丁克祥
- 作品数:58 被引量:90H指数:8
- 供职机构:南方医科大学更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划国际科技合作与交流专项项目上海市科学技术委员会资助项目更多>>
- 相关领域:医药卫生化学工程轻工技术与工程生物学更多>>
- 重组人神经肽Y受体Y2融合蛋白的表达、纯化及其生物信息学分析研究被引量:1
- 2009年
- 目的在大肠杆菌中表达人神经肽YY2受体,并对之进行纯化、鉴定及生物信息学分析。方法取已构建好且经测序确认无误的重组质粒pET28a-Y2转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达融合蛋白,并经SDS-PAGE检测和Western印迹鉴定,表达产物包涵体经Ni2+-NTA亲和层析纯化。然后利用相关在线软件进行生物信息学分析Y2受体蛋白。结果经IPTG诱导含有pET28a-Y2重组质粒的DE3菌,表达出重组人Y2融合蛋白。重组蛋白经Ni2+-NTA亲和层析进行纯化后,得到了较高纯度的融合蛋白。经相关在线软件分析后获得了Y2受体的相关生物学特性。结论重组质粒pET28a-Y2在大肠杆菌DE3中成功表达,亲和层析纯化后获得较高纯度融合蛋白,并对Y2受体蛋白的生物学特征进行了预测,为进一步研究其生物学功能及其抗体的研制奠定了基础。
- 丁克祥董萍郑永晨杨永鹏朱晓亮韩晋云单志新丁宇丁振华
- 关键词:融合蛋白包涵体纯化生物信息学
- 重组人神经肽Y受体Y5融合蛋白的表达、纯化及其生物信息学分析研究被引量:1
- 2009年
- 目的在大肠杆菌中表达人神经肽YY5受体,并对之进行纯化、鉴定及生物信息学分析。方法取已构建好且经测序确认无误的重组质粒pET28a-Y5转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达融合蛋白,并经SDS-PAGE检测和Western印迹鉴定,表达产物包涵体经Ni2+-NTA亲和层析纯化。然后利用相关在线软件进行生物信息学分析Y5受体蛋白。结果经IPTG诱导含有pET28a-Y5重组质粒的DE3菌,表达出重组人Y5融合蛋白。重组蛋白经Ni2+-NTA亲和层析进行纯化后,得到了较高纯度的融合蛋白。经相关在线软件分析后获得了Y5受体的相关生物学特性。结论重组质粒pET28a-Y5在大肠杆菌DE3中成功表达,亲和层析纯化后获得较高纯度融合蛋白,并对Y5受体蛋白的生物学特征进行了预测,为进一步研究其生物学功能及其抗体的研制奠定了基础。
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- 关键词:融合蛋白包涵体纯化生物信息学
- 人脂肪细胞增殖分化激动剂受体YⅡ基因的克隆及序列分析
- 目的:克隆人脂肪细胞增殖分化激动剂受体YⅡ(hAAPD YⅡR)基因,并鉴定该克隆基因序列的正确性。方法:从人的脂肪组织中提取总RNA并进行反转录,以此为模板用PCR扩增人脂肪细胞增殖分化激动剂受体YⅡ(hAAPD YⅡ...
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- 关键词:肥胖基因克隆DNA序列分析
- 人脂肪细胞增殖分化激动剂的基因克隆及序列分析
- 目的:克隆人脂肪细胞增殖分化激动剂(hAAPD)基因,并鉴定该克隆基因序列的正确性。方法:根据Genebank中收录的人脂肪细胞增殖分化激动剂(hAAPD)基因序列,设计该基因上下游序列,经过PCR反应合成人脂肪细胞增殖...
- 丁克祥董萍郑永晨杨永鹏朱晓亮韩晋云单志新丁宇丁振华
- 关键词:基因克隆DNA序列分析
- 与人体肥胖相关的神经肽Y受体Y2基因的克隆及序列分析被引量:2
- 2009年
- 目的克隆与肥胖相关的人神经肽Y受体Y2(NPY2R)基因,并鉴定该克隆基因序列的正确性。方法从人的脂肪组织中提取总RNA并进行反转录,以此为模板用PCR扩增NPY2R基因的eDNA,然后与pET28a+载体重组,筛选阳性克隆和DNA序列分析鉴定,测序后与GeneBank中NPY2R基因进行同源性比较和序列分析。结果PCR扩增出一个1100bp左右的DNA片段,与载体重组和DNA序列分析鉴定,DNA序列分析显示克隆的DNA片段是人NPY2R基因,且所克隆的基因共编码381个氨基酸,分子量为4.2kD,与GeneBank中NPY2R基因序列同源性达100%。结论克隆的人NPY2R基因与GeneBank中NPY2R序列完全一致,为进一步应用分子生物学技术深入研究NPY2R与人体肥胖发生、发展及转化等相关作用机制及应用该基因进行其基因蛋白表达奠定了基础。
- 丁克祥董萍郑永晨杨永鹏朱晓亮韩晋云单志新丁宇丁振华
- 关键词:肥胖基因克隆DNA序列分析
- 皮肤美容保健微透析疗法及其作用机制
- 2014年
- 正常人皮肤总面积约为1.6m2,皮肤组织结构由内到外分为表皮层、真皮层和皮下组织,厚度约0.5~4.0mm(不包括皮下脂肪组织).皮肤不仅有极其丰富的毛细血管和神经末梢分布,还有皮肤附属器官,包括毛孔、皮脂、汗腺等,其中汗腺就有200万~260万个.因此,人皮肤除最外面的屏障保护功能和体温调节功能外,还有呼吸、分泌、排泄、感觉、传导等多种重要生理功能.面部皮肤与美容和抗衰老最为密切的在表皮层(厚度0.07~2.0mm)及其角质层,但最为重要的在真皮层.这两层皮肤结构也是面部皮肤最为敏感,最易中毒和损伤的部位.
- 杨永鹏董萍左夏林丁宇郝林琳罗迎霞尹晴朱晓亮梁虹丁克祥
- 关键词:美容保健透析疗法表皮层皮下组织神经末梢
- 多指标人体皮肤测量系统研究被引量:3
- 2005年
- 介绍了一种皮肤多指标测量系统的设计方案,包括皮肤生物信息采集电路的设计,液晶触摸屏模块显示和操作功能的实现,USB2.0通信部分完成设备与主机之间的数据传输。
- 曾勇郑建彬王攀丁克祥
- 关键词:皮肤生物信息液晶LCDUSB
- 单克隆抗体作为抗体工程药物在部分老年病治疗中的基础研究和临床应用
- 2010年
- 抗体工程药物是生物制药技术领域的重要组成部分之一。随着杂交瘤细胞、基因工程和分子免疫学、抗体库等技术不断建立和完善以及发展和应用,为单克隆抗体药物的制备和规模化、规范化生产奠定了良好的基础,也使抗体药物的研制与应用达到了新的高度。特别是,单克隆抗体药物的特异性高、均质性好、亲和力强、靶向性佳、毒副作用小、疗效确切等特点使其成为当今基因工程药物研究的热点。而老年病因其复杂性、多样性、多系统器质性病变及难治性等特点,在有效的临床药物治疗方面一直是同学科领域关注的焦点和重点。为此,本文将对某些单克隆抗体目前在老年病中的临床研究和应用情况进行综述,并对其未来应用前景和发展方向及其趋势进行展望,期待有些抗体药物能在老年病的临床诊断和治疗上得以广泛应用,也为临床相关老年性疾病的诊断和治疗带来新的希望。
- 丁克祥董萍杨永鹏尹晴韩晋云丁宇丁振华
- 关键词:单克隆抗体老年病
- 人脂肪细胞增殖分化激动剂受体YV基因的克隆及序列分析
- 目的:克隆人脂肪细胞增殖分化激动剂(hAAPD)受体YV(YVR)基因.并鉴定该克隆基因序列的正确性。方法:从人的脂肪组织中提取总RNA并进行反转录,以此为模板用PCR扩增人脂肪细胞增殖分化激动剂(hAAPD)受体YV(...
- 丁克祥董萍郑永晨杨永鹏朱晓亮韩晋云单志新丁宇丁振华
- 关键词:脂肪细胞激动剂基因克隆DNA序列细胞增殖
- 文献传递
- 重组人神经肽Y融合蛋白的原核表达、纯化及其多克隆抗体制备与鉴定被引量:1
- 2011年
- 目的:构建人神经肽Y(NPY)基因的原核表达载体,诱导表达重组蛋白,制备兔抗人NPY抗血清。方法:取已构建好且经测序确认无误的再组质粒pET28a—NPY转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达融合蛋白,并经SDS—PAGE检测和Western印迹鉴定,表达产物包涵体经Ni^2+-NTA亲和层析纯化,以纯化后的融合蛋白pET28a—NPY为抗原免疫家兔,获得抗血清,Western blotting、ELISA法鉴定获得的抗血清。结果经IPTG诱导含有pET28a—NPY重组质粒的DE3菌,表达出重组人NPY融合蛋白。重组蛋白经Ni^2+-NTA亲和层析进行纯化后,得到了较高纯度的融合蛋白,用纯化的融合蛋白免疫家兔制备了多克隆抗体,Western blotting、ELISA法证实多克隆抗体制备成功。结论:成功表达了人NPY蛋白并获得了其多克隆抗体,为进一步研究人NPY蛋白的功能奠定了基础。
- 丁克祥董萍杨永鹏孙乐丁银巧郑宇浩尹晴韩晋云丁宇丁振华
- 关键词:原核表达蛋白纯化多克隆抗体