孙锁柱 作品数:47 被引量:162 H指数:7 供职机构: 中国人民解放军火箭军总医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 辽宁省自然科学基金 教育部重点实验室开放基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 更多>>
受者同系骨髓间充质干细胞对大鼠心脏移植急性排斥反应的影响 被引量:1 2011年 目的观察受者同系骨髓间充质干细胞(MSC)对大鼠心脏移植急性排斥反应的影响,并初步探讨其免疫调节机制。方法成年雄性Wistar大鼠20只为受体,随机分为空白对照组和MSC处理组,每组10只,行Lewis大鼠→Wistar大鼠颈部心脏移植。空白对照组手术后24h,经尾静脉注射3ml 0.9%氯化钠注射液;MSC处理组手术后24h,经尾静脉注射MSC2×10~6(悬浮在3ml 0.9%氯化钠注射液中)。术后1周,每组随机取4只大鼠,进行组织学检查及下腔静脉血检测血清白介素(IL)-2及IL-10水平。其余6只用以继续观察移植物存活时间。结果 (1)空白对照组大鼠移植心脏存活(7.2±1.3)d,MSC处理组大鼠移植心脏存活(14.8±2.9)d,差异显著(P〈0.01)。(2)血清IL-2空白对照组为(233.99±30.19)ng/L,MSC处理组为(249.11±20.34)ng/L,两组无统计学差异(P〉0.05);血清IL-10空白对照组为(81.44±11.01)ng/L,MSC处理组为(158.39±18.70)ng/L,差异显著(P〈0.01)。(3)病理学分级,空白对照组3B级1例、4级3例,MSC处理组2级1例、3A级2例、3B级1例,MSC处理组病理分级总体较空白对照组低。结论静脉注射受者同系骨髓MSC,可以延长大鼠颈部移植心脏的存活时间,减轻急性排斥反应的程度。 刘德忠 刘奎利 金建刚 李海斌 石炳毅 孙锁柱 龙宪连 张晓毅 邹练关键词:心脏移植 免疫抑制 移植物排斥 应用组织芯片技术研究Della-like 4在胃癌组织中的表达及意义 被引量:8 2008年 目的:研究Delta-like 4(DLL4)在胃癌中的表达及其与血管生成的关系.方法:采用免疫组化En Vision法检测胃癌组织芯片中DLL4的表达,用CD34进行微血管内皮细胞染色,计算微血管密度(MVD),分析其相关性.结果:DLL4在胃癌中的表达明显高于正常胃黏膜(85.9% vs 35.3%,P<0.01).DLL4的高表达与胃癌的转移(r=0.612,P<0.01)和胃壁浸润深度(r=0.482,P<0.01)呈正相关,与胃癌的组织病理及Borrmann分型无关.胃癌组织MVD明显高于正常胃黏膜组织(66.5±18.6 vs 34.2±16.4,P<0.01).MVD值与胃癌的组织病理分型(r=0.506,P<0.01)和转移有关(r=0.426,P<0.01),与胃癌胃壁浸润深度和Borrmann分型无明显相关性.DLL4表达阳性组的MVD指数明显高于DLL4表达阴性组(70.5±16.2 vs 32.5±10.4,P<0.01),DLL4表达与MVD呈正相关(r=0.521.P<0.01).结论:DLL4表达促进血管分化,对胃癌的转移、浸润起重要作用. 吕伟 陈凛 孙锁柱关键词:胃癌 血管内皮生长因子 组织芯片 微血管密度 大鼠尿酸性肾病肾小管上皮细胞凋亡、增殖、表型转化及转化生长因子β1表达关系 被引量:4 2008年 采用腺嘌呤灌胃法建立了大鼠实验性尿酸肾病动物模型,应用原位末端标记(TUNEL法)、免疫组化、原位杂交检测了6例正常及30例模型大鼠肾组织肾小管凋亡、增殖、表型转化现象及促纤维化细胞因子TGF-β1蛋白及基因表达状况.研究发现:尿酸性肾病发生发展过程中,肾小管上皮细胞存在明显的凋亡、增殖及表型转化现象.伴随着肾小管间质纤维化的形成,损伤肾小管凋亡、增殖、表型转化与转化生长因子β1(TGF-β1)表达呈增高趋势,且阳性表达细胞分布趋势一致:多位于尿酸盐沉积处损伤及再生的肾小管上皮细胞,可见凋亡、增殖、表型转化及转化生长因子β1表达在肾小管上皮细胞间伴随发生的现象.在病变晚期,肾小管明显萎缩及扩张,肾间质异物肉芽肿形成及弥漫纤维化,肾小管上皮细胞凋亡、增殖、表型转化及转化生长因子β1表达数量随残存肾小管上皮细胞的减少而呈下降趋势,但仍可见凋亡、增殖、表型转化及转化生长因子β1表达在肾小管上皮细胞间伴随发生的现象.这些结果均表明尿酸性肾病致肾小管间质纤维化过程中,肾小管上皮细胞凋亡、增殖、表型转化是损伤肾小管上皮细胞的重要病理变化形式,肾小管上皮细胞通过增殖,完成损伤肾小管的再生;通过细胞凋亡,清除坏死细胞并抑制肾小管上皮细胞的过度增殖;增殖的肾小管上皮细胞通过表型转化及TGFβ1表达,成为细胞外基质和促纤维化细胞因子的重要来源细胞,在肾小管间质纤维化中发挥了核心作用. 孙锁柱 程波 吴西钊 周艳敏 邹万忠关键词:尿酸性肾病 肾小管间质纤维化 凋亡 增殖 表型转化 转化生长因子Β1 一个肺癌相关新基因ASPH6功能的初步研究 被引量:1 2010年 为了探讨ASPH6在肺癌发生和发展中的生物学作用,构建了ASPH6真核表达载体,分别转染了2株肺腺癌细胞系LTEP-a-2和NCI-H1299,经G418筛选后获得了稳定的克隆细胞株.体外实验结果显示,表达ASPH6的肺癌细胞与对照空载细胞相比,细胞的迁移和浸润能力明显下降,但细胞的生长无明显改变.动物体内实验性转移结果显示,高表达ASPH6可明显抑制肺癌细胞的转移能力.进一步通过蛋白质组学方法,筛选并鉴定出14个ASPH表达调控蛋白.因此推测,ASPH6很可能是一个在肺癌发生和发展中起负调控作用的基因. 付晓星 王静 李娜 陈玥 何大澄 孙锁柱 肖雪媛关键词:肺腺癌 子宫颈上皮内瘤变及鳞状细胞癌组织cyclin D1表达特征及其与HPV16 E7表达的相关性分析 被引量:6 2015年 目的探讨cyclinD1在宫颈上皮内瘤变及鳞状细胞癌中的表达及其与HPV16E7基因表达的相关性。方法SiHa、Hcc94细胞均为宫颈上皮来源的鳞癌细胞,其中Hcc94细胞的E6/E7基因缺失。采用即时荧光定量PCR、免疫组织化学法检测cyclinD1在子宫颈上皮内瘤变(CIN)及鳞状细胞癌组织中基因及蛋白的表达情况;采用逆转录PCR(RT—PCR)、Westernblot、免疫组织化学方法检测cyclinD1在不同E7表达状态的鳞状细胞癌细胞系的表达情况;设计靶向HPV16E7基因启动子区的siRNA序列,构建质粒转染SiHa细胞,筛选稳定沉默E7基因的细胞系命名为cm-16细胞株;将空质粒转染SiHa细胞,获得空质粒细胞系命名为B3细胞株。用RT—PCR和Westernblot检测E7沉默cm-16细胞cyclinD1基因及蛋白表达情况。结果cyclinD1仅在正常宫颈鳞状上皮副基底细胞中表达,在CIN1、CIN2、CIN3表达降低,在HPV阳性的宫颈鳞状细胞癌中阴性或少量点灶状表达;cyclinD1在E7阳性SiHa细胞中的表达水平较cm-16及Hcc94细胞减低(均P〈0.05)。结论E7高表达的子宫颈癌组织及细胞中cyclinDI低表达,HPVE7基因抑制子宫颈癌cyclinD1表达。 王平 刘珊 程波 吴西钊 丁姗姗 武迪 许琳 石建玲 段恋 孙锁柱关键词:人乳头瘤病毒16 细胞周期蛋白D 基于TaqMan探针的幽门螺杆菌实时荧光定量PCR检测方法的建立 被引量:9 2013年 目的探讨基于TaqMan探针的幽门螺杆菌23SrDNA基因片段的实时荧光定量PCR检测的有效方法。方法根据幽门螺杆菌23SrDNA序列设计引物和探针,构建质粒标准品,建立实时荧光定量PCR体系并进行方法学评价,并对2012年5月至10月收集的100份临床样本进行检测同时应用免疫组化及银染方法进行比较分析。结果建立了检测23SrDNA的实时荧光定量PCR方法:107-102copies/ul范围内均有"S"型扩增曲线,最低检测浓度为102copies/ul,标准曲线相关系数为1。对临床其它消化道病原体不出现特异性的扩增曲线。对100份样本进行检测,实时荧光定量PCR能检出31份阳性,而免疫组化方法能检出25份阳性,银染方法能检出28份阳性。结论实时荧光定量PCR方法可成功检测幽门螺杆菌,且该方法具有灵敏度和特异性高及重复性好等优点。 石建玲 程波 刘珊 吴西钊 权兰菊 丁姗姗 孙锁柱关键词:幽门螺杆菌 实时荧光定量PCR AP-1及其相关基因uPA、uPAR在肺癌中的表达及其意义 被引量:2 2010年 研究AP-1及其相关基因uPA、uPAR在人肺癌中的表达及其与肺癌临床病理特征的关系.通过免疫组织化学方法检测101例肺癌组织及7例正常肺组织中AP-1、uPA、uPAR的表达情况,利用CMIAS2000型多功能真彩病理图像分析系统测量计算各病例中c-jun、c-fos、uPA、uPAR蛋白阳性细胞的平均光密度(DAO)和积分光密度(DIO).c-jun、c-fos在肺癌组织中表达的阳性率及其共表达率均显著高于正常肺组织;二者在NSCLC的表达显著强于SCLC;不同组织学类型肺癌中二者表达具有显著性差异,腺癌中表达最强,小细胞肺癌中表达最弱;c-jun、c-fos与肺癌分级、合并分期、淋巴结转移均呈显著正相关.uPA、uPAR与肺癌淋巴结转移密切相关,与合并分期呈显著正相关;uPAR与肺癌分级呈显著正相关;各指标之间均存在显著正相关关系.研究结果表明uPA、uPAR参与了肺癌侵袭转移,AP-1信号传导通路在该过程中起了重要调节作用. 程波 孙锁柱 吴西钊 王新允关键词:肺癌 AP-1 UPA UPAR 平均光密度 积分光密度 骨外粘液性软骨肉瘤1例临床病理分析及文献复习 目的 探讨骨外粘液性软骨肉瘤的临床病理特征、诊断及鉴别诊断.方法 结合文献对1例少见骨外粘液性软骨肉瘤进行病理组织形态学、免疫组化表型及临床分析,结合相关文献讨论.结果 患者年龄54岁,病变位于右侧大腿,13年前曾诊断为... 程波 刘珊 王福翔 章方莉 丁珊珊 吴西钊 孙锁柱p16和HPV基因分型对宫颈上皮内瘤变的诊断价值研究 2010年 采用基因芯片技术及免疫组化法,对62例CIN组织(30例CINⅠ、17例CINⅡ、15例CINⅢ)进行HPV基因分型及p16基因表达检测.提示p16基因和HPV基因在宫颈CIN组织中的阳性表达率与对照组相比均有显著差异(P<0.01);p16在正常宫颈中无表达,而随着宫颈病变的进展,p16的表达率显著升高(P<0.01),且与HPV有相关性.表明p16在一定程度上可反映HPV的感染程度,可作为宫颈病变及宫颈癌筛查敏感的客观性指标;HPV联合p16基因检测能显著提高宫颈病变的准确性. 高香转 丁晓萍 麻莉 孙锁柱 程波关键词:P16 免疫组化 HPV基因分型 宫颈上皮内瘤样变 直肠黑变病伴腺癌、腺瘤一例 章方莉 程波 刘珊 王福翔 丁珊珊 吴西钊 石建玲 权兰菊 孙锁柱