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Lactobacillus diolivorans二醇脱水酶及其激活因子的功能鉴定: 从天然菌L．diolivorans中纯化了二醇脱水酶。经非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳与SDS-PAGE电泳结果显示，该酶分子量约200kDa，由分子量分别为62kDa、35kDa、22kDa的三种亚基组成，酶相对三种主要底物...; 孟晓蕾; 关键词：1,3-丙二醇甘油脱水酶 LACTOBACILLUS; 文献传递

巴斯德梭菌甘油脱水酶基因的克隆表达、纯化及酶学性质的研究被引量：4: 2006年; 用聚合酶链反应（PCR）技术，从巴斯德梭菌（Clostridium pasteurianum）扩增出甘油脱水酶基因（dhaBCE），在大肠杆菌中高效表达，SDS—PAGE（聚丙烯酰胺凝胶）电泳结果显示，分别有相对分子质量为66、21、16kD三条特异性蛋白表达条带。用金属镍亲和层析及S-300H凝胶层析将重组蛋白进行分离纯化，所得纯酶的比活为4·26U／mg。重组酶的最适反应温度42～44℃，最适作用pH=9．10～9．50，它对三个底物结构类似物的米氏常数（Km）值分别是：1，2-丙二醇0．38mmol／L，甘油0．29mmol／L，1，2-乙二醇2．0mmol／L；对辅酶B12的Km值为0.22μmol／L。; 唐悦孟晓蕾齐向辉韦宇拓黄日波; 关键词：甘油脱水酶基因表达酶学性质

一步法发酵葡萄糖生成1,3-丙二醇的基因工程菌的构建及分子改性: 1,3-丙二醇(1,3-propanediol,1,3-PDO)是一种重要的化工原料,1,3-PDO 不仅是良好的溶剂、抗冻剂、保护剂,而且还是合成许多缩聚物的单体,如新型聚酯材料-聚对苯二甲酸丙二醇酯(PTT)在很多领...; 齐向辉韦旭钦杨登峰吴杰群孟晓蕾唐悦梁甜杜丽琴韦宇拓黄日波; 关键词：一步发酵法 1,3-丙二醇葡萄糖基因工程菌; 文献传递

甘油脱水酶的理性设计:基因杂合改善酶的性质被引量：1: 2006年; 1,3-丙二醇是一种重要的化工原料,越来越受到广泛的关注.以弗氏柠檬酸菌和克雷伯氏菌的总DNA以及宏基因组为模板,克隆并表达了3个不同来源的甘油脱水酶基因,前两者均有活力,而后者则没有活力.为了改造甘油脱水酶使其更有利于工业化生产,通过同源建模(homology modeling)构建了这3个甘油脱水酶的三维结构,并利用一些生物信息学软件对这3个甘油脱水酶进行亚基之间的杂合改组(gene swapping)的理性设计,根据设计结果对这3种不同来源的甘油脱水酶的大、中小亚基基因分别进行了克隆.通过基因交换的方法对甘油脱水酶大、中小亚基进行了杂合,得到6种异源亚基杂合酶.部分杂合酶的酸碱稳定性、热稳定性及Vmax得到了明显的改善,同时杂合改组使本没有活力的来源于宏基因组的甘油脱水酶具有了活力而且杂合酶的热稳定性也得到了显著提高.根据构建的三维结构分析了结构差异对酶学性质的影响.; 齐向辉罗兆飞吴杰群孟晓蕾唐悦韦宇拓黄日波; 关键词：甘油脱水酶宏基因组基因置换杂合酶

Lactobacillus diolivorans二醇脱水酶激活因子基因的克隆、测序与功能鉴定被引量：6: 2007年; 根据二醇脱水酶与甘油脱水酶的激活因子基因序列同源性分析,设计简并引物从L.diolivorans基因组DNA中扩增出了假定的二醇脱水酶激活因子基因(gldG、gldH)全序列,补全了GenBank中该基因序列的未知部分,构建了表达质粒pSE-gldGH,以E.coliBL21为宿主,进行诱导表达.表达产物的变性与非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分析表明:gldGH表达产生68ku、13ku两个蛋白质,它们经金属螯合亲和层析与凝胶过滤得到共纯化,纯化产物即假定的激活因子为分子质量约325ku的蛋白质聚合体,由这两个蛋白质以等摩尔量组成,因此假定的激活因子可能为α4β4亚基结构.以L.diolivorans二醇脱水酶为对象,进行激活实验,结果证实gldGH表达产物具备二醇脱水酶激活因子的功能.; 孟晓蕾唐悦齐向辉韦宇拓黄日波; 关键词：1,3-丙二醇 LACTOBACILLUS

Lactobacillus diolivorans二醇脱水酶的分离纯化与酶学性质被引量：2: 2006年; 1，3-丙二醇（1，3-propanediol，1，3-PD）是一种重要的化工和医药中间体原料，是良好的溶剂、抗冻剂或保护剂，是聚酯——聚对苯二甲酸丙二醇酯（PTT）和聚氨酯的单体，可在地毯、纺织、工程塑料等领域中广泛应用，也可用于食品、化妆品和制药等行业食品．当前化工合成是生产1，3-丙二醇的主要方法，; 孟晓蕾齐向辉韦宇拓黄日波; 关键词：LACTOBACILLUS 辅酶B12 甘油脱水酶

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孟晓蕾