刘锐
- 作品数:10 被引量:24H指数:3
- 供职机构:哈尔滨医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金:黑龙江省青年科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 来源骨髓的树突状细胞培养方法特征及其合理时间被引量:3
- 2005年
- 目的:观察从骨髓来源的免疫辅佐细胞树突状细胞的培养操作技术及合理的培养时间。方法:实验于2003-10/2004-12在卫生部细胞移植重点实验室进行。树突细胞来源为健康SD大鼠的骨髓细胞,分别加入4种细胞因子:重组大鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子5μg/L,重组大鼠白细胞介素45μg/L,重组大鼠肿瘤坏死因子α10μg/L,重组大鼠γ干扰素20μg/L,共培养2周。每隔2d加细胞因子1次,保持各细胞因子的浓度不变,分离树突细胞采用“培养黏附法”。在培养的第3天吸去上清后重新加入培养液,在培养2周后收获悬浮的树突状细胞,分离树突细胞采用“培养黏附法”。在培养的第1,3,5,7,9,11,13,15天用光学倒置显微镜观察细胞的形态;取一部分细胞在培养的第7,11,13,15天行流式细胞仪检查,并用PE标记的抗大鼠CD86单克隆抗体检测它的成熟度(CD86单抗阳性为成熟)。结果:①树突状细胞的形态:从培养第7天开始细胞周围开始逐渐伸出突起,第13天以后突起五六支左右,且长度逐渐缩短,成熟的树突状细胞伸出长短不等的突起,类似神经细胞的树突。②培养所得的树突状细胞数量:1只大鼠平均得到(1.18±0.21)×107。③树突状细胞的成熟度:培养第7,11,13,15天CD86单抗的阳性率分别为30%,80%,92%,94%。结论:应用骨髓来源的树突状细胞,在两种常规的细胞因子粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子和白细胞介素4基础上加入肿瘤坏死因子α和γ干扰素,培养2周,应用培养黏附法分离树突状细胞,可得到成熟的树突状细胞,且数量较多。
- 吴舰宇宋春芳许评刘锐
- 关键词:树突细胞粒细胞巨噬细胞集落刺激因子白细胞介素4肿瘤坏死因子干扰素Γ
- 脾脏原发性肿瘤诊治体会(附17例报告)被引量:1
- 2008年
- 目的探讨原发性脾脏肿瘤的诊断与治疗规律。方法回顾性分析我院1991年以来收治的原发性脾脏肿瘤患者17例,其中良性7例,恶性10例,全部行脾切除术,2例联合切除胰尾,2例联合行胃部分切除。恶性肿瘤术后均给予化疗及放疗。结果全组无手术死亡。良性病例预后良好。本组7例恶性淋巴瘤分别于术后5个月至12个月死亡;3例血管内皮肉瘤手术后3个月至8个月死亡,死因均为肿瘤复发。结论脾脏原发性肿瘤早期诊断至关重要,脾脏切除是主要的治疗手段,恶性病例术后均辅以化疗及放疗。
- 刘锐张铁民代文杰
- 高压氧微重力培养提高冻存胰岛质量和移植效果的实验研究
- 2009年
- 目的探讨胰岛冻存前后经高压氧细胞旋转培养系统(HORCCS)培养后移植入糖尿病大鼠能否提高胰岛移植的效果。方法将分离纯化的大鼠胰岛分为:A.体外实验组:将各组大鼠胰岛经HORCCS培养或普通培养30d,检测细胞内DNA和胰岛素含量,胰岛存活率,胰岛素分泌水平。B.胰岛移植实验组:将各组大鼠胰岛经HORCCS培养或普通培养7d,然后移植,观察移植受体血糖和胰岛素水平。电镜观察各胰岛移植实验组中培养7d时的胰岛的超微结构改变。结果经高压氧RCCS培养14d的胰岛存活率及胰岛素分泌水平高于普通培养组(P〈0.05)。移植了经HORCCS培养的胰岛后,受体血糖在移植后2周即恢复为正常值,并维持到移植后10周。全部受体维持正常血糖耐受曲线。电镜下可见经HORCCS培养后,冻存复苏胰岛表面形成微小的孔道。结论胰岛冻存前后经高压氧RCCS培养后可以建立营养输送管道,不但有利于氧和营养物质的运输,更有利于胰岛内细胞的均匀一致的冻存,从而减少冻存对胰岛的损害,提高胰岛的分泌活性和成活率。
- 周毅刘锐吴舰宇代文杰宋春芳
- 关键词:胰岛移植高压氧WISTAR冻存微重力
- 提高微囊化新生猪胰岛细胞移植生物相容性和疗效研究被引量:1
- 2009年
- 目的探讨微囊化新生猪胰岛细胞和睾丸Sertoli细胞联合移植以及改变微囊物理特性是否可以提高生物相容性和移植效果。方法动物分6组:实验组1、2,对照组1、2、3、4每组移植(2000±100)个微囊化新生猪胰岛样细胞簇和睾丸Sertoli细胞,每组移植受体7只,将各组微囊移植入受体腹腔内,观察微囊的生物相容性和移植物的生物活性。结果实验组1血糖值于移植后2周降至正常(187±27)mg/dL,明显早于其他各组。并维持至移植后6周。实验组1中腹腔附着微囊数少,其活性率在68%±11%,明显高于游离微囊组的48%±10%,P〈0.05。实验组1中微囊周围细胞过度增生反应最轻,实验组2中呈中度细胞过度增生。结论微囊光滑,规则,直径不宜过大(350±50)μm,包裹1~2个细胞团更有利于减轻囊周过度增生,睾丸Sertoli细胞通过某些因子抑制巨噬细胞的趋化作用,从而减轻细胞过度增生主要是炎性细胞浸润,进而提高移植效果。
- 刘锐冯景宋海彬代文杰吴舰宇周毅
- 关键词:微重力微囊化胰岛
- 腹膜后副神经节瘤破裂致腹腔大出血1例被引量:3
- 2008年
- 代文杰朱化强赵勇刘锐张启龙
- 关键词:腹膜后副神经节瘤出血
- 经肛门三柱法直肠脱垂固定术、肛门缩窄术治疗直肠完全脱垂被引量:9
- 2012年
- 目的观察经肛门三柱法直肠脱垂固定术、肛门缩窄术治疗直肠完全脱垂的临床疗效。方法对我科2009到2010年采用经肛门三柱法直肠脱垂固定术、肛门缩窄术治疗直肠完全脱垂的19例患者进行回顾性分析。结果 19例患者经半年到一年随访全部治愈,无复发,疗效满意。结论经肛门三柱法直肠脱垂固定术、肛门缩窄术治疗直肠完全脱垂,不开腹、痛苦少、疗效确切、消除了开腹手术带来的风险,是一种值得推广的治疗直肠脱垂的方法。
- 王一飞梁德森王艳飞王玉荣刘锐
- 关键词:直肠脱垂
- 应用FMR1基因检测脆性X综合征
- 2004年
- 赵达亚常东王晶陈波刘锐李琳
- 关键词:FMR1基因产前诊断
- 微囊化细胞经脾脏移植治疗糖尿病
- 2008年
- 本研究旨在探讨是否经脾脏移植微囊化胰岛素分泌细胞能够纠正糖尿病小鼠的高血糖状态,从而为糖尿病的细胞治疗选择新的移植部位奠定实验基础。
- 刘锐代文杰宋春芳孙景云周毅
- 关键词:糖尿病小鼠脾脏移植胰岛素分泌细胞高血糖状态细胞治疗
- 血管紧张素Ⅱ对胰岛凋亡及Fas/Fas-L表达影响的实验研究被引量:1
- 2008年
- 目的观察血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)对体外培养犬胰岛细胞凋亡的诱导作用及氯沙坦(losartan)抑制胰岛凋亡和对凋亡相关基因Fas和Fas-L表达的影响。方法将获得的纯化犬胰岛经不同处理培养48h后,采用光镜和透射电镜观察胰岛细胞凋亡情况,原位末端标记法检测胰岛细胞凋亡百分率,免疫组化法和流式细胞术检测胰岛细胞Fas和Fas-L表达。结果体外培养犬胰岛经1.0μmol/L AngⅡ处理48h后,胰岛细胞出现调亡(16.41±3.01)%现象,电镜见细胞皱缩、胞核裂解,电泳显示核酸断裂片呈"梯形"结构,Fas(11.46±1.97)%和Fas-L(14.68±3.51)%表达亦显著增强。氯沙坦组凋亡细胞数减少至(9.25±1.58)%,Fas(6.85±1.89)%和Fas-L(8.16±2.13)%表达减弱。两两比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论AngⅡ诱导胰岛细胞凋亡。凋亡由AT1受体介导,Fas和Fas-L参与其凋亡过程。氯沙坦具有胰岛保护作用。
- 刘锐代文杰周毅宋春芳邢军
- 关键词:糖尿病氯沙坦胰岛细胞凋亡
- 应用骨髓法培养树突状细胞的研究被引量:6
- 2005年
- 目的探讨培养树突状细胞(DC)的最佳方法和合理的培养时间。方法取大鼠的骨髓细胞分别加入4种细胞因子重组大鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rrGMCSF)5μg/L,重组大鼠白细胞介素4(rrIL4)5μg/L,重组大鼠肿瘤坏死因子α(rrTNFα)10μg/L,重组大鼠γ干扰素(rrγIFN)20μg/L培养2周,并用PE标记的抗大鼠CD86单克隆抗体检测它的成熟度。结果从第7天开始细胞周围开始逐渐伸出突起,第13天以后突起5~6支左右,且长度逐渐缩短,成熟的树突状细胞伸出长短不等的突起,类似神经细胞的树突。60只大鼠培养所得的树突状细胞平均为(1.18±0.21)×107第7、11、13、15天的CD86单抗的阳性率分别为30%、80%、92%、94%,随着时间的延长,它的阳性率不断增加,尤以第1周到第2周之间增长的特别明显,但2周以后,树突状细胞的成熟度无明显提高。结论应用骨髓法来培养树突状细胞加入细胞因子rrGMCSF、rrIL-4、rrTNF-α、rr-γ-IFN培养2周,可得到成熟的树突状细胞。
- 吴舰宇宋春芳许评宋纯石于波刘锐
- 关键词:树突状细胞巨噬细胞集落刺激因子大鼠肿瘤坏死因子-Α单克隆抗体检测CD86Γ-IFN