卢德赵
- 作品数:121 被引量:603H指数:14
- 供职机构:浙江中医药大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金浙江省自然科学基金浙江省医药卫生科学研究基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学环境科学与工程更多>>
- 一种高水溶性姜黄素制备方法
- 本发明公开了一种高水溶性姜黄素制备方法,其特征在于:所述姜黄素配方的有效成分及质量份数为:姜黄10计量份、二甲基甲酰胺10计量份、乙酰丙酮10计量份、组合物溶液18计量份、醋酸4计量份、红豆5计量份、杏仁7计量份、火龙果...
- 陈少云窦晓兵陈林卢德赵周丽萍刘禹臣
- 一种唾液蛋白样品的制备方法
- 一种唾液蛋白样品的制备方法,属于蛋白质样品制备技术领域,其特征在于包括以下步骤:1)收集唾液;2)将收集的唾液于4℃,800g离心15min,吸取上清液;3)加入体积浓度为0.05%-5%的稀乙酸,混匀;4)4℃,140...
- 范永升温成平丁慧登卢德赵曲建全谢志军
- RAW264.7巨噬细胞源性泡沫细胞模型的建立及鉴定被引量:16
- 2010年
- 目的以小鼠巨噬细胞RAW 264.7为对象,建立简便而又准确的泡沫细胞诱导及鉴定方法。方法将实验分为正常对照组和不同浓度氧化型低密度脂蛋白与细胞孵育组,在以孵育时间为24 h的前提下,用MTT法和流式细胞术来确定诱导泡沫细胞的氧化型低密度脂蛋白合适浓度区间范围,并用总胆固醇试剂盒和游离胆固醇试剂盒测定不同程度泡沫细胞内胆固醇酯含量。结果氧化型低密度脂蛋白浓度范围为20~30 mg/L时,细胞存活率已受到显著抑制,并随着氧化型低密度脂蛋白浓度的增高细胞凋亡率和坏死率逐渐增大,起初以细胞凋亡为主,当氧化型低密度脂蛋白浓度大于40 mg/L时凋亡的细胞不断坏死。20 mg/L和30 mg/L氧化型低密度脂蛋白与RAW 264.7细胞共孵育24 h,细胞内胆固醇酯比重分别为66.26%和71.19%,而10 mg/L的氧化型低密度脂蛋白诱导24 h的泡沫细胞不典型,40 mg/L以上的氧化型低密度脂蛋白诱导的泡沫细胞泡沫化程度严重,贴壁不牢,大部分细胞破裂或凋亡,脂滴散布于细胞外。结论 20~30 mg/L氧化型低密度脂蛋白诱导的RAW 264.7巨噬泡沫细胞模型稳定且形态较完整,符合泡沫细胞的形态学特征。
- 周云沃兴德卢德赵
- 关键词:RAW264.7细胞泡沫细胞胆固醇酯氧化型低密度脂蛋白
- 1-磷酸甘露醇脱氢酶基因转化水稻的研究被引量:20
- 2003年
- PCR和 Southern blotting检测表明 ,来自大肠杆菌的 mtl D基因已通过农杆菌介导整合进水稻基因组。mtl D基因在 T1代出现分离 ,T2 代出现纯系。在 0 .75% Na Cl胁迫下 ,7个转基因 T3 代株系都能检测到 mtl D酶活性 ,与对照相比细胞膜的相对电导率和大分子渗漏值明显降低。部分转基因株系能在 1 .0 % Na Cl浓度下正常生长 ,而对照在 0 .5% Na Cl浓度下已不能存活。通过有性杂交途径实现了 mtl D和 gut D两个基因的聚合 ,部分杂交后代株系能在 1 .2 5% Na Cl胁迫下正常生长结实。
- 王慧中刘俊君卢德赵赵艳颜美仙钱前彭学贤陈受宜黄大年
- 关键词:转基因植株耐盐性有性杂交
- 应用转基因技术提高超级水稻产量的一种方法
- 能提高水稻籽粒灌浆效率,使籽粒饱满的应用转基因技术提高超级水稻产量的一种方法,将经诱变发生突变的淀粉合成关键酶基因(AGP)导入籽粒灌浆不饱满的超级水稻品种未成熟胚的愈伤组织,经筛选后培养成稻苗,移植至温室或大田得T<S...
- 黄大年钱前华志华高振宇滕胜曾大力卢德赵颜美仙赵艳朱雪峰
- 文献传递
- 利用微生物转化技术从姜黄素中获取高效调脂新型化合物的研究
- 姜黄素类化合物为姜黄属植物的主要化学成分,具有广泛的生物学活性。我们前期研究发现姜黄醇提物,即姜黄素能使高脂膳食引起的兔主动脉粥样斑块减少,斑块中的胆固醇和甘油三醇含量降低, 姜黄素也能使高脂膳食小鼠和大鼠血清和肝脏胆固...
- 沃兴德程东庆卢德赵窦晓兵杨贞沃立科
- 文献传递
- 温补肾阳药对甲状腺切除的肾阳虚大鼠肝线粒体蛋白质组的影响被引量:12
- 2009年
- 目的:研究温补肾阳药对肾阳虚动物肝线粒体蛋白质组的影响。方法:12只SD大鼠,随机分为3组,每组4只。模型组和治疗组切除两侧甲状腺,正常组做相应的假手术,但不切除甲状腺。喂养7 d后模型组和治疗组大鼠出现拱背耸毛、大便稀溏等肾阳虚的症状。从第8天开始,治疗组每天喂饲温补肾阳药1次,给药剂量6.7 g.kg-1,其他2组喂饲等体积的生理盐水,连续6 d后,断头处死3组大鼠,分离提取其肝线粒体蛋白质,分别用荧光染料Cy3,Cy5标记,每个Cy3及Cy5标记的样品与等量Cy2标记的内标混合后在同一块凝胶中进行电泳分离,经不同光激发后扫描得到不同样品的蛋白质组图谱。经DeCyder 6.5软件进行差异蛋白质组分析,并对差异蛋白质进行质谱鉴定。结果:双向电泳后,平均每块胶检测到997个蛋白质点,其中所有图谱共有的点有687个,并从中筛选到22个差异蛋白,其中热休克蛋白60、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物、氨甲酰磷酸合成酶Ⅰ,ATP合成酶、乳铁传递蛋白、ATP酶质子通道蛋白、电子传递黄素蛋白和类钙离子激活中性蛋白酶12在肾阳虚状态下表达量均增加,而二氢硫辛酰胺支链酰基转移酶、脂酰辅酶A脱氢酶、鸟氨酸转氨酶和GTP结合调节蛋白在肾阳虚状态下表达量均降低。经温补肾阳药治疗后,热休克蛋白60、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物、ATP合成酶、乳铁传递蛋白、ATP酶质子通道蛋白、电子传递黄素蛋白二氢硫辛酰胺支链酰基转移酶、脂酰辅酶A脱氢酶和GTP结合调节蛋白表达量均增加,而氨甲酰磷酸合成酶Ⅰ和类钙离子激活中性蛋白酶12表达量减少。结论:温补肾阳药可能通过调节物质代谢、保护线粒体膜稳定性和维护细胞内信号传导而起到治疗肾阳虚的作用。
- 卢德赵沃兴德沃立科李毅唐利华杨贞
- 关键词:蛋白质组肾阳虚温补肾阳药线粒体
- 四物汤对血虚证模型大鼠肝线粒体蛋白质组的影响被引量:11
- 2010年
- 目的探讨四物汤治疗血虚证的机理。方法Wistar大鼠随机分为模型组、治疗组、正常组各6只。模型组和治疗组大鼠在第1、4、7d皮下注射2%乙酰苯肼生理盐水注射液,第4d起模型组生理盐水灌胃,治疗组给予四物汤灌胃,正常组给予生理盐水,连用7d后,检测外周血象、肝脾湿重;提取肝脏线粒体蛋白质,用双向电泳等蛋白质组学技术测定大鼠肝线粒体中有影响的蛋白质。结果模型组大鼠出现萎靡、苍白等血虚症状,肝脾明显肿大,红细胞数和血红蛋白量明显降低,白细胞、网织红细胞计数明显升高(P<0.01);四物汤治疗后外观较快恢复,红细胞、血红蛋白、网织红细胞数较上升(P<0.01);模型大鼠肝线粒体蛋白质与正常相比有14个能量代谢相关蛋白质的水平发生改变,四物汤可使这些改变的蛋白质水平有所恢复。结论四物汤可以调节肝线粒体内一些酶和伴侣分子,清除自由基和过氧化物,稳定线粒体结构,保护线粒体功能;改善糖、脂类、蛋白质代谢,从蛋白质分子水平改善血虚动物的虚损状况。
- 龚文君沃兴德卢德赵丁慧登李毅
- 关键词:四物汤血虚证肝线粒体蛋白质组中医药疗法
- 不同中医证型乳腺增生组织蛋白质组的研究被引量:12
- 2011年
- 目的:应用凝胶内差异显示电泳技术和质谱技术研究不同中医证型乳腺增生组织蛋白质组。方法:提取不同证型乳腺增生组织总蛋白,分别用Cy3或Cy5标记,每对Cy3和Cy5标记样品都与1个Cy2标记的内标等量混合,上样于同一胶中进行电泳分离,经不同光激发下扫描得到不同样品的蛋白质组图谱。所获得的图谱经DeCyder 6.5软件进行分析,筛选表达量有显著差异的蛋白质进行质谱鉴定。结果:12个蛋白质在不同乳腺增生组织中有显著差异。其中,α-B crystallin,Cyclophilin A,Cypa在冲任失调型中表达量最高,肝郁气滞型次之,在痰瘀互结型中表达量最低。转甲状腺素蛋白变体,Pkci底物类似物、血红蛋白、脱氧血红蛋白和血红蛋白α链在肝郁气滞型中表达量最高,冲任失调型次之,在痰瘀互结型中表达量最低。而Cu,Zn-超氧(化)物歧化酶和转甲状腺素蛋白在肝郁气滞型、痰瘀互结型和冲任失调3型乳腺增生组织中表达依次降低。结论:这12个蛋白质可能与乳腺增生病不同证型相关,可以作为乳腺增生病临床中医辨证论治的候选客观指标。
- 卢德赵沃立科赵虹楼丽华沃兴德唐利华李毅
- 关键词:乳腺增生蛋白质组证型
- 白藜芦醇对HeLa细胞蛋白质组影响的研究被引量:4
- 2013年
- [目的]应用双向电泳及质谱技术研究白藜芦醇(Resveratrol,Res)对宫颈癌HeLa细胞蛋白质组的影响。[方法]经磺基罗丹明B(sulforhodamine B,SRB)法筛选对宫颈癌HeLa细胞有效的白藜芦醇浓度,流式细胞仪检测有效白藜芦醇浓度对HeLa细胞周期和凋亡的影响。HeLa细胞经白藜芦醇处理后,提取细胞总蛋白,应用双向电泳技术建立蛋白质组图谱,筛选白藜芦醇处理前后差异在2倍以上的蛋白质作为差异蛋白,进行质谱鉴定和生物信息学分析。[结果]50μmol/L以上浓度白藜芦醇24小时对HeLa细胞的活性产生影响,将细胞阻滞在S期,诱导HeLa细胞的早期凋亡,并呈剂量依赖性。通过差异蛋白质组分析筛选出12个差异蛋白质,包括原肌球蛋白、细胞核糖核蛋白C、锌指蛋白、钙连接蛋白、微管蛋白β、热休克蛋白70、α烯醇化酶、丙酮酸激酶、雌激素受体β、氨基甲酰磷酸合成酶,HeLa细胞经白藜芦醇处理后这些蛋白表达量均增加。[结论]白藜芦醇可能通过参与调节细胞的转移分化、凋亡、能量代谢等过程而起到抗肿瘤作用。
- 李毅卢德赵金丽丽岳静许健
- 关键词:白藜芦醇HELA细胞蛋白质组流式细胞仪