制备免疫保护
- 犬IFN-α优化基因的真核表达及抗病毒活性的研究被引量:2
- 2012年
- 本研究根据酵母系统密码子的偏嗜性,对成熟蛋白基因核苷酸序列进行密码子偏嗜性改造,利用毕赤酵母分泌型表达载体pPICZαC来表达犬IFN-α成熟蛋白基因。并采用非洲绿猴肾细胞(Vero)-水疱性口炎病毒(VSV)系统以细胞病变抑制法为基础来测定重组犬α干扰素的效价,同样方法测定了表达产物对PRV和CDV的抑制作用。本试验实现了犬α干扰素在酵母中的高表达,表达量高达58 mg/L,SDS-PAGE检测大小约为24 ku,比预测分子质量大,推测发生了糖基化。表达产物具有较强的种属特异性,在Vero细胞上对PRV具有较高的抗病毒活性,达到了3.6×107U/L,对CDV也有很好的抑制作用。本研究为犬IFN-α以后的临床应用研究奠定基础。
- 张淑琼高娟曾思遥蒋再学陈瑞爱罗满林
- 关键词:酵母表达抗病毒活性
- TaqMan实时荧光定量PCR检测PCV2方法的建立
- 本研究以猪圆环病毒2型(PCV2)核衣壳蛋白ORF2为目的基因,设计合成特异性引物和探针。PCR扩增得到目的基因,并克隆到pMD18-T载体,筛选得到标准阳性质粒。通过对荧光定量PCR反应条件的优化,建立了实时TaqMa...
- 曾思遥张淑琼余绍华唐志玲陈瑞爱罗满林
- 关键词:猪圆环病毒2型荧光定量PCRTAQMAN探针
- 文献传递
- 犬IFN-α优化基因的真核表达及抗病毒活性的研究
- 本研究利用毕赤酵母分泌型表达载体pPICZαC来表达犬IFN-α成熟蛋白基因,同时根据酵母系统密码子的偏嗜性,对成熟蛋白基因核苷酸序列进行密码子偏嗜性改造。并采用非洲绿猴肾细胞(Vero)-水疱性口炎病毒(VSV)系统以...
- 张淑琼曾思遥高娟陈瑞爱罗满林
- 关键词:酵母表达抗病毒活性
- 文献传递