许世英
- 作品数：4 被引量：21H指数：2
- 供职机构：海南大田国家级自然保护区更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金海南省教育厅高等学校科学研究项目海南省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 海南坡鹿外周血白细胞cDNA文库的构建被引量：18
- 2008年
- 目的:构建海南坡鹿外周血白细胞cDNA文库。方法:采用RNAiso Reagent(TAKARA)处理新鲜血液,以总RNA抽提试剂盒(上海华舜)制备总RNA。利用SMART(Switching Mechanismat5’end of RNA Transcript)技术,用PowerscriptTM反转录酶逆转录合成第一链cDNA,LD-PCR扩增获得cDNA双链,SfiⅠ酶切和CHROMA SPIN-400TM柱分级分离后,500bp以上的片段与pDNR-LIB载体连接,电转化入E.coliDH5α,建成原始文库。然后扩增文库并随机挑取单菌落,酶切鉴定重组子插入片段大小。结果:经鉴定,库容量达到1.9×106克隆,原始文库滴度为1.59×1010cfu/mL,重组率接近100%,扩增后的文库滴度为7.4×1012cfu/mL。插入片段大小分布为0.5～2.0kb,平均长度约为1.0kb。结论:所构建文库的各项指标均达到要求,为筛选海南坡鹿已知和未知功能基因提供了材料来源,且为进一步研究基因的结构和功能奠定了重要基础。
- 申明霞刘涛杜丽王凤阳成鹰许世英吴科榜李治深符运南林贤梅满初日嘎祁超
- 关键词：海南坡鹿外周血白细胞CDNA文库SMART技术
- 海南坡鹿HSF1cDNA克隆和功能研究
- 王凤阳许世英吴科榜杜丽成鹰韩新畴满初日嘎林贤梅符运南林杰才倪承结
- 该项目首次建立了海南坡鹿外周血白细胞cDNA文库，克隆了海南坡鹿HSF1cDNA全长，并进行了生物信息学分析，进行了原核表达以及目的蛋白的鉴定，为阐释海南坡鹿热应激相关基因表达的分子机制提供了理论依据。该研究结果对于海南...
- 关键词：
- 关键词：海南坡鹿生物信息学分子机制
