陈静
- 作品数:16 被引量:48H指数:4
- 供职机构:北京大学深圳医院更多>>
- 发文基金:深圳市科技计划项目国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 小鼠和人生精特异性新基因TSCPA的表达分析
- 目的:筛选与精子发生相关的睾丸特异性新基因。
方法:将不同发育阶段的小鼠睾丸组织cDNA探针与Affymetrix全基因组芯片进行杂交,通过杂交信号的比较,筛选出特异表达的基因。用生物学信息软件对该基因进行生物...
- 余振东蔡志明吴波唐爱发陈静郭新秦洁桂耀庭
- 关键词:精子发生睾丸组织RT-PCR分析
- 文献传递
- 686例生精障碍患者染色体核型与Y染色体微缺失分析被引量:6
- 2018年
- 目的利用染色体核型分析及Y染色体微缺失基因检测方法探索无精子症及严重少精子症患者的遗传学病因。方法收集无精子症患者490例、严重少精子症患者196例,使用传统G显带方法进行染色体核型分析,并使用15个Y染色体序列标签位点进行基因检测,对检测结果进行统计学分析。结果 490例无精子症患者共检出染色体多态性49例(10%)、异常核型30例(6.12%),Y染色体微缺失70例(14.29%),196例严重少精子症患者共检出染色体多态性15例(7.65%),Y染色体微缺失22例(11.22%),检测结果具有统计学意义。结论无精子症及严重少精子症患者具有较高的染色体核型异常与Y染色体微缺失发生率。
- 张永科法萍萍谢君王贺陈静桂耀庭
- 关键词:无精子症严重少精子症核型分析Y染色体微缺失
- Ropporin基因在人睾丸和精子中的鉴定与蛋白定位
- 2009年
- 目的:对人睾丸和精子中的Ropporin基因表达进行鉴定和蛋白定位,为进一步研究其在精子中的作用奠定基础。方法:应用免疫组织化学Western blotting和RT-PCR及间接免疫荧光方法检测Ropporin在正常人睾丸组织射出精子中的表达特征。结果:在睾丸组织中,Ropporin主要表达在圆形精子细胞阶段;在精液精子中,mRNA和蛋白水平上均检测出Ropporin的表达,且蛋白主要定位在精子鞭毛的主段和末段上。结论:人睾丸圆形精子细胞和精液精子中均有Ropporin mRNA和蛋白的表达,其可能与精子运动有关。
- 陈静王勇孙亮来永庆桂耀庭蔡志明
- 关键词:睾丸精子运动基因表达
- Ropporin基因在人精子中的表达和意义
- 2009年
- 目的检测ropporin基因在人精子中的表达。探讨Ropporin抗体对人精子运动的影响,评价Ropporin蛋白在精子运动中的功能。方法收集正常男性精子,非连续梯度离心法分离精子,用RT-PCR、免疫印迹和免疫荧光方法检测ropporin基因在精子中的表达和蛋白定位;将纯化精子分别在含不同浓度Ropporin抗体的培养液中孵育(0,0.8,4和20μg/mL),在不同时间点(1,2,6h)用精子计算机辅助分析系统(computer-assisted sperm analysis,CASA)检测精子活动力。结果RT-PCR、免疫印迹和免疫荧光方法均检测出ropporin基因在精子中表达;免疫荧光表明Ropporin主要定位在精子鞭毛的主段和末段;抗体实验显示抗体孵育1h、2h、6h后精子的快速前向运动(a级)和慢速前向运动(b级)均明显受到抑制,并显示剂量依赖性。结论Ropporin在精子鞭毛的主段和末段上的表达与精子的运动密切相关。
- 陈静王勇来永庆李慧颜秋霞桂耀庭蔡志明
- 关键词:基因表达精子能动性
- 小鼠和人生精特异性新基因TSCPA的表达分析
- 目的:筛选与精子发生相关的睾丸特异性新基因。方法:将不同发育阶段的小鼠睾丸组织cDNA探针与Affymetrix全基因组芯片进行杂交,通过杂交信号的比较,筛选出差异表达的基因。用生物学信息软件对该基因进行生物学信息分析。...
- 余振东吴波唐爱发陈静郭新秦洁
- 关键词:精子发生隐睾
- 文献传递
- 组织标本库规范化的建立及其在泌尿外科的发展被引量:2
- 2011年
- 随着后基因组学和蛋白质组学的发展,人类组织标本的收集及其质量的保证已成为影响人类疾病研究和推广新诊疗技术的关键.因此,收集保存和管理高质量的标本资源非常重要.世界各国先后建立起了单病种和多病种的组织标本库,在泌尿外科领域也有相应发展,并逐渐规范化标本的收集、处理和储存程序,形成了标准化的操作体系.收集标本的同时也引发一系列法律、伦理道德、安全等问题.本文就组织标本库规范化的建立及其在泌尿外科的发展所涉及的问题作一综述.
- 江冰华陈静李贤新蔡志明
- 关键词:泌尿科学标本
- LIN28在膀胱癌和膀胱癌细胞系中的表达及意义被引量:1
- 2011年
- 目的:探讨LIN28在膀胱癌组织和细胞系中表达情况,以及与microRNA初级Let-7g(pri-Let-7g)之间关系,推测其可能临床意义及对肿瘤进展的影响。方法:采用常规RT-PCR、miRNA转录、免疫荧光和免疫组化方法,检测LIN28 mRNA和pri-Let-7g表达,以及LIN28蛋白表达定位。结果:2例膀胱癌细胞系均表达LIN28 mRNA,T24表达较强,免疫荧光显示这两个细胞系均表达LIN28蛋白,阳性部位位于细胞胞质,T24荧光强度强于5637。所选10例膀胱癌和相应癌旁组织均表达LIN28 mRNA,二者并无明显不同,与临床分级也无明确关系。免疫组化显示癌组织LIN28表达阳性并定位于胞质,而癌旁正常组织LIN28表达为阴性。此外,两个细胞系pri-Let-7g表达较强,而癌和癌旁组织的pri-Let-7g表达强度无明显差异,需进一步检测其成熟Let-7g在这些组织中是否存在不同,以明确这些miRNA是否发生生物合成的转录后阻断。结论:明确T24和5637两个膀胱癌细胞系均可作为研究LIN28、Let-7与其相应靶基因关系的体外实验模型。尽管并不确定膀胱癌和癌旁组织LIN28、Let-7g表达强度与临床分级是否相关,但至少明确LIN28/LIN28在膀胱癌中表达,为探讨LIN28和Let-7在泌尿系统来源的其他恶性肿瘤中的作用提供借鉴和实验依据。
- 郭新张艳敏孙亮周亮王勇漆正宇秦洁李贤新陈静桂耀庭蔡志明
- 关键词:膀胱癌LET-7
- 电压依赖性阴离子通道基因在人精子中的表达及其临床意义被引量:1
- 2009年
- 目的:筛选与精子活力相关的基因。方法:将活力正常者与弱精子症者精子cDNA与Affymetrix全基因组芯片进行杂交,筛选出差异表达基因。RT-PCR分析该基因在人体不同组织及精子中的表达,并比较该基因在活力正常和活力低下的人精子中表达的差异。结果:芯片结果分析筛选出差异表达基因:电压依赖性阴离子通道(VDACs)基因。VDACs包括VDAC1、VDAC2、VDAC33个亚型,它们均在人精子中表达。与活力正常组精子VDAC2相对表达量(0.803±0.043)比较,VDAC2在弱精子症组精子的相对表达量(0.568±0.036)显著降低(P<0.01)。结论:VDAC2的表达减少可能与精子中活力降低有关。
- 许祥王勇余州陈静郭萌桂耀庭蔡志明
- 关键词:基因芯片弱精子症电压依赖性阴离子通道逆转录-多聚酶链反应
- 外周致密纤维1在人精子中的表达差异及其意义被引量:9
- 2009年
- 目的:比较外周致密纤维1(ODF1)在健康男性和弱精子症患者精子中的表达差异。方法:根据WHO标准,收集正常男性和弱精子症患者的精液标本各20份,Percoll非连续梯度离心法分离精子,收集95%Percoll以下和57%与76%Percoll层之间的精子,以排除生精细胞和白细胞的污染;采用逆转录-多聚酶链式反应(RT-PCR)和Western印迹方法,从mRNA和蛋白水平检测ODF1的表达。结果:RT-PCR结果表明,与正常男性组相比,ODF1在弱精子症患者精子中的mRNA表达水平显著降低(2.79±0.28vs1.35±0.25,P<0.05);免疫印迹与RT-PCR结果一致,与正常男性组相比,弱精子症患者精子中的ODF1蛋白的表达亦显著降低(3.64±0.34vs1.44±0.26,P<0.05)。结论:ODF1在弱精子症患者精子中的表达显著降低,提示其可能与精子活动力低下有关。
- 陈静王勇许祥余州桂耀庭蔡志明
- 关键词:精子活动率弱精子症基因表达
- Ropporin在正常男性和弱精子症患者精液精子中的表达差异被引量:2
- 2009年
- 目的比较Ropporin在健康男性和弱精子症患者精液精子中的表达差异。方法收集健康男性和弱精子症患者的精液精子,为了排除生精细胞和白细胞的污染,精液标本经非连续性Percoll梯度离心和分离纯化。采用荧光定量RT-PCR和免疫细胞化学方法,从基因和蛋白水平检测精子Ropporin的表达。结果荧光定量RT-PCR显示,Ropporin mRNA在正常男性和弱精子症患者精液精子中均有表达。与正常男性相比, Ropporin在弱精子症患者精子中的表达显著降低。免疫细胞化学结果显示,Ropporin蛋白在正常男性精子的表达水平明显高于弱精子症患者,该结果与荧光定量RT-PCR结果相一致。结论Ropporin在弱精子症患者精子中的表达显著降低,可能是导致精子运动能力低下的原因之一。
- 王勇陈静许祥余州桂耀庭
- 关键词:弱精子症荧光定量RT-PCR免疫组织化学