赵鹏
- 作品数:10 被引量:9H指数:2
- 供职机构:北京化工大学生命科学与技术学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金北京市自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:生物学化学工程医药卫生更多>>
- 三种不同磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因的克隆、表达及其对宿主菌生长的影响被引量:1
- 2014年
- 应用PCR技术分别克隆了集胞藻6803、鲍曼不动杆菌和大肠杆菌的磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)基因,构建重组大肠杆菌。SDS-PAGE凝胶电泳结果显示,来自集胞藻6803和大肠杆菌的PEPC实现了高效表达,而来自鲍曼不动杆菌的PEPC表达较弱,提示密码子偏好性的影响。前两菌提前进入对数生长期,来自鲍曼不动杆菌PEPC工程菌却延迟生长,但这3种重组菌发酵24 h后的生物量与对照菌几乎相同。如果排除质粒复制造成的代谢负荷,过表达PEPC促进了宿主菌的生长,推测是因为重排了代谢流量。
- 李会玉赵鹏葛喜珍田平芳
- 关键词:磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶CO2固定集胞藻6803鲍曼不动杆菌大肠杆菌
- 肺炎克雷伯杆菌表达吡咯喹啉醌依赖性聚乙烯醇脱氢酶
- 2019年
- 聚乙烯醇脱氢酶(PVADH)是降解聚乙烯醇(PVA)的关键酶,大肠杆菌或毕赤酵母生产PVADH需额外添加辅酶吡咯喹啉醌(PQQ)才具活性。为了降低添加PQQ的成本,在PQQ天然生产菌肺炎克雷伯杆菌(Klebsiella pneumoniae)中表达全酶PQQ-PVADH。首先通过外源基因密码子优化实现PVADH的高效表达,PVADH酶活达到45U/mL;进而通过辅酶再生提高PQQ产量,双质粒重组菌Kp(pvadh+pqq)的PVADH酶活达到68U/mL;最后经发酵优化,PVADH酶活达到81U/mL,为PQQ-PVADH的生产提供了另一种选择方案。
- 弥志伟孙忠义赵鹏田平芳
- 关键词:肺炎克雷伯杆菌吡咯喹啉醌辅酶再生
- 产甘油重组大肠杆菌的构建及其耐高渗透压性能的测定被引量:1
- 2011年
- 克隆了酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)中的3-磷酸甘油脱氢酶和3-磷酸甘油酯酶基因,通过融合PCR构建了双基因共表达载体,将酵母细胞内应答渗透压变化的甘油合成途径引入大肠杆菌(Escherichia coli)。以葡萄糖为底物对重组大肠杆菌进行摇瓶发酵培养,该重组菌的甘油产量为1g/L。渗透压胁迫测试证明该重组菌的耐渗透压性能较出发菌株有明显提高。
- 萨娜王熙赵鹏葛喜珍田平芳
- 关键词:大肠杆菌甘油渗透压3-磷酸甘油脱氢酶
- 半导体合成生物学的研究进展被引量:2
- 2021年
- 半导体合成生物学是研究半导体技术与合成生物学之间协同作用的一门交叉学科。其涉及的活细胞-半导体材料杂合体系具有独特的能量和信号转导机制,不仅维持活细胞的代谢能力,而且保留半导体材料的光电学物理特性,在化工、通讯、计算、能源及医疗等领域具有广阔的应用前景。综述了半导体合成生物学在生物催化、智能生物传感以及新型DNA数据存储领域的最新研究进展,讨论了目前研究面临的技术难题及解决方案,旨在为合成生物学和半导体技术这两个影响化工发展的领域提供有价值的参考。
- 王欣赵鹏李清扬田平芳
- 关键词:信号输入信息存储
- 基于“间作、去顶、覆盖药渣”的北苍术生态种植模式研究
- 2024年
- 北苍术野生资源的枯竭导致市场供应不足,因而亟待开发人工栽培技术。通过探究北苍术人工生态种植模式,包括与大蒜间作、病虫害生物防治、去除顶芽和地面覆盖中药残渣,旨在对苍术种植过程进行质量控制。结果表明:与单独种植相比,北苍术与大蒜间作,同时经哈茨木霉和枯草芽孢杆菌防治,苍术根腐病和白绢病的病情指数下降了54.8%和66.6%,蚜虫繁殖盛期推后10~15 d;去除苍术顶芽可使蚜虫减退率达85.2%。此外,土壤覆盖中草药残渣使土壤含水量提高了49.5%。综上,由间作、去顶尖、铺设药渣构成的综合措施可实现苍术的生态种植。
- 张媛媛赵鹏王永强
- 关键词:北苍术大蒜间作
- 构建组成型肺炎克雷伯氏菌表达系统生产3-羟基丙酸被引量:2
- 2016年
- 利用组成型卡那霉素抗性基因启动子(Pkan),在肺炎克雷伯氏菌(Klebsiella pneumoniae)中过表达大肠杆菌醛脱氢酶基因ald H,获得重组菌K.p(p ETPkan-ald H)。微氧摇瓶发酵表明,该重组菌可高效利用甘油生产3-羟基丙酸,产量为0.47 g/L,较野生菌提高89.5%,甘油转化率、单位菌体产量分别提高100%和92%。5 L发酵罐微氧流加发酵表明,该菌3-HP产量达15.28 g/L,甘油转化率、产率分别为13.02%、12.73%。
- 马春路苏明月赵鹏葛喜珍田平芳
- 关键词:肺炎克雷伯氏菌甘油3-羟基丙酸
- 辅酶A依赖的丙醛脱氢酶基因的克隆、表达及其对宿主菌生长的影响
- 2015年
- 辅酶A依赖的丙醛脱氢酶(Pdu P)是以甘油为底物催化合成聚3-羟基丙酸的关键酶。本研究从鼠伤寒沙门氏菌基因组中PCR扩增了pdu P基因,构建表达载体后转化肺炎克雷伯氏菌,得到重组菌K.p(p ET-pk-pdu P)。SDS-PAGE显示Pdu P实现了高效表达。生长曲线表明重组菌延迟进入平稳期,生物量较空质粒对照菌提高了24.68%,1,3-丙二醇和2,3-丁二醇的产量分别达到16.58 g/L和15.68 g/L,甘油转化率比空质粒对照菌和原代菌分别提高了40.62%和34.02%。上述结果表明,过表达pdu P重排了代谢流量,促进了菌体生长。
- 范如婷赵鹏田平芳
- 关键词:鼠伤寒沙门氏菌肺炎克雷伯氏菌
- 利用SELEX技术筛选小檗碱核酸适配体及其亲和力表征被引量:1
- 2018年
- 小檗碱是一种价格低廉且生物安全性良好的小分子化合物,筛选能与小檗碱互相作用的核酸片段,旨在开发新型遗传元件并拓展其在生物技术领域的应用。利用指数富集的配基系统进化技术(SELEX),经8轮实验从随机单链DNA文库中筛选出4条能与小檗碱高度特异性结合的核酸适配体。对其中两条重现性较好的适配体进行结构模拟分析表明,适配体序列富含鸟嘌呤和胞嘧啶且多形成茎环及G-四链体结构。亲和力测定结果显示,其中的2条核酸适配体与小檗碱作用的解离常数Kd都处于nmol级,表现出较高的亲和力,适配体S1的Kd值最小,仅为523 nmol/L,与小檗碱亲和力最大。
- 张丽娜赵鹏田国英田平芳
- 关键词:小檗碱核酸适配体
- 重组肺炎克雷伯氏菌转化甘油为聚3-羟基丙酸
- 2017年
- 聚3-羟基丙酸[Poly(3-hydroxypropionate),P3HP]是一种生物可降解及生物相容的新型聚羟基脂肪酸酯。目前已鉴定的生物均不能天然合成P3HP。采用PCR克隆鼠伤寒沙门氏菌的丙醛脱氢酶(Pdu P)基因及罗尔斯通氏菌的聚羟基脂肪酸酯合成酶(Pha C)基因,构建共表达载体,转化肺炎克雷伯氏菌后获得两株重组菌。以甘油为唯一碳源进行摇瓶发酵,pdu P和pha C共用tac启动子的工程菌K.p(p ET-tac-pdu P-pha C)产生0.054 g/L的P3HP,而pdu P和pha C各自独用tac启动子的工程菌K.p(p ET-tac-pdu P-tac-pha C)产生0.091 g/L的P3HP。
- 窦一涵李映赵鹏范如婷田平芳
- 关键词:肺炎克雷伯氏菌
- 生物合成薯蓣皂素的途径设计及关键酶分析被引量:2
- 2021年
- 薯蓣皂素是一种天然甾体皂苷元,可作为数百种类固醇药物的前体,具有重要药用价值。目前工业生产薯蓣皂素主要依赖化学提取法,因此该法依赖植物材料和耕地且对环境有害。随着代谢工程和合成生物学的发展,生物合成法受到广泛关注。文中综述了生物合成薯蓣皂素的代谢途径和关键酶,并在酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae中设计其异源合成途径,提出改造策略,以期为全生物合成薯蓣皂素提供有价值的参考。
- 孙忠义赵鹏葛喜珍田平芳
- 关键词:薯蓣皂素生物合成途径关键酶异源表达