徐双兵
- 作品数：6 被引量：8H指数：2
- 供职机构：中山大学肿瘤防治中心华南肿瘤学国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 新基因hSSB1逆转录病毒载体的构建、鉴定和稳定株的筛选被引量：1
- 2012年
- hSSB1(Human Single-strand DNA-binding protein)是参与细胞DNA损伤应答的一个重要信号分子。根据GenBank提供的hSSB1基因序列扩增其cDNA序列,插入到pBABE逆转录病毒载体中,连接后的质粒转化后经过双酶切,PCR扩增及测序来鉴定pBABE-hSSB1阳性克隆。将阳性表达的pBABE-hSSB1和包装质粒转染到HEK293T细胞中,产生病毒液。将包装好的病毒感染细胞并用嘌呤霉素(puromycin)筛选稳定表达hSSB1的细胞株。重组pBABE-hSSB1质粒经双酶切,PCR扩增鉴定及DNA测序分析等方法证实克隆成功。Western blotting检测发现转染重组质粒pBABE-hSSB1的细胞株中hSSB1蛋白的表达水平高于对照组。该研究成功构建了针对hSSB1基因的逆转录病毒载体(pBABE-hSSB1),并得到了稳定高表达hSSB1的细胞株,为深入研究其功能奠定了基础。
- 张如华徐双兵武远众康铁邦
- 关键词：病毒载体
- 细胞周期调控与肿瘤靶向治疗
- 1)发现：Cdc25A可被GSK-3B磷酸化而降解的新机制,率先阐明GSK-3B失活是Cdc25A在肿瘤中高表达的原因之一(第一作者,Cancer Cell 2008),对目前正在进行以Cdc25A和GSK-3B为肿瘤治...
- 洪健唐清连徐双兵胡开顺谢显彪沈靖南元云飞曾益新康铁邦
- 关键词：细胞周期CHK1肿瘤靶向治疗
- 结直肠癌细胞IL-4/Stat6信号传导活性与调节基因差异性表达相关性研究被引量：4
- 2007年
- 目的:IL-4介导的Stat6信号传导活性在人细胞之间有差异,称为Stat6活化表型。旨在探讨Stat6活化表型及其产生的分子学基础。方法:结直肠癌细胞株HT-29与Caco-2的Stat6活化表型用EMSA半定量法测定。Stat6通路调节因子基因水平的表达用RT-PCR法检测。蛋白水平的表达用Western blotting法检测。结果:EMSA分析表明,HT-29为高活化表型(Stat6high)而Caco-2为零活化表型(Stat6null)。RT-PCR分析显示,与Stat6highHT-29比较,Stat6nullCaco-2癌细胞高表达负调节基因SOCS1和SHP1,而低表达正调节因子PP2A催化亚单位编码基因PP2CA和PP2CB。Westernblotting分析法证实Caco-2癌细胞高表达SOCS1和SHP1蛋白。结论:Stat6通路正、负调节基因的表达失衡可能是产生不同Stat6活化表型的分子机制之一。
- 李品东袁琴杨贤子李本辉刘晓洪张燕徐双兵袁佳陈婷张文杰
- 关键词：结直肠肿瘤基因表达信号传导
- 细胞周期调控与肿瘤靶向治疗
- 1)发现:Cdc25A可被GSK-3B磷酸化而降解的新机制,率先阐明GSK-3B失活是Cdc25A在肿瘤中高表达的原因之一(第一作者,Cancer Cell 2008),对目前正在进行以Cdc25A和GSK-3B为肿瘤治...
- 洪健唐清连徐双兵胡开顺谢显彪沈靖南元云飞曾益新康铁邦
- 关键词：细胞周期CHK1肿瘤靶向治疗
- 文献传递
- 幽门螺杆菌尿素酶基因的克隆及表达被引量：3
- 2010年
- 目的构建幽门螺杆菌尿素酶基因B亚单位(ureB)的原核表达质粒,诱导重组蛋白表达。方法以幽门螺杆菌基因组DNA为模板,PCR扩增尿素酶基因B亚单位,扩增产物经琼脂糖凝胶电泳分离后连接克隆载体并测序,构建重组原核表达载体。结果成功扩增出1710bp的目的基因,测序结果证实与预期一致,该基因在大肠杆菌表达系统中得到表达。结论在大肠杆菌中成功表达幽门螺杆菌尿素酶基因B亚单位蛋白,为幽门螺杆菌疫苗的研发奠定了基础。
- 张如华徐双兵胡开顺康铁邦
- 关键词：幽门螺杆菌尿素酶基因克隆
- IL-4/Stat6活性与细胞周期调控和癌转移相关基因的差异性表达
- 2012年
- IL-4诱导的Stat6活化水平在细胞之间差异很大,已发现这种差异与肿瘤细胞增殖、凋亡和侵袭转移力相关。本课题旨在探讨Stat6活化水平与细胞周期调控基因以及癌转移相关基因表达水平之间的相关性并试图解释这种相关性与癌细胞行为的关联。运用半定量RT-PCR法检测细胞周期调控基因CDK4、CDKN2A、CDKN1B、CD-KN1A的方法,以及转移相关基因CD44v6、S100A4、CXCR4、NM23分别在结肠癌细胞系Caco-2(Stat6null表型)、HT-29(Stat6high表型)中的表达水平。显示,结果细胞周期依赖性激酶CDK4,促转移基因CD44v6、S100A4在Stat6high表型的HT-29细胞表达较高的mRNA;而周期抑制基因CDKN2A、CDKN1B、CDKN1A,以及转移抑制基因NM23则在Caco-2(Stat6null表型)细胞表达较高的mRNA,上述差异均有统计学意义(P<0.05)。CXCR4mR-NA表达水平在两株细胞间无统计学差异。由此可知,携带高活化表型Stat6high的癌细胞(HT-29),其细胞周期抑制基因、转移抑制基因表达降低;而细胞周期正向调节基因、促转移基因表达增高。这种基因表达的变化可能对癌细胞的生长、侵袭和转移有利,提示Stat6的活化状态在癌症的发展和预后上可能具有标志物意义。
- 马志萍袁佳张燕李本辉徐双兵刘晓洪李锋张文杰
- 关键词：STAT6细胞周期
