吴莲英 作品数:20 被引量:43 H指数:4 供职机构: 南开大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 天津市科技发展战略研究计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
肌球蛋白轻链激酶基因调控在肿瘤细胞转移中的作用 叶丽虹 张晓东 王洪辉 吴莲英 刘新元 尤嘉琮 王长晔 郭威 蔡娜 吴晶辉 该研究在建立严重联合免疫缺陷鼠(SCID)的肿瘤转移动物模型后,筛选、获得并鉴定了一株乳腺癌高转移细胞系,命名为LM-MCF-7,与其亲本的MCF-7细胞形成了“转移-高转移”的配对关系。然后,以LM-MCF-7细胞系和...关键词:关键词:肿瘤转移 肌球蛋白轻链激酶 反义核酸 肌球蛋白轻链激酶在肿瘤转移中的作用及其分子机理研究 叶丽虹 张晓东 吴莲英 尤嘉琮 秦宵然 近年来发现肌球蛋白轻链激酶(MLCK)与肿瘤的转移和浸润有密切的关系,但其相关的分子机制及信号转导途径尚不清楚。在前期研究获得了高转移乳腺癌细胞株LM-MCF-7和相应动物模型基础上,该项目检测了MCF-7和LM-MCF...关键词:关键词:MLCK 肿瘤转移 信号途径 ML-7对高转移乳腺癌LM-MCF-7细胞系的作用及其信号途径的研究 目的:乳腺癌是女性最普遍的恶性肿瘤,乳腺癌转移是造成患者死亡的主要原因,迄今为止乳腺癌转移的发病机理尚不清楚。我们前期建立了具有高转移倾向的乳腺癌 LM—MCF-7细胞系。本文应用MLCK的特异性抑制剂 ML-7作用LM... 叶丽虹 刘毅 吴莲英 张晓东关键词:MLCK 乳腺癌 信号传导途径 文献传递 乙型肝炎病毒X抗原、X抗体检测的临床意义 被引量:3 2007年 目的了解乙型肝炎病毒X抗原(HBxAg)、X抗体(HBxAb)在乙型肝炎、肝硬化、肝癌患者血清中的表达情况,探讨HBxAg和HBxAb与上述疾病的相关性和临床意义。方法应用大肠埃希菌合成重组HBxAg,用该抗原免疫动物获得的HBxAb分别包被反应板以酶联免疫吸附试验(ELISA)检测患者(171例乙型肝炎、70例肝硬化和38例肝癌)血清中HBxAg和HBxAb。结果在乙型肝炎、肝硬化、肝癌患者血清中HBxAg和HBxAb阳性率分别为8.8%、18.6%、7.9%和10.5%、47.1%、34.2%,HBxAg在肝硬化患者中检出率较高(P<0.025);与乙型肝炎组比较,HBxAb阳性率在肝硬化和肝癌患者均有显著增高(P<0.005)。结论HBxAg在肝硬化患者检出率较高,而HBxAb则在乙型肝炎后的肝硬化和肝癌患者检出率较高,提示HBxAg和HBxAb可能参与肝组织的免疫病理性损伤过程。 邵新华 刘树业 邵媛媛 武珊珊 吴莲英 张行关键词:乙型肝炎病毒 X抗原 乙型肝炎 肝硬化 肝癌 乙型肝炎病毒新标志物HBxAg/抗-HBx检测临床意义的探讨 <正>目的乙型肝炎病毒(HBV)是原发性肝癌(HCC)发生的重要原因,而 HBV 基因组最小开放阅读框架编码的 X 基因,被认为在 HBV 致癌过程中具有重要的生物学意义,X 基因编码含有154个氨基酸残基的 X 蛋白 ... 邵新华 刘树业 武珊珊 吴莲英 张行文献传递 不同转移能力乳腺癌细胞株的差异表达蛋白研究 被引量:3 2006年 背景与目的:肿瘤转移相关蛋白在肿瘤细胞转移过程中具有重要作用,本研究在建立高转移潜能乳腺癌细胞株LM-MCF-7的基础上,筛选乳腺癌细胞转移相关蛋白并探讨其功能。方法:应用蛋白质组学和免疫印迹等方法比较和筛选来源相同但具有不同转移能力的乳腺癌细胞株(MCF-7/LM-MCF-7)的蛋白质表达差异。将克隆有存活蛋白(survivin)的真核表达载体pcDNA3-Sur转染至MCF-7细胞,通过“伤口愈合”实验检测存活蛋白对乳腺癌细胞迁移的影响。结果:应用蛋白质组学技术获得8个有意义的蛋白质,分别有参与细胞骨架构成、物质代谢、细胞凋亡、蛋白折叠和蛋白质相互作用等功能。应用免疫印迹方法发现,在MCF-7细胞中nm23、p27表达水平较高,在LM-MCF-7中存活蛋白、肌球蛋白轻链激酶(myosinlightchainkinase,MLCK)和Bcl-2表达水平较高。“伤口愈合”实验显示,存活蛋白过表达可明显增强MCF-7细胞的迁移能力。结论:不同转移能力的乳腺癌细胞株中存在与乳腺癌转移相关的蛋白质,存活蛋白与乳腺癌转移有密切的关系。 叶丽虹 尤嘉琮 郭威 徐少峰 吴莲英 齐众 张晓东关键词:肿瘤转移 蛋白质组学 存活蛋白 花生四烯酸诱导肌球蛋白磷酸化被抑制的平滑肌细胞迁移的信号传导途径 2006年 在应用肌球蛋白轻链激酶特异抑制剂ML-7抑制了肌球蛋白轻链磷酸化后,花生四烯酸(arachidonicacid,AA)仍可诱导兔血管平滑肌细胞(SM3)发生迁移.为了进一步阐明其信号传导途径,应用多种信号抑制剂,采用免疫印迹、Boyden小室和提取细胞膜蛋白等实验方法,对上述迁移作用的信号传导途径进行了深入的研究.结果显示,PTX(Gi蛋白抑制剂)、U73122(PLC抑制剂)、staurosporine(PKC抑制剂)、PD98059(ERK1/2抑制剂)和SB203580(p38抑制剂)分别可拮抗上述AA诱导的SM3细胞迁移作用,而SP600125(JNK抑制剂)的作用较弱.免疫印迹结果显示,AA可提高SM3细胞中PKC(ε)、ERK1/2、p38和JNK信号的磷酸化水平,呈时间依赖性,PTX或U73122可抑制上述作用;staurosporine可抑制由AA引起的ERK1/2和JNK的磷酸化水平增强,但对p38的磷酸化水平无影响.还发现AA可促进PLCβ2的细胞膜移位,PTX可抑制其作用.上述结果表明,当肌球蛋白轻链的磷酸化被抑制后,AA可通过Gi蛋白的活化促进PLCβ2向细胞膜移位,进而通过激活PKC(ε)、ERK1/2、p38和JNK等信号转导途径而诱导SM3细胞发生迁移. 吴晶辉 叶婷婷 王洪辉 周晓雷 米达 吴莲英 王长晔 郭威 张伟英 张晓东 叶丽虹关键词:花生四烯酸 平滑肌细胞 细胞迁移 信号传导途径 高转移倾向的人乳腺癌细胞系及其建立方法 本发明涉及癌细胞系,特别是一种高转移倾向的人乳腺癌细胞系及其建立的方法,属动物细胞系领域。有关肿瘤的侵袭与移转的机制目前尚不十分清楚。需要建立肿瘤转移动物模型对其进行深入的研究。以往在肿瘤转移动物模型中应用裸鼠,在本发明... 叶丽虹 张晓东 朱惠芳 吴莲英 鞠永健文献传递 乳腺癌转移中参与转运作用基因的分离及分离方法 本发明公开了一种高精确度、高通量筛在乳腺癌转移中参与转运作用基因的分离方法。本发明方法通过建立具有高转移倾向的转移亚克隆LM-MCF-7细胞系与其亲本人乳腺癌细胞系MCF-7形成配对细胞系作为实验样本,不仅可随时无限量培... 张晓东 叶丽虹 吴莲英 尤嘉琮文献传递 乙肝病毒X蛋白结合蛋白(HBXIP)增强肝癌细胞NF-κB转录活性的实验研究 被引量:11 2007年 前期研究结果表明,乙型肝炎病毒X蛋白结合蛋白(hepatitis B virus X-interacting protein,HBXIP)具有促进细胞增殖的作用.为了进一步阐明其分子机制,观察了HBXIP对核因子κB(NF-κB)转录活性的影响.实验中通过基因共转染将NF-κB报告基因质粒pNF-κB-Luc和HBXIP真核表达载体pcDNA3-hbxip导入人肝癌H7402细胞系中,进行荧光素酶活性分析.结果显示:H7402细胞过表达HBXIP后NF-κB的转录活性明显增强;此外,基因转染后经免疫印迹检测显示,与NF-κB二聚体结合的抑制亚基IκBα的磷酸化水平明显增加;同时,提取H7402细胞的核蛋白,然后应用免疫印迹检测细胞核中p65/NF-κB的水平.结果显示,H7402细胞中HBXIP过表达后细胞核中p65/NF-κB的水平明显增加.当应用RNA干扰技术抑制了细胞内源性的HBXIP基因表达后,则出现与上述结果相反的效果.上述结果提示,HBXIP可增加核内p65/NF-κB蛋白水平,进而发挥NF-κB促转录调控的作用.因此,HBXIP可通过调控NF-κB信号途径而促进细胞增殖. 王凤泽 沙丽 乔玲 吴莲英 张晓东 叶丽虹关键词:IΚBΑ 肝癌细胞