郭雪
- 作品数:11 被引量:1H指数:1
- 供职机构:中国检验检疫科学研究院更多>>
- 发文基金:国家质检总局科技计划项目国家公益性行业科研专项国家科技重大专项更多>>
- 相关领域:医药卫生农业科学更多>>
- 哺乳动物细胞西尼罗病毒样颗粒表达、纯化及其鉴定被引量:1
- 2011年
- 目的利用哺乳动物细胞表达含有西尼罗病毒(WNV)prM和E蛋白,形成病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs),为西尼罗病毒感染的免疫诊断试剂的研制奠定基础。方法筛选典型西尼罗病毒株,构建重组质粒,转染293T细胞,表达并纯化西尼罗病毒prM-E蛋白,利用透射电镜、免疫印迹试验、间接免疫荧光实验(IFA)和酶链免疫吸附试验(ELISA)对表达产物进行鉴定。结果重组质粒转染细胞后产生病毒样颗粒(viruslike particles VLPs),转染细胞上清纯化物中透射电镜观察到重组蛋白形成的球型颗粒,免疫印迹试验和间接免疫荧光试验表明,表达的病毒样颗粒蛋白能够与抗西尼罗病毒抗体特异结合,具有良好的抗原性;间接ELISA证实,重组蛋白可以作为抗原用于检测患者血清特异性抗体。结论在哺乳动物细胞中表达的西尼罗病毒样颗粒具有良好的抗原性,为西尼罗病毒感染快速特异诊断试剂研制奠定了基础。
- 咸庆杰姜宝芹郭雪王琳杨鹏飞张丽萍平芮巾岳启安胡孔新
- 关键词:西尼罗病毒293T细胞病毒样颗粒间接免疫荧光试验
- 一种用于流感病毒亚单位疫苗研究的合成多肽
- 本发明公开了一种用于流感病毒亚单位疫苗研究的合成多肽,该合成多肽的序列为:CVKNGTYDYPQYSEEARLNREEIS。本发明多肽合成过程简单快速,而且所得到的多肽偶联抗原就有较广泛的保护作用。对于亚单位疫苗的研制,...
- 胡孔新王琳郭雪杨鹏飞平芮巾张丽萍马雪征
- 文献传递
- 一种用于特异性检测新型H1N1流感病毒的合成多肽
- 本发明公开了一种用于快速检测新型H1N1流感病毒的特异性合成多肽,其序列为:CKYVKSTKLRLATGLRNVPS。本发明特异性合成多肽具有抗原制备简单,不存在生物安全问题,且比天然微生物或寄生虫蛋白抗原的特异性强,检...
- 胡孔新王琳郭雪杨鹏飞平芮巾张丽萍马雪征
- 文献传递
- 圣路易斯脑炎病毒样颗粒的真核表达、纯化与鉴定
- 2011年
- 目的 利用293T细胞表达、纯化圣路易斯脑炎病毒样颗粒(Virus like particles,VLPs),为研制圣路易斯脑炎病毒免疫诊断试剂奠定基础.方法 构建含圣路易斯脑炎病毒PrM和E基因的重组质粒pcDNA5/FRT-SJME,瞬时转染293T细胞,表达并纯化重组蛋白,通过透射电镜、间接免疫荧光试验、Western-Blot和ELISA对其进行鉴定.结果 表达的重组蛋白形成50 nm的球型颗粒,能与抗圣路易斯脑炎病毒抗体产生特异性反应,与部分黄病毒属阳性血清发生交叉反应.结论 已成功在哺乳动物细胞中表达并纯化了圣路易斯脑炎病毒样颗粒,其具有良好的抗原性和完整的颗粒形态,为进一步研制圣路易斯脑炎病毒感染的免疫诊断试剂奠定了基础.
- 郭雪刑福彬咸庆杰王琳杨鹏飞张丽萍平芮巾胡孔新
- 关键词:脑炎病毒荧光抗体技术酶联免疫吸附测定
- 一种用于流感病毒亚单位疫苗研究的合成多肽
- 本发明公开了一种用于流感病毒亚单位疫苗研究的合成多肽,该合成多肽的序列为:CVKNGTYDYPQYS EEARLNREEIS。本发明多肽合成过程简单快速,而且所得到的多肽偶联抗原有较广泛的保护作用。对于亚单位疫苗的研制,...
- 胡孔新王琳郭雪杨鹏飞平芮巾张丽萍马雪征
- 一种用于特异性检测新型H1N1流感病毒的合成多肽
- 本发明公开了一种用于快速检测新型H1N1流感病毒的特异性合成多肽,其序列为:CKYVKSTKLRLATGLRNVPS。本发明特异性合成多肽具有抗原制备简单,不存在生物安全问题,且比天然微生物或寄生虫蛋白抗原的特异性强,检...
- 胡孔新王琳郭雪杨鹏飞平芮巾张丽萍马雪征
- 检测人西尼罗病毒IgG抗体的间接ELISA试剂盒及其检测方法
- 本发明公开一种检测人西尼罗病毒IgG抗体的间接ELISA试剂盒及其检测方法,本发明应用哺乳动物细胞表达系统表达的西尼罗病毒样颗粒为包被抗原建立了ELISA方法,由于病毒样颗粒(VLPs)是含有一个或多个病毒结构蛋白的空心...
- 胡孔新咸庆杰郭雪杨鹏飞平芮巾张丽萍马雪征
- 文献传递
- 圣路易斯脑炎病毒样颗粒的制备方法及其应用
- 本发明公开了一种圣路易斯脑炎病毒样颗粒的制备方法及其应用,本发明中通过哺乳动物细胞表达系统得到的圣路易斯脑炎病毒样颗粒是非复制型的,结构接近天然病毒,且免疫原性好,可作为天然病毒抗原建立检测圣路易斯脑炎感染的免疫检测方法...
- 胡孔新郭雪咸庆杰杨鹏飞平芮巾张丽萍马雪征
- 文献传递
- 甲型流感病毒亚型抗原肽合成及其免疫反应性比较鉴定
- 2010年
- 〔目的〕针对甲型流感病毒血凝素(Hemagglutinin,HA)蛋白同一区段不同亚型的合成肽,比较分析其免疫反应性和交叉反应性,获取具有免疫诊断学意义的抗原肽。〔方法〕通过生物信息学分析,针对新甲型H1N1、季节性H1N1、H2N2、H3N2和H5N1共5种亚型甲型流感病毒,选择2个HA肽段区位设计2组抗原肽段(19肽和23肽)合成,每组5条共10条,并分别与钥孔戚血蓝蛋白(KLH)和牛血清白蛋白(BSA)载体偶联形成全抗原后,免疫家兔制备兔源抗体,建立免疫反应性筛选的酶联免疫吸附法(ELISA),比较合成肽的免疫反应性。〔结果〕以阳性血清平均OD490nm/阴性血清平均OD490nm(P/N)值为判断标准,筛选出具有免疫反应性的2条特异性抗原肽(KYVKSTKLRLAT-GLRNVPS,VKNGTYDYPQYSEEARLNREEIS),前者具有亚型特异反应性,后者则具有一定的亚型通用免疫反应性。〔结论〕筛选出具有免疫反应性合成肽抗原,为进一步建立流感病毒亚型的快速鉴定诊断方法奠定了基础。
- 郭雪王琳杨鹏飞咸庆杰张丽萍平芮巾胡孔新
- 关键词:合成肽血凝素免疫反应性交叉反应性
- 一种利用气相色谱-质谱联用法检测双丙酚丁的方法及其应用
- 本发明属于分析化学检测技术领域,具体涉及一种利用气相色谱‑质谱联用法检测双丙酚丁的方法及其应用。该方法利用气相色谱‑质谱联用法建立了双丙酚丁含量的检测方法。经方法学验证,方法的线性关系良好,灵敏度高,专属性好,且具有较高...
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