高弘
- 作品数:10 被引量:22H指数:3
- 供职机构:清华大学化学工程系生物化工研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:化学工程轻工技术与工程生物学石油与天然气工程更多>>
- 热带假丝酵母肉毒碱乙酰转移酶酶活测定及重组菌的性质被引量:2
- 2005年
- 建立了快速部分提纯和测定热带假丝酵母中肉毒碱乙酰转移酶 (carnitine acetyltransferase, CAT) 酶活的方法. 并考察了重组热带假丝酵母的CAT酶活、产酸能力及烷烃转化率. 结果表明, 重组菌的 CAT酶活比原始菌降低了45%, 胞内二元酸通过β 氧化的无益消耗得到有效抑制. 相应地, 重组菌的产酸能力和烷烃转化率分别提高了11%和12%.
- 张剑高弘李春曹竹安
- 关键词:长链二元酸重组菌热带假丝酵母
- 生物催化生产十三碳二元酸中β-氧化途径的代谢调控
- 长链α,ω-二元酸是一种重要的精细化学产品。热带假丝酵母(Candida tropicalis)可以利用烷烃和脂肪酸通过生物氧化来合成从C11到C18的长链二元酸,代谢过程中二元酸的过度β-氧化会造成产品得率下降。本文以...
- 高弘
- 关键词:热带假丝酵母二元酸基因重组补料发酵
- 文献传递
- H_2O_2对热带假丝酵母醇氧化酶的影响及其作用机理分析被引量:3
- 2004年
- 考察了H2 O2 对热带假丝酵母代谢烷烃生产二元酸过程中醇氧化酶 (fattyalcoholoxidase ,AOX)的影响。研究表明 :2mmol L和 5mmol L的H2 O2 对AOX的比酶活有明显的促进作用 ,分别比对照提高了 68 2 %和 82 9%。研究还发现 ,H2 O2 是以超氧阴离子自由基等形式在胞内存在 ,并对H2 O2 在代谢过程中的作用机理进行了分析。
- 张剑李春高弘曹竹安
- 关键词:H2O2热带假丝酵母生物法生产长链二元酸
- 肉毒碱乙酰转移酶基因敲除对长链二元酸生产代谢过程的影响被引量:7
- 2005年
- 在利用热带假丝酵母发酵生产长链二元酸的过程中 ,脂肪酸将进入 β 氧化途径 ,代谢产生能量 ,从而降低产物收率。首次以负责运输的肉毒碱乙酰转移酶为改造目标 ,在肉毒碱乙酰转移酶基因中插入潮霉素B抗性基因 ,构建DNA转化质粒 ,并进行一次同源重组 ,得到肉毒碱乙酰转移酶基因单拷贝敲除的基因工程菌。根据摇瓶实验结果 ,该基因工程菌与原始菌株相比 ,十三碳二元酸的产量与摩尔转化率分别提高了 13 0 %和 11 8%。
- 高弘张剑华玉涛李春曹竹安
- 关键词:十三碳二元酸热带假丝酵母同源重组代谢调控
- 长链二元酸代谢中肉毒碱脂酰转移酶的作用被引量:3
- 2003年
- 肉毒碱脂酰转移酶包括肉毒碱棕榈酰转移酶、肉毒碱乙酰基转移酶和肉毒碱辛酰基转移酶 ,它们对脂肪酸的进一步β 氧化代谢起到了转运的作用。综述近年来对肉毒碱脂酰转移酶族成员酶学特性的研究进展 ,探讨在热带假丝酵母 (Candidatropicalis)
- 高弘李春华玉涛焦鹏曹竹安
- 关键词:长链二元酸代谢脂肪酸
- CAT基因敲除对热带假丝酵母产DCA13代谢网络的影响被引量:3
- 2006年
- 肉毒碱乙酰转移酶在脂肪酸β-氧化过程中起着重要作用.利用同源重组技术,构建了热带假丝酵母CAT基因单拷贝缺失菌CZ-15和双拷贝缺失菌CKC-11后,发现CZ-15的β-氧化过程受到抑制,与原始菌F10-1相比,十三碳二元酸的产量和烷烃转化率都得到了明显提高,菌体生长情况与F10-1基本一致;CKC-11则无法代谢烷烃,菌体生长也受到了较大的影响.采用代谢动力学模型对发酵数据进行了计算与分析,实验结果与模型相符.根据实验和模型计算结果完善了热带假丝酵母代谢葡萄糖和十三碳二元酸的途径.
- 高弘黄英明刘铭张剑华玉涛曹竹安
- 关键词:十三碳二元酸热带假丝酵母代谢网络重组菌
- 热带假丝酵母及其重组菌产十三碳二元酸的补糖发酵实验被引量:1
- 2006年
- 利用热带假丝酵母原始菌F10-1及已构建的肉毒碱乙酰转移酶基因单拷贝缺失重组菌CZ-15,在5L发酵罐中进行了补糖发酵批式培养,生产十三碳二元酸(DCA13).结果表明,肉毒碱乙酰转移酶基因单拷贝缺失后,CZ-15菌株的最佳补糖时间和补糖浓度都与原始菌F10-1不同.采用补糖工艺后,F10-1与CZ-15的十三碳二元酸的产量分别提高了25.0%和23.4%,达到99.5和108.1g/L,烷烃转化率分别提高了35.5%和28.6%.
- 高弘刘铭黄英明华玉涛曹竹安
- 关键词:十三碳二元酸热带假丝酵母基因工程菌
- 热带假丝酵母基因工程重组菌的构建方法
- 本发明公开了属于生物化工技术领域的涉及一种热带假丝酵母基因工程重组菌的构建方法。其构建方法是以热带假丝酵母工业生产菌株为出发菌株,阻断了一个拷贝的热带假丝酵母中负责β-氧化过程转运途径被部分阻断的肉毒碱乙酰辅酶CAT基因...
- 曹竹安高弘华玉涛焦鹏刘铭黄英明
- 文献传递
- 十三碳二元酸发酵与肉毒碱乙酰基转移酶酶活动力学研究
- 2004年
- 在利用热带假丝酵母发酵生产十三碳二元酸(DCA13)的过程中,建立了用荧光法测定酵母体内肉毒碱乙酰基转移酶(CAT)酶活的方法,方法简单,重现性高,测量精确。研究了热带假丝酵母中CAT酶活动力学与产酸速率的关系,结果表明:代谢前期细胞以生长为主,CAT酶活较高可提供更多的生长动力,而代谢后期细胞进入产酸期,CAT酶活与产酸速率的变化趋势成反比,即产酸速率高时,CAT的酶活较低。
- 高弘李春乔岚华玉涛曹竹安
- 关键词:热带假丝酵母
- 烃类在三甘醇和四甘醇中无限稀释活度系数的测定与关联被引量:2
- 2002年
- 用气相色谱法分别测定了苯、甲苯、乙苯、正庚烷、正辛烷、正壬烷和正癸烷在三甘醇和四甘醇中的无限稀释活度系数 ,测定温度范围为 5 0~ 13 0℃。用修正的UNIFAC模型 (Dortmund)对上述不同温度下的无限稀释活度系数实验数据进行关联 ,得到了三甘醇和四甘醇与其它基团的相互作用参数 ,并将计算结果与实测值进行了比较。
- 孙平平高光华高弘
- 关键词:烃类三甘醇四甘醇炼油芳烃抽提无限稀释活度系数芳烃