- 硫氧还蛋白通过Smad3／AP-1通路抑制人血管内皮细胞黏附蛋白的表达被引量：1
- 2013年
- 目的 研究硫氧还蛋白（Trx）在动脉粥样硬化中对血管内皮细胞保护作用的分子机制. 方法 应用腺病毒感染的方法在原代人脐静脉内皮细胞（HUVECs）中建立过表达硫氧还蛋白及其对照的细胞模型.以致动脉粥样硬化重要危险因子氧化型低密度脂蛋白（oxLDL）为刺激剂.应用免疫印迹及间接免疫荧光法检测Trx,黏附分子（ICAM-1,VCAM-1）及其上游信号分子（Smad3,AP-1）的蛋白表达及细胞定位.应用胰岛素还原法检测Trx的活性,应用荧光探针DCFHDA进行细胞内活性氧检测. 结果 和对照组相比过表达Trx组Trx表达量明显提高,活性检测显示Ad-Trx的活性上调率为（26.2±3.3）％,细胞内活性氧（ROS）检测提示过表达Trx显著抑制细胞内ROS的产生.和对照组相比在基础及氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）刺激下过表达Trx组明显下调了内皮细胞黏附分子的表达（P＜0.05）,显著提高了内皮细胞中Smad3的磷酸化（P＜0.05）.而应用Smad3磷酸化特异性的抑制剂SIS3预处理细胞反转了Trx对黏附蛋白的抑制作用.SIS3预处理细胞进一步上调了oxLDL刺激下AP-1亚基c-Fos的核蛋白表达. 结论 Trx抑制内皮细胞黏附分子表达的作用可能是通过上调Smad3蛋白的磷酸化及抑制核转录因子AP-1亚基c-Fos的核表达来调节的.
- 陈北冬王文东赵革新马丽娜刘雪青齐若梅
- 关键词：血管细胞黏附分子-1转录因子AP-1
- 银杏内酯B对内皮细胞连接蛋白的影响及其分子机制研究被引量：7
- 2014年
- 目的探讨银杏内酯B对人脐静脉内皮细胞连接蛋白以及血管渗透性的影响。方法用银杏内酯B(0.2、0.4、0.6 g·L-1)孵育人脐静脉内皮细胞1 h,再用ox-LDL刺激细胞4 h,用Western blot及免疫荧光法检测JAM-A、Cx43的表达。用白细胞迁移实验观察ox-LDL损伤内皮细胞以及银杏内酯B对单核细胞向内皮细胞下迁移的影响。结果①ox-LDL刺激内皮细胞4 h,JAM-A表达增加了22%,Cx43表达增加了24%,银杏内酯B处理的细胞JAM-A、Cx43表达明显降低。免疫荧光检测获得了同样的结果。②PI3K特异性抑制剂LY294002同样抑制了ox-LDL刺激的JAM-A、Cx43表达,表明银杏内酯B降低JAM-A、Cx43表达与抑制Akt磷酸化相关。③白细胞迁移实验表明,银杏内酯B明显减少ox-LDL诱导的单核细胞向内皮细胞下迁移。结论银杏内酯B能抑制ox-LDL刺激的内皮细胞连接蛋白JAM-A、Cx43表达,从而改善血管渗透性,减少白细胞迁移,分子机制可能与抑制PI3K/Akt信号通路活化有关。
- 刘雪青陈北冬鲍利吴伟孙文佳齐若梅
- 关键词：银杏内酯B人脐静脉内皮细胞CX43渗透性
