徐卓菲
- 作品数：31 被引量：42H指数：4
- 供职机构：华中农业大学生命科学技术学院农业微生物学国家重点实验室更多>>
- 发文基金：湖北省科技攻关计划国家高技术研究发展计划国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- H1亚型猪流感病毒HA蛋白在猪血清中的抗原性比较
- 猪流感(swine Influenza,SI)是由A型流感病毒所引起的猪的一种急性、高度传染性呼吸道疾病。本文分别克隆表达国内分离H1亚型猪流感病毒和人工合成北美甲型H1N1流感病毒基因组序列的HA，HA表达产物通过We...
- 赵刚康超郭学波张安定徐卓菲周红波金梅林
- 关键词：猪流感甲型H1N1流感病毒HA蛋白血清检测
- 文献传递
- H1亚型猪流感病毒HA蛋白在猪血清中的抗原性比较
- 猪流感(swine Influenza,SI)是由A型流感病毒所引起的猪的一种急性、高度传染性呼吸道疾病。临床特点为急性发热,传播迅速,发病率高,死亡率低,并且易继发感染其他病症,导致病情加剧和死亡,是危害养猪业的重要疾...
- 赵刚康超郭学波张安定徐卓菲周红波金梅林
- 文献传递
- CSFV猪瘟病毒NS3非结构蛋白结构模型的建立
- 黄病毒科家族分为三个病毒属:黄病毒属、丙型肝炎病毒属和瘟病毒属,其中前两个病毒属里包括了一些主要的人类病原体,后一个属为动物的病原体。该科的 NS3蛋白是一个非常重要的多功能非结构蛋白,具有三种酶的活性,前三分之一区域 ...
- 徐卓菲司有辉何雁南晁彦杰钱平陈焕春
- 文献传递
- 口蹄疫病毒VP1-3免疫表位基因与猪γ-干扰素基因的融合表达
- 将人工合成的口蹄疫病毒VP1-3上的抗原表位基因和猪γ-干扰素基因串联入原核表达载体pGEX-KG中,经酶切鉴定及序列测序表明重组载体中二者以接头融合的形式构建成重组表达质粒。将该质粒转化BL21后经IPTG诱导,实现了...
- 姚清侠钱平曹毅徐卓菲何雁南司有辉陈焕春
- 关键词：口蹄疫病毒抗原表位猪Γ-干扰素
- 文献传递
- 猪瘟弱毒C81株全基因组测序及分子结构预测
- 2005年
- 参照已发表的猪瘟病毒弱毒株的序列,设计7对覆盖全长基因组的引物,通过RT-PCR从感染猪瘟病毒弱毒株的PK-15细胞中扩增得到7个cDNA片段,分别克隆到pMD18-T载体并测序,利用DNASIS软件获得猪瘟病毒C81株全基因组序列(GenBank:AY663656).C81株基因组全长12310nt,只有一个大的开放阅读框,编码3898个氨基酸的聚蛋白.序列分析表明,C81株开放阅读框与其它各毒株核苷酸和氨基酸序列的同源性变化较大,分别为84.4%～99.6%和91.6%～99.4%.同时,我们绘制了26株CSFV ORF的进化树,比较了CSFV 5'非翻译区核苷酸序列并推测其二级结构,发现不同毒株之间存在较大的差异,另外对C81株聚蛋白的功能域和三维结构进行了预测.
- 徐卓菲钱平李祥敏郭东春姚清侠陈焕春
- 关键词：猪瘟病毒同源建模
- 多杀性巴氏杆菌HN06基因组分泌蛋白的预测与分析被引量：4
- 2015年
- 预测分析多杀性巴氏杆菌HN06株的分泌蛋白并筛选多株巴氏杆菌共有Sec途径分泌蛋白,为研究多杀性巴氏杆菌亚单位疫苗候选蛋白奠定基础。利用Signal P、Tmhmm、Phobius、Target P、Lipop、GPI-SOM、Tat P、SecretomeP对已完成全基因组测序的多杀性巴氏杆菌HN06株进行分泌蛋白预测及功能分析,并结合已公布全基因组序列的多杀性巴氏杆菌Pm70、3480、36950的基因组序列筛选4株多杀性巴氏杆菌中共有的Sec途径分泌蛋白。结果表明,预测出HN06株分泌蛋白共373个,其中Sec分泌蛋白157个,Tat途径分泌蛋白8个,无信号肽的非经典途径分泌蛋白208个。Sec分泌蛋白中被Ⅰ型信号肽酶识别的有120个,被Ⅱ型信号肽酶识别的有37个。再对Pm70、3480、36950株进行Sec途径分泌蛋白的预测,使用blastp筛选它们共有的Sec蛋白114个。经过统计发现,多杀性巴氏杆菌HN06株不同类型分泌蛋白的功能分布各有侧重,其中ABC转运蛋白和铁摄取相关蛋白对于巴氏杆菌毒力因子的研究具有很重要的意义。因此,对分泌蛋白的深入分析对于更清晰地了解巴氏杆菌的致病机制及筛选免疫原性蛋白具有重要意义。
- 彭忠梁婉刘文静徐卓菲谭臣吴斌周锐陈焕春
- 关键词：多杀性巴氏杆菌分泌蛋白
- 巴氏杆菌基因组测序研究进展
- 巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm)是一种人兽共患病原微生物,其可对多种畜禽及人具有一定的致病性,该菌在世界范围内广泛存在并传播流行,造成严重的经济损失.2001年巴氏杆菌Pm70株全基因组序列首...
- 梁婉彭忠吴斌刘文静徐卓菲周锐陈焕春
- 关键词：巴氏杆菌全基因组序列基因组学比较基因组学
- 猪瘟病毒非结构蛋白NS2基因不同片段的克隆及在原核系统中的高效表达
- 参照猪瘟病毒兔化弱毒疫苗株(HCLV)的基因组序列,设计并合成一组引物。从已构建含有猪瘟病毒兔化弱毒株全基因组质粒pMCfT1-6中分别扩增出NS2长1389bp和876bp的片段。将扩增的不同长度的NS2基因序列克隆至...
- 郭东春钱平李祥敏徐卓菲姚清侠金梅林陈焕春
- 关键词：猪瘟病毒NS2基因原核表达
- 文献传递
- 猪β-干扰素在毕赤酵母中的分泌表达及其活性被引量：8
- 2007年
- 为了高效表达分泌型的猪β-干扰素,将去除信号肽的编码梅山猪β-干扰素成熟多肽基因（mPoIFNβ）插入酵母-大肠杆菌穿梭载体pPIC9K,构建成分泌型重组表达载体pPIC9K-mPoIFNβ。将以SalⅠ线性化的pPIC9K-mPoIFNβ用化学方法（LiCl）,与鲑鱼精DNA（ssDNA）共转化入毕赤酵母菌株GS115,转化子经MD平板筛选和PCR鉴定后获得阳性菌株,再经高浓度G418筛选到多拷贝菌株。以1%甲醇连续诱导4 d,SDS-PAGE和Western blot检测结果表明：表达产物为22 ku和26 ku的混合物,在GS115中的表达量约为80 mg/L,占分泌型总蛋白的29.4%-30.8%,表明猪β-干扰素基因在毕赤酵母中获得了高效分泌表达。对表达产物进行理化分析发现,重组酵母菌表达的蛋白耐酸（pH2）,对热（56℃）部分敏感,并能被特异性的抗猪β-干扰素抗体中和而不与抗猪γ-干扰素抗体反应。以细胞病变抑制法（CPE50）测定干扰素抗病毒活性,在MDBK（牛肾细胞系）中表达的猪β-干扰素的抗VSV比活性达到2.0×10^6U/mg;对口蹄疫病毒在IBRS-2细胞中的增殖也有明显的抑制作用。
- 姚清侠曹毅钱平徐卓菲何雁南司有辉陈焕春
- 关键词：毕赤酵母分泌表达抗病毒活性口蹄疫病毒
- 表达口蹄疫病毒P1基因的重组伪狂犬病病毒TK^-/gG^-/PgG-P1的构建被引量：3
- 2004年
- 为了构建口蹄疫与伪狂犬病二价基因工程疫苗株 ,将口蹄疫病毒 (FMDV) P1基因插入到伪狂犬病病毒 (PRV)通用载体 p Pg G- uni中 ,得到 PRV转移载体 p Pg G- P1。将转移载体与 Eco R 线性化后的 PRV弱毒疫苗株 TK- /g G- / lac Z+ 基因组 DNA共转染 PK- 15细胞 ,转染产物经多次空斑纯化和 PCR鉴定 ,获得了纯化的重组 PRV TK- /g G- / Pg G- P1,重组病毒基因组 DNA经酶切鉴定进一步表明 ,FMDV的 P1基因已成功地整合到 PRV弱毒疫苗株的基因组中。Western blot试验表明 ,FMDV P1基因在重组 PRV中得到表达。
- 金梅林李祥敏钱平郭东春徐卓菲陈焕春
- 关键词：基因表达口蹄疫病毒P1基因基因重组伪狂犬病病毒
