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范纯新: 作品数：42 被引量：57H指数：4; 供职机构：上海海洋大学更多>>; 发文基金：国家自然科学基金上海市教育委员会重点学科基金国家重点基础研究发展计划更多>>; 相关领域：生物学农业科学环境科学与工程医药卫生更多>>

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利用斑马鱼侧线神经丘鉴定虾青素和牛磺酸的毛细胞保护作用: 2023年; 本研究以斑马鱼(Danio rerio)侧线神经丘为模型,分析在新霉素、硫酸铜和超声噪声3种损伤下,虾青素、牛磺酸单独处理以及二者共同处理对毛细胞的保护效果及其作用机制。取受精5 d的斑马鱼仔鱼,分别在毛细胞损伤前后用不同浓度虾青素和牛磺酸处理,用毛细胞活体染料YO-PRO-1对神经丘毛细胞进行染色,并对侧线第一、二、三神经丘内的毛细胞计数,用实时定量PCR分析casp3和nfkbiaa基因的表达。结果显示,在新霉素和硫酸铜损伤毛细胞后进行虾青素和牛磺酸处理较损伤毛细胞前处理对毛细胞保护的效果更好;相比硫酸铜和超声噪声造成的毛细胞损伤,虾青素和牛磺酸对新霉素造成的毛细胞损伤有更好的减轻效果;虾青素和牛磺酸共同处理对毛细胞的保护效果较两者单独处理的无显著提高;虾青素与牛磺酸处理可以改变损伤处理下斑马鱼nfkbiaa和casp3基因的表达水平。研究结果表明,新霉素、硫酸铜和超声噪声可用于构建毛细胞损伤模型,虾青素和牛磺酸能够极显著减少新霉素和硫酸铜导致的毛细胞损伤,这种保护作用可能与炎症反应和凋亡信号有关。; 杨佳颖王璇璇范纯新; 关键词：斑马鱼侧线毛细胞虾青素牛磺酸

点纹斑竹鲨晚期胚胎侧线系统的研究被引量：1: 2011年; 通过阿利新蓝染色、石蜡切片和扫描电镜,对点纹斑竹鲨晚期胚胎侧线系统的分布、形态和表面结构进行了观察。结果表明,点纹斑竹鲨的侧线系统与多数软骨鱼板鳃类相一致,包括有机械感受功能的侧线管和陷器,以及有电感受功能的罗伦氏壶腹器。侧线管分布呈典型的"七管模式",其内的管道神经丘位于侧线管内远离体表的一侧,由覆盖细胞、支持细胞和感觉细胞组成。陷器分布于背部两体侧线管之间,单个陷器位于两盾鳞间,深陷在真皮中,由1短管通向表面,管壁不规则,上段由表皮细胞组成,管深40～60μm。罗伦氏壶腹器由管孔、罗伦管和罗伦瓮3部分组成,呈长颈瓶状,很多罗伦管都较长,从1 mm～50 mm不等,管壁规则;罗伦瓮由7个罗伦小囊组成,每个小囊直径约50μm。通过与其他软骨鱼类进行比较,点纹斑竹鲨的侧线系统分布和感受器结构不但印证了软骨鱼类的系统发育关系,同时也与其生活习性相适应。; 张倩宋佳坤郭弘艺范纯新程生福

Pax3a基因Homeobox domain结构域敲除斑马鱼的跨代遗传观察: 2021年; 目的:检测Pax3a的Homeobox domain结构域敲除后斑马鱼基因型和表型的稳定性.方法:利用CRISPR/Cas9技术双靶点整体敲除斑马鱼中Pax3a的Homeobox domain结构域,并建立F0代和F1代敲除斑马鱼.同时比较靶基因敲除的基因型和表型跨代遗传的影响.结果:两年的跟踪观察显示F1代Homeobox domain结构域敲除序列有延长和重组修复改变;瓦登伯革氏症候群病态表型比原先报道的Homeobox domain结构域过表达更明显,主要体现为色素颗粒松散和肠道细胞失去紧密连接.结论:斑马鱼Pax3a的Homeobox domain结构域的过表达或缺失都能妨碍Pax3的结构和功能完整性,导致不正常的细胞迁移和细胞间紧密连接.; 孙潇潇詹睿李乐诗范纯新严继舟; 关键词：斑马鱼

小体鲟Ar-tnfsf10和Ar-tnfrsf10基因的克隆、表达和功能初步探究: 2023年; 为了探究TNFSF和TNFRSF在硬骨鱼中的表达和功能,克隆小体鲟Ar-tnfsf10和Ar-tnfrsf10基因,并对小体鲟Tnfsf10和Tnfrsf10序列进行进化分析以及蛋白高级结构预测。结果表明,小体鲟Tnfsf10和Tnfrsf10在进化树中位于辐鳍亚纲的基部,虽然与四足动物的Tnfsf10和Tnfrsf10同源性不高,但其三维结构与人的Tnfsf10和Tnfrsf10相近。原位杂交结果显示:Ar-tnfsf10和Ar-tnfrsf10均在小体鲟躯干水平肌隔、眼部的眶下管、前鳃盖管和腹侧吻端的神经丘处有较强表达。经Tnfrsf10特异性激活剂Bioymifi处理后,小体鲟仔鱼整体结构无显著变化,但神经丘中毛细胞显著增多。综上结果表明:小体鲟Tnfsf10和Tnfrsf10代表了硬骨鱼同源蛋白的原始形式,可能特异性参与侧线神经丘毛细胞的发育。; 展敏月王建王建; 关键词：小体鲟侧线

细胞生物学教学存在的问题与改革思路被引量：4: 2011年; 随着基因组计划不断深入和干细胞技术的成熟,21世纪将成为生命科学的世纪。生命科学将像信息技术一样渗透到我们生活中的每个角落,我们的世界将在生命科学的带动下发生翻天覆地的变化。为迎接将要到来的机遇和挑战,作为高校生命科学类教师的我们必需根据时代的需要,不断深化教学改革,倡导"以学生为中心"的教育理念,提高教学质量,不断地培养创新型人才。根据多年的教学实践经验,我们尝试对细胞生物学课程的教学内容、教学手段、考核方法等方面进行改革,克服传统教学中的局限性,提出多种教学改革的有效措施,更好地满足社会发展和创新人才成长的需要。; 范纯新郭弘艺唐文乔; 关键词：细胞生物学教改

MsxC基因在斑马鱼肌间刺和大侧肌发育中的作用被引量：3: 2022年; 肌间刺存在于有些真骨鱼类的肌间隔中,作为Hox基因家族成员,MsxC(muscle segment homeobox C)基因的表达模式与唇䱻肌间刺形成有一定的相关性。为了进一步探究MsxC基因在肌间刺形成中的作用,利用CRISPR/Cas9基因编辑技术,建立斑马鱼MsxC基因纯合突变体(MsxC^(^(-/-)))。结果表明:与野生型斑马鱼相比,MsxC^(-/-)斑马鱼尾部的髓弓小骨和脉弓小骨平均缩短15%以上,差异极显著,而躯干部的肌间刺长度则无明显差异;MsxC^(-/-)斑马鱼大侧肌肌隔周围白肌细胞分布疏松,且排列混乱,越靠近尾部差异越明显;MsxC^(-/-)突变体红肌面积增大,越靠近尾部,红肌面积增大越明显,尾部红肌面积增大2.22%(P<0.01),而躯干靠前部位面积增大0.97%(P<0.05)。这表明,MsxC基因的缺失既影响了肌间刺的形成,同时也影响了大侧肌的发育。; 庞天抒车金远范纯新鲍宝龙; 关键词：斑马鱼

死亡受体激动剂在促进毛细胞再生以治疗耳聋的新用途及一种验证该用途的模型: 本发明公开了一种死亡受体激动剂在促进毛细胞再生以治疗耳聋的新用途，一种验证模型，包括如下步骤：(1)sgRNA的设计和合成；(2)Cas9mRNA合成：采用T3质粒pT3TS‑nlsCas9nls，通过XbaI限制性内切...; 范纯新杨佳颖王建袁小艺

stat3通过促进轴突生长间接抑制间神经丘早熟: 2021年; 鱼类侧线系统由感受水流的机械感受器和传导信息的侧线神经组成。stat3在斑马鱼侧线神经丘和侧线神经节中特异性表达,但stat3在斑马鱼后侧线系统发育过程中的功能仍然不清楚。本研究利用CRISPR/Cas9在斑马鱼中成功敲除stat3基因。然后,利用Tg (SqET20:GFP)转基因鱼追踪后侧线神经丘的发育。从4 dpf开始,stat3纯合突变体尾部的神经丘数量显著多于野生型。原位杂交结果显示,stat3纯合突变体后侧线神经上的mbp信号少于野生型。进一步用抗乙酰化-微管蛋白抗体以及TgBAC (Neurod1:EGFP)转基因鱼追踪后侧线轴突生长,发现stat3纯合突变体后侧线神经轴突末梢停在泄殖孔旁,不再支配尾部神经丘。综上结果表明:stat3通过调控轴突生长,间接地抑制间神经丘早熟。; 段钦文魏文波王建范纯新; 关键词：斑马鱼 STAT3 轴突

皮骨在斑马鱼侧线系统胚后发育中的作用: 2021年; 鱼类侧线系统的分布随其分类地位和不同的生存环境呈现多样性,这种多样性与侧线系统的胚后发育密切相关,但对于侧线系统胚后发育调控研究较少。本研究利用CRISPR/Cas9敲除斑马鱼(Brachydanio rerio var) edar基因,获得皮骨缺陷的突变体,进而利用染色技术分析鳞片和侧线管道在侧线胚后发育中的作用。利用茜素红对硬骨进行染色,我们发现edar突变体头部侧线管道不完整或缺失,躯干鳞片显著减少。经DASPEI对毛细胞进行染色,发现侧线管道不完整的头部管道神经丘变小,躯干鳞片缺失的表面神经丘无法形成缝合线。最后,利用qPCR对突变体WNT信号相关基因的表达进行分析,发现edar突变体中tcf7和lgr5表达显著下调。综上结果表明:斑马鱼的头部侧线管道和躯干的鳞片在侧线系统的胚后发育中起到重要的作用。; 陈团结段钦文范纯新; 关键词：缝合线 WNT信号

母源性长链非编码RNA Six2a-OT参与斑马鱼胚胎发育调控: 2018年; Six基因家族进化高度保守,在脊椎动物个体发育中起着重要作用。但目前对其调控机制尚不完全清楚。在UCSC (The University of California Santa Cruz) Genome Browser的斑马鱼基因组数据库中发现, Six2a-Six3a基因簇周围存在一条长链非编码RNA——Six2a-OT。首先,利用反转录PCR (RT-PCR)结合测序证实了该RNA确实存在。然后,利用荧光半定量PCR (qPCR)和整胚原位杂交(whole-mount in situ hybridization, WISH)确定了其特异性的表达模式:Six2a-OT在卵巢中的表达远高于精巢;在受精卵和早期原肠胚中高表达,随后显著下降;受精后48 h (48 hpf)集中表达于耳囊(otic vesicle)、躯干中线(trunk midline)和鳃弓(branchial archs)。随后,进一步利用反义吗啡啉(morpholino)特异性阻断Six2a-OT剪接,观察到63%的48 hpf胚胎表现出躯干变短、侧弯,或心包积水,同时Six2a和Six3a的表达显著下降。以上结果表明:Six2a-OT作为母源性因子通过调节Six2a和Six3a的表达参与斑马鱼胚胎早期发育。这为揭示Six基因簇的表达调控机制提供了重要依据。; 景新星宋佳坤范纯新; 关键词：斑马鱼 RNA剪接

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