- 高效表达rhBMP2的CHO细胞株及其建立方法
- 本发明涉及构建一种可以高效表达外源rhBMP2的CHO细胞株。主要是利用二氢叶酸还原酶缺陷型中华仓鼠卵巢细胞(CHO-dhfr<Sup>-</Sup>)作为宿主细胞,稳定转染外源的hBMP2质粒,经药物抗性筛选和基因扩增...
- 朱天慧张道永闫继东杨爽
- 文献传递
- 高效表达rhBMP2的CHO细胞株及其建立方法
- 本发明涉及构建一种可以高效表达外源rhBMP2的CHO细胞株。主要是利用二氢叶酸还原酶缺陷型中华仓鼠卵巢细胞(CHO-dhfr<Sup>-</Sup>)作为宿主细胞,稳定转染外源的hBMP2质粒,经药物抗性筛选和基因扩增...
- 朱天慧张道永闫继东杨爽
- 文献传递
- 重组人骨形态发生蛋白2在CHO细胞中的表达、鉴定及活性分析被引量:9
- 2006年
- 构建真核表达载体pCDNA3.1(+)-hBMP-2,与质粒pSV2-dhfr共转染CHO-dhfr-细胞,以含有700μg/mLG418的IMDM进行选择性培养,筛选抗性克隆,并用MTX扩增,提高rhBMP-2的表达量。收集的rhBMP-2蛋白进行Westernblot检测,还原蛋白样品电泳产生一条大小约为18kD的特异性条带,非还原蛋白样品电泳产生一条大小约为30kD的特异性条带,提示表达的rhBMP-2是经过糖基化修饰的,且以同源二聚体形式分泌表达。单细胞分离培养得到14株rCHO(hBMP-2)单克隆细胞株,ELISA法检测rhBMP-2表达水平,最高可达7.83μg/24h/106cells。活性分析结果表明,表达的rhBMP-2具有很强的生物学活性。
- 张道永杨爽吕树军闫继东朱天慧
- 关键词:人骨形态发生蛋白2CHO共转染C2C12
- 重组hBMP-2在CHO细胞中的表达、鉴定及活性分析
- BMPs(BMP)属于转化生长因子(TGF)-β超家族,BMPs最早是从骨中提取得到,能够在体内诱导异位骨和软骨形成,迄今为止,已经有40多个BMPs基因相继被克隆。许多BMPs的体外(in vitro)和体内(in v...
- 张道永
- 关键词:真核表达载体生物学活性骨形态发生蛋白