张犁苹
- 作品数:14 被引量:77H指数:6
- 供职机构:西北农林科技大学动物科技学院更多>>
- 发文基金:公益性行业(农业)科研专项陕西省重大科技创新专项计划项目转基因生物新品种培育专项更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 西农萨能奶山羊INSIG-1编码区的克隆、序列特征分析和组织表达被引量:8
- 2013年
- 【目的】克隆西农萨能奶山羊胰岛素诱导基因1(INSIG-1)编码区,并对其进行序列特征分析和组织表达规律研究。【方法】提取西农萨能奶山羊总RNA,反转录cDNA后进行PCR反应,对克隆得到的INSIG-1序列进行生物信息学分析。用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测INSIG-1在皮下脂肪、胸部肌肉、乳腺、肝脏、肾脏、心脏、肺、脾脏、瘤胃、小肠10个组织中的表达情况。【结果】获得西农萨能奶山羊INSIG-1基因1 014bp序列(Gen-Bank登录号JQ665439),其中编码区序列长度为831bp,编码276个氨基酸。西农萨能奶山羊INSIG-1编码区与牛(GenBank登录号NM_001077909)的亲缘关系最近,相似性达97%,编码氨基酸序列的相似性达90%,而与小鼠(GenBank登录号NM_025836)的亲缘关系较远。预测INSIG-1蛋白质分子量为29.70ku,理论等电点为8.99;IN-SIG-1蛋白质具有5个跨膜螺旋结构,且有较强的疏水性,不含信号肽。RT-qPCR检测结果表明,在西农萨能奶山羊10个组织中INSIG-1均有表达,其中在肝脏中的相对表达量最高,皮下脂肪、胸部肌肉、肺次之,在心脏中的相对表达量最低。【结论】克隆得到了西农萨能奶山羊的INSIG-1基因,并探明了其组织表达规律。
- 王慧罗军胡仕良席利萌张犁苹李芳孙雨婷
- 关键词:西农萨能奶山羊实时荧光定量PCR
- miR-200a对奶山羊乳腺上皮细胞乳脂合成相关基因mRNA表达的影响被引量:10
- 2012年
- 旨在构建pAd-pri-miR-200a重组腺病毒,使其在奶山羊乳腺上皮细胞中稳定表达miR-200a,研究miR-200a对乳脂合成相关基因mRNA表达的影响。以西农萨能羊DNA为模板扩增pri-miR-200a。采用Ad-Easy系统构建重组腺病毒载体pAd-pri-miR-200a,并于HEK 293细胞株中进行病毒的包装、扩繁。TCI50法测定病毒滴度。qRT-PCR检测miR-200a及16个乳脂合成相关基因mRNA表达水平。序列分析结果显示,pri-miR-200a包括pre-miR-200a86bp和侧翼序列共297bp。酶切结果证实pAd-pri-miR-200a构建成功。Ad-pri-miR-200a滴度达8×109 PFU.mL-1。实时定量结果表明,Ad-pri-miR-200a(MOI为200)感染奶山羊乳腺上皮细胞72h,miR-200a的表达量较对照高出2.4倍。同时miR-200a的过表达引起10个基因mRNA表达量下调,6个基因mRNA表达量上调。其中脂肪酸从头合成相关基因FASN、脂滴生成相关基因TIP47及脂肪酸运输相关基因FABP4降幅较大,分别下降了0.47、0.89及0.65倍。而TAG生成相关基因DGAT1和脂解相关基因HSL较对照分别增加了0.52和1.49倍。本研究获得的重组腺病毒Ad-pri-miR-200a能在山羊乳腺上皮细胞中稳定表达miR-200a,同时miR-200a过表达影响乳脂合成相关基因mRNA表达水平。
- 林先滋罗军张犁苹朱江江石恒波苟德明
- 关键词:重组腺病毒乳腺上皮细胞
- 不同蛋白水平日粮对西农萨能羊公羔肥育性能的影响被引量:13
- 2013年
- 本研究旨在探讨不同蛋白水平日粮对西农萨能羊公羔肥育性能的影响。选择21只健康、体重相近的6月龄西农萨能羊公羔,随机分为3组,分别饲喂蛋白水平为19.5%、16.0%、13.4%的日粮。试验为期50 d,测定试验羊的体重、体尺、血液生化指标、屠宰性能和羊肉品质。结果显示:高蛋白组试验羊体重、日增重、胸围、体斜长最大,料重比最小(P>0.05);血浆中总蛋白、白蛋白、球蛋白、总胆固醇含量高于中、低蛋白组(P>0.05);屠宰率、净肉重、肉骨比、眼肌面积具有最大值(P>0.05);羊肉失水率最低(P>0.05)、嫩度最好(P<0.05)。经综合评定,19.5%蛋白水平日粮更有利于西农萨能羊公羔短期育肥。
- 孙爽罗军王维吴敏王慧席利萌张犁苹
- 关键词:育肥血液生化指标屠宰性能
- 不同能量蛋白水平日粮对妊娠后期西农萨能羊生产性能和血液生化指标的影响被引量:10
- 2013年
- 本试验旨在研究不同能量蛋白水平日粮对妊娠后期西农萨能羊生产性能和血液生化指标的影响,以筛选出妊娠后期母羊最适的营养水平。试验采用2×2两因子完全随机区组试验设计,将60只处于妊娠期90 d、体重(60±2.4)kg的经产母羊随机分成4组,每组15个重复。日粮干物质蛋白水平分别设为14%、16%;能量水平分别为12.2 MJ/kg.DM和13.3 MJ/kg.DM。结果显示,试验母羊血浆总蛋白和尿素氮含量均与粗蛋白摄入量成正比,血浆白蛋白的含量则与之相反(P>0.05)。低蛋白高能量(14%、13.3 MJ/kg.DM)试验组的母羊具有较高产羔率(227%)、成活率(94.118%),该组母羊所产羔羊具有最大平均初生重(4.10±0.14)kg该试验组初乳具有较高乳总干物质(21.73%)、乳脂(7.71%)和乳蛋白含量(9.30%)(P>0.05),较低的乳糖含量(P<0.05)。试验表明,蛋白、能量水平分别为14%、13.3 MJ/kg.DM的日粮为妊娠后期西农萨能母羊最优的日粮组合。
- 王慧王玉红魏安民胡仕良席利萌孙爽张犁苹罗军
- 关键词:妊娠后期能量蛋白水平
- MiR-200a对奶山羊乳腺上皮细胞脂代谢的调控作用研究
- MicroRNAs(miRNAs)是脂类代谢的重要调控因子。MiR-200家族与脂肪酸代谢密切相关,然而,关于miR-200家族调控山羊乳腺脂肪酸代谢的研究报道较少,尚无miR-200家族在山羊乳腺组织中表达检测及功能研...
- 张犁苹
- 关键词:抑制剂奶山羊乳腺上皮细胞
- 文献传递
- 不同蛋白水平对西农萨能羊泌乳性能的影响被引量:3
- 2012年
- 本试验旨在探求西农萨能羊饲料中最合适的蛋白水平,以充分发挥奶山羊的泌乳性能、提高山羊的奶品质。试验采用单因素试验设计,选择处于泌乳盛期体重、胎次、泌乳量接近的健康西农萨能羊,随机分成3组,每组11只。固定能量水平为12.51 MJ/kgDM,蛋白水平分别为10%、14%和18%。试验期共100 d,预试期10 d,正试期90 d。结果表明:随着试验的进行,各组产奶量呈下降趋势,10%蛋白水平组下降幅度最大,14%蛋白组次之,18%蛋白组下降幅度最小;各试验组乳成分分析表明,18%蛋白组中乳脂、乳糖和全脂固形物降低幅度最明显,10%蛋白组降低幅度次之,14%蛋白组降低幅度最小。本试验中同等能量水平,不同蛋白水平对奶山羊产奶量和乳成分影响差异不显著(P>0.05)。
- 张犁苹罗军王慧朱江江石恒波
- 关键词:蛋白质泌乳性能
- 草原红牛肌生成抑制素基因内含子1多态性及部分屠宰性状的相关性分析被引量:4
- 2010年
- 以草原红牛为研究对象,采用PCR-SSCP方法检测肌生成抑制素(MSTN)基因内含子1基因的多态性。结果表明:在内含子1发现多态性位点,有AA、AB和BB 3种基因型;测序结果显示在1 452 bp处存在C→T的碱基突变;该位点的多态性对草原红牛的净肉率有显著影响(P<0.05),BB型和AB型显著高于AA型(P<0.05),BB型和AB型之间差异不显著(P>0.05);其他屠宰性状在不同基因型间差异不显著(P>0.05)。由此可以初步推断MSTN基因可能是影响草原红牛肉质性状的一个主效基因或是一个影响肉质性状的QTL连锁的基因。
- 张胜张永宏高妍张犁苹刘同欣秦莹马倩张嘉保赵志辉张国梁邢沈阳
- 关键词:草原红牛PCR-SSCP屠体性状
- 1~15月龄西农萨能母羊血浆生化指标和生殖激素变化规律研究被引量:6
- 2013年
- 本试验旨在研究1~15月龄西农萨能羊血浆生殖激素和生化指标的变化规律。选取30只出生日期相近、体重相似的健康西农萨能羊母羔进行饲喂,每隔30天空腹颈静脉采血1次,以测定母羊自出生至妊娠、分娩中血浆4种生殖激素以及生化指标含量的变化。结果表明:哺乳期羔羊血浆雌激素、孕酮、卵泡刺激素、黄体生成素含量较低,此后逐渐上升;妊娠阶段母羊血浆雌激素、孕酮含量逐渐上升,卵泡刺激素、黄体生成素水平显著下降;分娩后试验羊血浆雌激素、孕酮释放水平逐渐下降,卵泡刺激素、黄体生成素含量略有上升。1~10月龄试验羊血浆总蛋白、白蛋白含量逐渐上升,妊娠阶段显著下降,分娩后有所回升。妊娠阶段试验羊血浆总胆固醇、甘油三酯、尿素氮水平急剧升高,分娩后逐渐下降。妊娠对试验羊血浆生化指标、生殖激素含量存在显著影响(P<0.05)。生殖激素浓度变化规律可为奶山羊早期选种和高效扩繁提供试验依据。
- 孙爽罗军王慧王维李芳许会芬张犁苹
- 关键词:血浆生化指标生殖激素
- 一种稳定表达山羊miR-103的腺病毒载体的构建方法及其应用
- 本发明公开了一种山羊miR-103的腺病毒载体的构建方法及其应用,其特征在于包括如下步骤:合成上、下游引物,以山羊miR-103DNA模板进行PCR扩增,其中所述上游引物为5’-CGC GATCGGTACCAACAGAA...
- 林先滋罗军赵旺生余康朱江江张犁苹
- 文献传递
- miR-200家族在西农萨能奶山羊乳腺组织中的表达分析被引量:6
- 2013年
- 笔者拟获得山羊miR-200家族乳腺组织表达谱,研究miR-200家族成员之间表达相关性及miR-200家族成员与山羊乳成分的相关性。通过定量PCR,检测miR-200家族在西农萨能奶山羊泌乳中期和干奶期乳腺组织中的表达量;利用Pearson相关系数分析miR-200家族不同成员表达量之间的相关性,同时分析miR-200家族成员与山羊乳成分之间的相关关系;利用miRanda和TargetScan 6.2软件分析、RNAhybrid和PITA软件预测miR-200家族的靶基因。结果表明,miR-200家族在奶山羊泌乳中期的乳腺组织中的表达量极显著高于干奶期(P<0.01);miR-200a与miR-141之间的表达量显著相关(P<0.05),miR-200b与miR-200c之间的表达量极显著相关(P<0.01);泌乳中期奶山羊乳腺组织中miR-200c的表达量与乳蛋白、非脂固形物(SNF)、冰点(FPD)的含量显著相关(P<0.05);经软件分析及预测发现,miR-200a/miR-141靶向作用于在乳脂合成中起关键作用的基因STAT4。miR-200家族可能对山羊乳蛋白及乳脂合成具有一定的调控作用。
- 张犁苹罗军林先滋朱江江石恒波史怀平李君
- 关键词:西农萨能奶山羊靶基因