华颖
- 作品数:5 被引量:9H指数:1
- 供职机构:北京交通大学更多>>
- 发文基金:中央高校基本科研业务费专项资金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- DEK蛋白的表达和纯化及其功能的初步研究
- DEK蛋白是一种含量丰富、普遍存在的可磷酸化的染色质架构蛋白,主要存在于细胞核的常染色质中,由375个氨基酸组成。DEK蛋白有两个功能性的DNA结合域,一个是位于中心的SAP/SAF DNA结合域,一个是位于C末端的DN...
- 华颖
- 关键词:蛋白表达DNA结合域细胞增殖恶性肿瘤蛋白功能
- 文献传递
- 靶向树突状细胞的呼吸道合胞病毒F重组蛋白的构建与体外活性分析
- 2016年
- 分析以人呼吸道合胞病毒(Human respiratory syncytial virus,RSV)融合糖蛋白(fusion glycoprotein,F)为抗原靶向DEC205/CD205受体策略对重组F蛋白表达及活性的影响.F蛋白是RSV的重要中和抗原,克隆RSV F蛋白胞外区的编码基因至可识别鼠树突状细胞(Dendritic cells,DCs)DEC205受体的单链抗体(single chain antibody of anti-DEC205,scDEC)的C端,构建可表达重组F蛋白(scDECF)的质粒pVAX1/scDECF,Western blot方法检测scDECF的表达,免疫荧光法和流式细胞术检测表达的scDECF与DEC205受体的结合活性.经Western blot证实在pVAX1/scDECF转染的293T细胞成功表达了scDECF.将所获得的细胞培养上清与表达鼠DEC205受体的细胞CHOmDEC205孵育,用免疫荧光和流式细胞术证实:与作为对照的重组F蛋白scISOF相比,所获得的scDECF与CHOmDEC205细胞呈现明显的结合.本研究成功表达了重组蛋白scDECF,且所获得的重组蛋白scDECF具有与表达DEC205受体的细胞特异性结合的活性.
- 华颖彭向雷付远辉郑妍鹏洪涛何金生
- 关键词:呼吸道合胞病毒树突状细胞
- DEK蛋白与细胞凋亡的研究进展被引量:8
- 2009年
- DEK蛋白是一种广泛存在于细胞核内的可磷酸化的核蛋白.研究认为DEK蛋白与DNA的特异性结合能够改变与其结合的DNA的拓扑结构,进而影响基因的活性.细胞应激反应与DEK蛋白有潜在的关系,在死亡受体介导的细胞凋亡过程中,DEK蛋白的磷酸化状态发生了变化.DEK蛋白的磷酸化、多聚腺苷化均能促使DEK蛋白从染色质上释放下来并最终到达细胞外成为导致某些自身免疫性疾病的抗原.近来研究显示,DEK蛋白与细胞凋亡密切相关,DEK蛋白的过表达对细胞凋亡的作用具有双重性,即促进或抑制细胞凋亡.
- 华颖胡红刚彭向雷
- 关键词:DEK细胞凋亡磷酸化CASPASE
- 重组腺病毒载体表达体内自组装呼吸道合胞病毒样颗粒及其制备方法和应用
- 本发明公开一种重组腺病毒表达自组装呼吸道合胞病毒样颗粒,所述病毒样颗粒包含呼吸道合胞病毒F和M蛋白,所述F和M蛋白是密码子优化的F和M基因进行编码,F和M基因由2A序列连接,所述连接后的核苷酸序列如SEQ ID No.4...
- 何金生彭向雷华颖付远辉
- 文献传递
- DEK蛋白C末端DNA结合域的原核表达、纯化及其与DNA的结合活性被引量:1
- 2009年
- DEK蛋白C末端DNA结合域(简称CDB)是近年新发现的一个DEK蛋白与DNA的结合域,其中含有多个磷酸化位点,与DEK蛋白的功能密切相关。利用原核表达系统表达DEK蛋白的CDB肽段并进行纯化,具体为以pET-30a(+)为载体质粒,E.coliBL21(DE3)为宿主细胞,构建重组基因工程菌,以IPTG诱导目的蛋白的表达,用Ni-NTA纯化的重组蛋白样品来进行SDSPAGE电泳分析,约在10.7kDa处出现明显的特征蛋白条带。凝胶迁移分析证实DEK蛋白C末端DNA结合域与DNA的结合倾向于与超螺旋型DNA相结合,同全长的DEK蛋白与DNA的结合具有类似的特点,表明DEK蛋白C末端DNA结合域在DEK蛋白与DNA的结合中可能具有一定的作用。
- 华颖胡红刚彭向雷
- 关键词:原核表达纯化