翟新验 作品数:188 被引量:477 H指数:11 供职机构: 中国动物疫病预防控制中心 更多>> 发文基金: 科技基础性工作专项 国家科技基础性工作专项 国家现代农业产业技术体系建设项目 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 生物学 经济管理 更多>>
浅谈兽医实验室管理体系的建立与运行 被引量:11 2014年 兽医实验室是指隶属于各级兽医主管部门,并承担动物疫病诊断、监测和检测等任务的国家级区域兽医实验室、省级兽医实验室、地(市)级兽医实验室和县(市)级兽医实验室。兽医实验室是为满足动物疫病防控工作需要而设置的,加强其建设是提高我国动物疫病防疫体系应急能力的重点。农业部于2009年8月公布了《兽医系统实验室考核管理办法》,该文件明确规定兽医实验室应当建立与所承担任务相适应的质量管理体系并运行正常。根据我国兽医实验室质量管理现状,结合笔者所在兽医实验室开展的工作,现对兽医实验室管理体系的建立与运行工作进行初步探讨,为加强兽医系统实验室管理提供参考。 曲萍 宋晓晖 翟新验 胡冬梅 赵柏林 辛盛鹏关键词:兽医实验室 动物疫病 实验室管理 疫病诊断 疫病防控 产气荚膜梭菌多毒素融合蛋白的表达与纯化及基因工程亚单位多价疫苗的制备 被引量:6 2017年 产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens)的α、β2和ε毒素是病原的主要外毒素,也是制备预防该病基因工程亚单位多价疫苗的主要研究对象。本研究通过优化密码子、去除蛋白信号肽、选择亲水性与抗原性较好的序列、同时优化表达条件等方法的探索,在大肠杆菌表达系统中获得了高效表达的可溶性α-β2-ε融合蛋白;用该蛋白免疫小鼠后可产生较高水平的血清抗体,针对A、B、C和D型产气荚膜梭菌的免疫保护率分别为100%,100%,90%,100%;小鼠三免后7~14d的抗体效价达到峰值。本研究构建了多毒素融合蛋白表达载体Pet30a-α-β2-ε,并成功表达与纯化出了高效可溶性的目的蛋白,且表达出的融合蛋白具有良好的免疫原性,可以进一步用于羊三联四防基因工程亚单位疫苗的研制,具有较强的研究价值和应用前景。 孙雨 翟新验 董浩 赵柏林 王晓英 曲萍 胡冬梅 杨天意 石慧 宋晓晖关键词:产气荚膜梭菌 融合蛋白 基因工程亚单位疫苗 利用猪口腔液对猪场猪繁殖与呼吸综合征抗体进行检测 被引量:2 2018年 猪口腔液应用于检测猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)抗体监测在国内尚处于起步阶段。通过研究在猪场利用猪口腔液监测商品猪的PRRS抗体,并同时采集血液,比较口腔液和血液中PRRS抗体水平,进而为猪PRRS抗体监测提供新思路。对母猪和仔猪免疫PRRS弱毒疫苗,免疫后分不同时间段分别进行耳缘静脉采血和使用自制口腔液采样套装采集口腔液。然后利用2种ELISA试剂盒分别检测口腔液和血液PRRS抗体。结果表明,利用商品化ELISA试剂盒进行口腔液和血液中的PRRS抗体水平检测发现其具有相关性,尤其是免疫6周后,使用2种试剂盒检测的口腔液和血清中PRRS抗体结果符合率可达100%,故可选择测定免疫6周后口腔液抗体用于PRRS免疫效果评价。所以,猪口腔液采样是一种实用、有效的猪群PRRS抗体监测方法,可根据监测需求确定监测方案。 刘颖昳 刘金兰 单瑛琦 王红梅 吴佳俊 翟新验关键词:猪繁殖与呼吸综合征 抗体监测 试剂盒 猪圆环病毒1型微滴数字PCR定量检测方法的建立 被引量:14 2017年 以猪圆环病毒1型ORF1基因为靶基因,建立了可对其准确定量的微滴数字PCR(droplet digital PCR,ddPCR)方法。对ddPCR反应中的探针浓度进行了优化。结果显示:ddPCR反应中的最佳探针浓度为250nmol/L;ddPCR方法线性相关系数(R2)为0.999,呈良好的线性关系;检测限为7.8copies/20μL;变异系数为2.7%;与其他病毒无交叉反应。通过对临床样品的检测,检测结果与实时荧光PCR结果一致。结果表明:新建立的ddPCR方法敏感性高、特异性强,可用于猪圆环病毒1型的定量检测。 原霖 訾占超 亢文华 李晓霞 汪葆玥 王静 韩焘 陈亚娜 倪建强 翟新验美洲型与欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒Nsp7蛋白的截短表达和鉴定 被引量:3 2013年 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)Nsp7蛋白具有较强的免疫原性,且在美洲型(NA)和欧洲型(EU)PRRSV之间免疫原性差异显著,是抗体分型检测的理想靶抗原。本研究采用原核表达系统分别表达和纯化了NA和EU PRRSV Nsp7蛋白,Western blotting分析表明重组蛋白与相应血清型抗体有较强的免疫反应,但特异性较差,与另一血清型抗体仍存在一定的免疫反应,预示两种血清型PRRSV Nsp7蛋白存在免疫交叉反应抗原表位,全长表达不能用于分型诊断。利用生物学软件分析NA和EU PRRSV Nsp7的相似抗原表位,采用融合PCR缺失其编码序列后,经表达纯化获得NA-Nsp7和EU-Nsp7两种截短蛋白,蛋白大小约为43 kDa,Western blotting分析表明NA-Nsp7和EU-Nsp7可分别与相应血清型抗体发生特异性反应,且无免疫交叉反应,为NA和EU PRRSV分型抗体检测试剂的研制奠定了基础。 邱鹏 宁昆 蔡林 刘奇 汪葆玥 翟新验 遇秀玲 倪建强 田克恭关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒 融合PCR 分型诊断 3Rs原则的应用实例——用鸡胚肝细胞替代鸡肾细胞培养禽腺病毒 被引量:6 2003年 在动物实验中利用减少 (reduction)、替代 (replacement)和优化 (refinement)的 3Rs原则 ,是执行实验动物福利的重要体现。利用SPF鸡胚肝细胞培养禽腺病毒 ,用于制备诊断抗原和病毒研究 ,取代用SPF鸡肾细胞培养禽腺病毒 ,通过观察细胞病变和测定抗原滴度分析比较 ,前者完全可以替代后者制备禽腺病毒诊断抗原 ,是利用 3Rs原则的具体实践。尽可能利用可替代实验动物的替代物 ,通过细胞组织培养的方法取代活体动物进行实验 。 富强 翟新验 卢胜明关键词:实验动物 澳大利亚国家猪肉生产生物安全手册——常规生物安全规程 被引量:1 2019年 澳大利亚国家猪肉生产生物安全手册根据澳大利亚生猪产业生物安全参考指南进行编写,是实现猪场生物安全管理的重要工具。该手册由紧急动物疫病反应协议支持(EADRA)EADRA约束澳大利亚各级政府和畜牧企业,共同应对突发的动物疫情。其中包含了当产业被突发疫病影响时的联合资助。该手册包含了能够指导猪场员工降低疾病进入猪场,扩散和进入其他生产体系的风险的信息和具体操作规程。通过执行这些生物安全措施,猪场能够应对潜在的疾病暴发,降低控制和净化疾病对猪场造成的损失。该手册可作为所有猪场的工具,尤其是雇用了大量员工的猪场或承包商,用于将生物安全要求转化为猪场的操作流程和工作说明。我们对其公开发布的2013版进行了翻译和整理,主要包括常规生物安全规程和高级生物安全规程,供读者借鉴。 刘林青 张倩 翟新验关键词:安全规程 产生物 猪肉 生物安全管理 生物安全措施 生猪产业 我国西南地区跨境动物疫病传入风险及防控策略 被引量:2 2017年 近年来,随着"一带一路"开放战略的实施,国际贸易和人员跨境流动日益频繁,西南地区与东南亚、南亚国家比邻,加之这些国家动物疫病和人兽共患病持续存在,使得跨境动物疫病传入风险逐渐加大,跨境动物疫病防控形势日趋复杂。本文通过分析跨境动物疫病传入我国的风险因素,探索完善我国跨境动物疫病的预防与控制策略。 翟新验关键词:防控策略 2017年全球高致病性禽流感疫情分析 被引量:11 2018年 2017年,全球共有57个国家和地区报告发生1 860起高致病性禽流感疫情,涉及易感禽约2 000万只,导致280多万只禽发病,210多万只死亡,1 200多万只被销毁。从空间分布看,欧洲疫情国家数量最多,共有29个国家报告疫情,其次是亚洲,共有18个国家和地区报告疫情;从时间分布看,1—3月份报告疫情数最多,占77.6%(1 444/1 860),其他月份报告疫情数较少,每月不足70起;从流行毒株亚型看,涉及H5N1、H5N2、H5N5、H5N6、H5N8、H7N3和H7N9等多个亚型,其中H5N8亚型引发的疫情数最多,占83.0%(1 544/1 860);从群间分布看,感染禽类涉及鸡、鸭、鹅、火鸡和鹌鹑等5种家养禽类以及38种野生禽类,疫点涉及规模场、散养场、公园、村庄、森林、动物园、屠宰场、市场等多个场点。总的来说,与前几年相比,2017年全球高致病性禽流感疫情更为严重:疫情分布较广,且欧洲最严重;感染禽类众多,涉及多种家禽和野禽;流行毒株复杂,疫情流行面广,具有明显的季节性特征。分析表明,全球禽流感流行形势更加严峻复杂,需要进一步加强监测和防控。 杜建 兰邹然 翟新验 辛盛鹏关键词:流行病学 伪狂犬病及其根除:美国经历的回顾—州-联邦-行业伪狂犬病根除项目标准(2) 2018年 州-联邦-行业伪狂犬病根除项目标准的第一部分和第二部分见本刊14期《伪狂犬病及其根除:美国经历的回顾——州-联邦-行业伪狂犬病根除项目标准(1)》。第三部分——项目阶段和要求第一阶段:准备这是项目的初始阶段。控制和根除伪狂犬病的基本程序在该阶段制定。A.为满足第一阶段资格的认定要求,项目资格申请应提供文件证明相关州份满足以下标准:1.该州已组建州伪狂犬病委员会,且该委员会正在开展工作。 杨文欢 张淼洁 翟新验关键词:伪狂犬病