孙炜
- 作品数：11 被引量：22H指数：3
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学更多>>
- Gi蛋白介导生长抑素5激活对垂体催乳素腺瘤激素分泌的抑制作用
- 2024年
- 目的:通过体外实验探讨生长抑素5(SSTR5)激活对垂体催乳素腺瘤激素分泌的抑制作用及其机制。方法:使用前期研究中构建好的SSTR5过表达的GH3细胞系作为垂体催乳素腺瘤的体外细胞模型,使用SSTR5激动剂BIM23052联合其他G蛋白下游通路的抑制剂进行细胞刺激,荧光素酶报告基因检测Prl-luc启动子活性,酶联免疫吸附实验(ELISA)试剂盒检测细胞上清催乳素(PRL)的浓度。Student’s t检验和单向方差分析进行组间统计分析。结果:预处理Gi蛋白抑制剂百日咳毒素后GH3 SSTR5细胞中Prl启动子活性从对照组[Ctrl(Control)组(100.00±6.82)%比BIM组(BIM23052)组(69.08±7.09)%,t=5.43,P<0.01]到干预组[Ctrl组(107.86±12.40)%比BIM组(115.51±11.76)%,t=0.76,P>0.05],预处理百日咳毒素后细胞上清PRL的浓度变化从对照组[Ctrl组(100.00±12.38)%比BIM组(70.60±9.12)%,t=3.31,P<0.05]到干预组[Ctrl组(91.31±9.81)%比BIM组(89.91±9.48)%,t=0.18,P>0.05],百日咳毒素可消除BIM23052对Prl启动子活性的影响;beta-ARK过表达激活G beta-gamma亚单位,Prl启动子活性从空白转染组[Ctrl组(100.00±3.27)%比BIM组(64.70±2.26)%,t=15.38,P<0.01]到betaARK过表达组[Ctrl组(96.91±5.36)%比BIM组(70.12±6.82)%,t=5.35,P<0.05],beta-ARK过表达并不影响BIM23052对Prl启动子活性的抑制作用。使用cGMP类似物Rp8-pCPT-cGMPS、PKG抑制剂KT5823和PKG inhibitor、PKC广谱抑制剂Staurosporin和G?6983预处理GH3 SSTR5细胞,均不影响BIM23052对Prl启动子活性的抑制作用,其中cGMP类似物Rp8-pCPT-cGMPS为,Prl启动子活性从对照组[Ctrl组(100.00±3.97)%比BIM组(52.98±5.16)%,t=12.5,P<0.01]到干预组[Ctrl组(95.99±5.38)%比BIM组(60.23±2.63)%,t=10.35,P<0.01];PKG抑制剂KT5823为,Prl启动子活性分别从对照组[Ctrl组(100.00±2.50)%比BIM组(72.64±0.45)%,t=18.66,P<0.01]到干预组[Ctrl组(93.13±9.31)%比BIM组(53.54±11.50)%,t=4.30,P<0.05];PKG inhibitor为,对照组[Ctrl组(100.00±7.55)%比BIM组(64.07±3.49)%,t=7.48,P<0.01]到干�
- 邓健孙炜李朝曦徐钰王俊文韩林李然
- 关键词：催乳素瘤
- 神经内镜和显微镜经鼻腔蝶窦入路治疗GH型垂体腺瘤患者的效果对比
- 2022年
- 目的:对比神经内镜和显微镜经鼻腔蝶窦入路治疗生长激素(GH)型垂体腺瘤患者的效果。方法:选取2019年1月-2021年11月华中科技大学同济医学院附属同济医院收治的63例GH型垂体腺瘤患者,按照随机数字表法将其分为对照组(n=31)和观察组(n=32)。对照组采用显微镜经鼻腔蝶窦入路,观察组采用神经内镜经鼻腔蝶窦入路。两组均随访3个月。比较两组手术情况、肿瘤切除程度、激素变化情况、视觉功能及并发症发生情况。结果:两组手术时间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。观察组术中出血量少于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组肿瘤切除程度优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。随访结束后,两组GH、泌乳素(PRL)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、视野平均缺损(MD)、模式标准差(PSD)、加权视野指数(VFI)比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。两组术后并发症发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:相较于显微镜经鼻腔蝶窦入路治疗GH型垂体腺瘤患者,神经内镜经鼻腔蝶窦入路更能有效切除肿瘤,控制术中出血量,且不影响手术时间、视觉功能、激素水平及并发症发生率。
- 孙炜李然王俊文雷霆
- 关键词：垂体腺瘤
- Epac在生长激素分泌性垂体腺瘤细胞中过表达并促进其对奥曲肽耐药的分子机制研究
- 2023年
- 目的探索生长激素分泌性垂体腺瘤(GHPAs)对奥曲肽耐药的分子机制。方法收集临床GHPAs患者肿瘤及旁侧正常组织标本各10例。采用qPCR法、Western blot法和免疫组织化学(IHC)法检测上述各10例标本中cAMP直接激活的交换蛋白(Epac)的表达情况。在大鼠垂体腺瘤GH3细胞中过表达Epac。CCK-8法测定过表达Epac前后及给予奥曲肽处理前后细胞增殖能力的变化;ELISA测定细胞分泌生长激素(GH)情况的变化;qPCR法和Western blot法测定细胞中SSTR2和ZAC1表达水平的变化。慢病毒转染GH3细胞过表达Epac并进行BALB/c裸鼠荷瘤实验,测定过表达Epac前后及给予奥曲肽治疗前后,裸鼠荷瘤增殖能力的变化;Western blot测定促肿瘤增殖关键通路蛋白Ras-1和ERK1/2的表达情况变化。结果针对临床标本的研究,相较于旁侧正常组织,GHPAs组织中Epac mRNA和蛋白质表达水平均明显升高(P<0.05)。体外(in vitro)细胞水平实验,与pcDNA3.1组GH3细胞相比,pcDNA3.1+octreotide组GH3细胞增殖能力明显降低,GH分泌量明显下调,胞内SSTR2和ZAC1 mRNA和蛋白质表达水平明显升高(P<0.05);而pcDNA3.1-Epac组GH3细胞增殖能力明显升高,GH分泌量明显增加,胞内SSTR2和ZAC1 mRNA和蛋白质表达水平被明显抑制(P<0.05)。与pcDNA3.1-Epac组相比,pcDNA3.1-Epac+octreotide组GH3细胞增殖能力,GH分泌量,胞内SSTR2和ZAC1 mRNA和蛋白质表达水平均无明显差异(P>0.05)。在体(in vivo)裸鼠荷瘤实验,与pSLenti组相比,pSLenti+octreotide组裸鼠荷瘤体积和质量明显较小,Ras-1和ERK1/2的表达被明显抑制;pSLenti-Epac组的荷瘤体积和质量明显较大,上述两种蛋白质的表达明显升高(P<0.05)。与pSLenti-Epac组相比,pSLenti-Epac+octreotide组裸鼠荷瘤体积和质量,以及Ras-1和ERK1/2的表达没有明显变化(P>0.05)。结论临床部分GHPAs患者出现对奥曲肽的耐药性,其可能的分子机制为肿瘤细胞通过上调Epac,以抑制SSTR2和ZAC1的表达,并增强Ras-1和E
- 孙炜王俊文李然黄逸民张卓雷霆
- 儿童颅内蛛网膜囊肿的临床特点及手术疗效（附131例报告）被引量：3
- 2018年
- 目的分析儿童颅内蛛网膜囊肿（IAC）的临床特点及手术疗效。方法回顾性纳入2011年10月至2016年9月华中科技大学同济医学院附属同济医院神经外科收治的≤14岁的IAC患儿，共131例，其中无症状者31例。初始行囊肿切除术或造瘘术治疗57例；13例巨大囊肿者行囊肿-腹腔分流术；4例合并硬膜下血肿或积液者行钻孔引流术；未行手术治疗，随访观察57例。结果随访观察的57例，中位随访时间为22（3～48）个月，其中16例（28．1％）需行手术治疗（14例行囊肿切除术或造瘘术，2例行囊肿-腹腔分流术）；4例（7．0％）囊肿自行消失。其余41例中，30例囊肿无进展，11例囊肿轻微增大；其中12例（29．3％）无症状，29例（70．7％）有轻微症状。90例手术治疗的患儿，术后随访中位时间为24（3～56）个月，其中无症状33例（36．7％），轻微症状47例（52．2％），明显症状10例（11．1％）；术后囊肿大小为（11．9±6．8）cm^3，与术前的（138．5±26．1）cm^3比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。行囊肿切除术或造瘘术的71例中，术后并发硬膜下积液或脑积水者11例（15．5％），其中8例年龄≤2岁；行囊肿-腹腔分流术的15例中，3例并发分流管依赖综合征。结论随访观察者再手术的比例较高；手术是治疗有症状IAC的主要方法，疗效较好；硬膜下积液或脑积水（主要为≤2岁者）、分流管依赖综合征是手术的主要并发症。
- 厉亚坤王震陈籽荣孙炜张所军董芳永万锋雷霆
- 关键词：儿童蛛网膜囊肿疾病特征手术后并发症
- 儿童脊髓栓系综合征的手术治疗
- 目的：探讨儿童脊髓栓系的临床特点、手术方式、效果和临床预后。方法：回顾性研究30例在我院手术治疗的脊髓栓系患儿，对比研究术前影像、手术方式和术后效果。结果：30例患儿中下肢感觉功能障碍6例，运动障碍13例，大小便障碍12...
- 张华楸孙炜淦超李潮曦舒凯万锋雷霆
- 关键词：儿童脊髓栓系综合症
- 不同抗炎药物对缺氧所致大鼠离体肺血管环张力变化的影响
- 2001年
- 为研究离体大鼠肺血管在缺氧时张力的变化 ,以及甾体、非甾体类抗炎药物对此变化影响的异同性 ,采用等长收缩技术 ,测定加入消炎痛或地塞米松前后张力改变的特点及两药作用的差异。结果发现 :Wistar大鼠与 Sprague-Dawley大鼠肺血管环对缺氧的反应不同 ,后者仅出现收缩反应 ,而 Wistar大鼠在收缩前出现一内皮依赖的舒张 ;COX非特异性抑制剂消炎痛对缺氧所致的舒张和收缩均有增强作用 ;COX- 2特异性抑制剂地塞米松则在明显抑制舒张的同时轻度增强收缩反应。结果表明 :不同种属大鼠的肺血管缺氧反应可能存在差异 ;缩管性 PGs和扩管性 PGs分别调节急性肺血管缺氧的舒张和收缩反应 ,这一过程呈一定的内皮依赖性 ;非选择性和选择性的
- 吴萍李钢叶笃筠熊宗斌廖晓梅余上斌孙炜
- 关键词：肺血管缺氧消炎痛前列腺素
- 人子宫肌层诱导型环加氧酶剪接变异体cDNA片段的克隆和序列测定被引量：2
- 2003年
- 目的 寻找人子宫肌层诱导型环加氧酶 (cyclooxygenase 2 ,COX 2 )选择性剪接变异体。方法 运用自行设计的COX 2mRNA引物 ,采用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)技术 ,分离临产与未临产产妇子宫肌层COX 2mRNA ,再对电泳所获条带进行亚克隆、测序。结果 未临产产妇子宫肌层未检测到COX 2mRNA ,临产产妇子宫肌层不仅检测到COX 2mRNA ,而且分离出一新条带 ,经亚克隆及测序 ,证实该条带系人子宫肌层COX 2蛋白DNA的第 7、8外显子间的内含子序列被保留所致。结论 临产产妇子宫肌层COX 2mRNA存在选择性剪接变异体。该变异体的发现 。
- 黄引平叶笃筠吴萍黄云峰孙炜应红钢盘茜万敬员袁萍张代娟
- 关键词：子宫肌层CDNA片段克隆前列腺素内过氧化物合酶
- 生长抑素受体2和生长抑素受体5在垂体催乳素腺瘤中的表达及其临床意义被引量：6
- 2021年
- 目的探讨生长抑素受体2(SSTR2)和生长抑素受体5(SSTR5)两个受体亚型在人垂体催乳素腺瘤中的表达及其临床意义。方法收集华中科技大学同济医学院附属同济医院神经外科经手术和病理结果证实的人垂体催乳素腺瘤标本16例及4例尸检获取的正常垂体组织,采用新型特异性SSTR2和SSTR5的单克隆抗体(UMB1和UMB4),分别进行免疫组织化学、蛋白质印迹法(Western blot)和免疫荧光染色的方法检测难治性垂体催乳素腺瘤标本中SSTR2及SSTR5的表达,再分析其表达水平与临床特征[性别、肿瘤大小、术前血清催乳素水平、肿瘤细胞核增殖抗原(Ki-67)增殖指数、肿瘤侵袭性]的相关性。使用GraphPad Prism(V. 7)进行数据分析。结果免疫组化染色在正常垂体组织中均可见SSTR2和SSTR5的散在表达,81.25%(13/16)的催乳素腺瘤病例样本中检测到SSTR5的表达,相反仅3例肿瘤标本检测到散在的SSTR2的免疫反应性,其中1例为生长激素和催乳素混合型多激素腺瘤;Western Blot结果证实免疫组化的结果,免疫荧光共染结果提示正常垂体组织中催乳素细胞并不表达SSTR2,但有SSTR5的表达。Pearson’s相关分析显示SSTR5的高表达与患者的性别(女性SSTR5 IRS 0.31±0.07比男性SSTR5 IRS 0.38±0.16,t=0.47,P>0.05)、肿瘤大小(R2=0.009,F=0.133,P>0.05)、术前血清催乳素水平(R2=0.026,F=0.348,P>0.05)、肿瘤Ki-67增殖指数(R2=0.060,F=0.887,P>0.05)无明显相关。结论垂体催乳素腺瘤高表达SSTR5,第2代生长抑素类似物帕瑞肽有助于多巴胺受体激动剂耐药型垂体催乳素腺瘤的替代治疗。
- 李然孙炜陈娟徐钰王俊文雷霆
- 关键词：垂体催乳素瘤生长抑素受体2
- 微课和翻转课堂在神经外科实习教学中的应用被引量：11
- 2021年
- 目的探讨以微课为基础联合翻转课堂教学在神经外科临床实习教学中的应用。方法选择在我科2018年9月-2019年7月进行临床实习的147名学生为研究对象,随机分为试验组和对照组。试验组给予以微课为基础的翻转课堂教学模式,对照组采用传统授课模式教学。教学效果的评估采用四次临床实习在线考核成绩,出科考核成绩和教学方法问卷调查。结果试验组新教学模式实施后四次在线考核成绩,差异有统计学意义(P<0.01和P<0.001)及出科考试成绩均显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.001),且试验组出科考试及格率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。与对照组学生的主观体验相比,接收新教学模式的试验组的学生主观认为更好的掌握了知识点,差异有统计学意义(93.2%vs.73.0%,P<0.01),提高了自学能力,差异有统计学意义(89.0%vs.17.6%,P<0.001)和学习主动性,差异有统计学意义(91.8%vs.41.9%,P<0.001),课堂氛围更好,差异有统计学意义(87.7%vs.71.4%,P<0.05)。试验组中54.8%的学生对神经外科产生了兴趣,差异有统计学意义(P<0.05),并且95.9%接受新教学模式的学生认为此教学模式值得推广。结论以微课为基础的翻转课题教学模式显著提高神经外科临床实习的教学效果,培养了学生的学习主动性,提高了学生对神经外科专科的兴趣。
- 赵恺徐钰王俊文孙炜牛洪泉
- 关键词：神经外科临床实习教学教学方法教学改革教育
- 生长抑素受体5抑制垂体催乳素腺瘤激素的异常分泌被引量：1
- 2022年
- 目的探讨生长抑素受体5(SSTR5)活化在垂体催乳素腺瘤中激素分泌中的抑制作用。方法使用大鼠GH3细胞(美国细胞中心,ATCC)作为垂体催乳素腺瘤的体外细胞模型,外源性转染SSTR5质粒构建SSTR5过表达模型,使用流式细胞仪分选技术分选转染阳性细胞,并用蛋白质印迹法(Western blot)加以验证,荧光素酶报告基因检测PRL-luc启动子活性,CellTiter Glo试剂盒及酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒检测细胞活性及细胞上清PRL的浓度。使用SSTR5激动剂BIM23052进行细胞刺激,检测空白组和转染组细胞上清PRL浓度及细胞活性。应用Student’s t检验和单向方差分析进行组间比较。结果蛋白印迹法检测流式分选SSTR5过表达质粒转染细胞GH3SSTR5可发现SSTR5蛋白高表达,单纯过表达SSTR5显著降低PRL-luc报告基因的活性[(71.07±4.38)%比(99.96±0.88)%,t=6.47,P<0.01],抑制细胞上清PRL的分泌[(65.24±10.71)%比(100.00±4.44)%,t=2.99,P<0.05];使用不同浓度的BIM23052刺激GH3SSTR5细胞,PRL-luc报告基因活性呈现U型剂量反应曲线,BIM23052浓度在10 nmol/L时达到最大抑制效应[(45.23±1.21)%对(99.96±1.24)%,t=31.62,P<0.01],而BIM23052并不影响SSTR5空载质粒mock转染组GH3mock细胞的PRL-luc报告基因活性;BIM23052并不影响GH3mock细胞上清PRL的浓度,但BIM23052可显著抑制GH3SSTR5细胞上清PRL的浓度[(57.10±6.41)%比(96.14±6.82)%,t=4.16,P<0.01]。BIM23052并不改变GH3mock和GH3SSTR5细胞的活性。结论SSTR5活化可以通过抑制PRL mRNA的转录抑制垂体催乳素腺瘤激素的异常分泌。
- 孙炜李然李朝曦王俊文徐钰雷霆
- 关键词：垂体催乳素
