郭春苗
- 作品数：4 被引量：10H指数：2
- 供职机构：西北农林科技大学园艺学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 苹果AsA代谢和合成相关基因的克隆及其表达与果实AsA积累关系的研究(摘要)
- 抗坏血酸(AsA)不仅是植物自身必不可少的抗氧化剂和许多酶的辅因子,也是人类主要的维生素C来源,但目前对于果实AsA的形成机制并不清楚。本文以苹果(Malus domestica Borkh cv.Gala)为材料,在本...
- 李明军马锋旺梁东张敏郭春苗
- 关键词：苹果抗坏血酸克隆
- 文献传递
- 苹果L-半乳糖-1-磷酸磷酸酶cDNA克隆及其表达被引量：5
- 2011年
- 【目的】了解苹果果实L-半乳糖-1-磷酸磷酸酶(L-galactose-1-phosphate phosphatase,GPP)基因的特性,探索苹果GPP基因表达特性及其与抗坏血酸(ascorbic acid,AsA)水平的关系。【方法】通过RT-PCR从苹果果实中克隆GPP全长cDNA,分析其序列特征,进行原核表达,制备GPP特异抗体,分析GPP mRNA及其蛋白表达水平与苹果不同组织AsA的关系。【结果】从‘嘎啦’苹果果实中克隆的GPP cDNA(GenBank登录号为FJ752240)包含的最大开放阅读框(open reading frame,ORF)为813 bp,编码270个氨基酸残基,预测分子量为29 kD,该基因与其它植物报道的GPP基因具有较高的相似性,但与肌醇-1-磷酸磷酸酶基因差异较大。构建的pET-32a(+)-GPP载体在大肠杆菌BL21(E.coli BL21)中异源表达后,获得主要以包涵体存在约50 kD的融合蛋白GPP-His(His约21 kD)。以该蛋白制备抗体,与重组蛋白的Western杂交表明该抗体能与GPP发生特异反应。对苹果可溶性蛋白杂交显示,苹果体内GPP蛋白约33 kD。在苹果不同组织中,GPP mRNA与蛋白质的相对表达水平与AsA含量存在明显的一致性。【结论】以单体形式存在的苹果GPP蛋白具有翻译后修饰特性,且该基因的表达在苹果AsA合成调控中可能起重要作用。
- 郭春苗李明军马锋旺梁东张敏
- 关键词：苹果多克隆抗体
- 苹果GPP和IMP基因的cDNA克隆、原核表达及抗体制备
- 抗坏血酸（AsA）是生物体内重要的抗氧化剂和很多酶的辅因子,植物体内的AsA是人类天然AsA的来源。作为大众水果的苹果,其AsA含量并不高,严重影响了其品质。研究植物AsA的合成代谢途径进而改善植物组织中AsA的含量对人...
- 郭春苗
- 关键词：克隆原核表达多克隆抗体
- 文献传递
- 猕猴桃GalUR表达与抗坏血酸积累的关系被引量：5
- 2011年
- 通过RT-PCR从美味猕猴桃(Actinidia deliciosa)果实中克隆了D-半乳糖醛酸还原酶(GalUR)全长cDNA序列,并分析其序列特征,进行原核表达,制备特异抗体,分析其mRNA及蛋白表达水平与果实发育过程及不同组织中抗坏血酸(AsA)合成和积累的关系。结果表明:克隆的GalURcDNA(GenBank登录号为GU339035)包含的最大开放阅读框(open reading frame,ORF)为990bp,编码329个氨基酸残基,预测分子量为37kD,与报道的草莓等其他植物GalUR具有较高的相似性。构建的pET-32a(+)-GalUR载体在大肠杆菌BL21(E.coliBL21)中异源表达后,获得了主要以包涵体存在约58kD的融合蛋白GalUR-His(His约21kD)。以该蛋白制备抗体,与重组蛋白的Western杂交表明该抗体能与GalUR蛋白发生特异反应。对猕猴桃可溶性蛋白杂交显示,猕猴桃体内GalUR蛋白的分子量约37kD。在猕猴桃不同组织和发育过程中,GalUR表达水平与AsA含量表现为高度一致,但前体饲喂发现,与L-半乳糖相比,D-半乳糖醛酸并不能有效促进猕猴桃AsA的合成。这些结果表明以单体形式存在的GalUR与猕猴桃AsA合成有着密切关系,但它可能并不是猕猴桃AsA积累的主要调控环节。
- 李明军刘军梁东郭春苗马锋旺
- 关键词：猕猴桃原核表达维生素C
