程华 作品数:79 被引量:346 H指数:11 供职机构: 黄冈师范学院 更多>> 发文基金: 湖北省自然科学基金 国家自然科学基金 中央财政林业科技推广示范资金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 理学 更多>>
银杏EPSPS基因克隆及表达分析 被引量:11 2010年 利用RACE技术,克隆到银杏EPSPS合酶基因(GbEPSPS)的cDNA序列并对其进行生物信息学分析。结果表明:银杏GbEPSPScDNA长1 403 bp(GenBank登录号GU084139),其包含一个1 035 bp的ORF框,编码344个氨基酸;预测该基因编码蛋白质分子量为36.87 kD,其等电点为5.75。系统进化树分析表明,银杏EPSPS蛋白质序列与其他物种的EPSPS同源性较高。半定量RT-PCR分析结果显示,EPSPS基因在银杏的叶和果实中表达量最高,其次为茎,根中表达水平最低。草甘膦处理能显著诱导银杏EPSPS基因表达量升高;紫外光对银杏EPSPS基因的表达具有诱导作用;ABA诱导GbEPSPS表达量先升后降;GbEPSPS转录水平受到42℃高温显著诱导。 程华 李琳玲 王燕 姜德志 程水源关键词:银杏 EPSP合酶 基因克隆 RACE技术 SPE-HPLC法同时分离测定板栗花芽中四种内源激素的研究 被引量:3 2014年 以板栗花芽为试材,研究了建立其花芽中吲哚乙酸(IAA)、脱落酸(ABA)、玉米素核苷(ZR)、赤霉素(GA3)4种内源激素含量的定性、定量分析方法。结果表明:采用80%的预冷甲醇水溶液浸提板栗枝芽中内源激素IAA、ABA、GA3、ZR,提取效果较好;采用SP比川、柱固相萃取技术进行纯化,采用Symmetry300TMC18(5μm,4.6mm×250mm),以甲醇:0.075%冰醋酸(90:5,V:V)为流动相,在流速1.0mL/min、柱温30℃,检测波长219nm的条件下,进行梯度洗脱,分离效果理想,加标回收率达到89.92%~105.30%;该方法准确、灵敏、重现性好。 李琳玲 程华 吴聪华 华娟 程水源关键词:固相萃取 高效液相色谱 板栗 花芽 内源激素 转银杏查尔酮合成酶基因烟草叶片酮含量和成分的变化 依据已得到的银杏查尔酮合成酶(GbCHS)基因cDNA序列设计引物,分别构建了该基因的正义、反义表达载体,并通过根癌农杆菌介导法转入烟草中,对获得的抗性烟草进行PCR鉴定、Southern杂交分析、Northern杂交分... Li Linling 李琳玲 Cheng Hua 程华 Xu Feng 许锋 Wang Yan 王燕 Cheng Shuiyuan 程水源关键词:转基因烟草 黄酮含量 银杏过氧化氢酶基因CAT1的克隆及表达分析 被引量:13 2010年 利用RACE技术从银杏中克隆到过氧化氢酶基因(GbCAT1)的cDNA全长。进化树分析结果表明:GbCAT1和其他物种的CAT源自于相同的祖先。Southern杂交显示:GbCAT1属于1个小的多基因家族。实时定量RT-PCR分析表明:GbCAT1在银杏的根、茎、叶和果中都有表达,在叶中的相对表达量最高,其次为果、茎和根。GbCAT1的转录受到ABA、渗透压、紫外、低温和高温胁迫的诱导。水杨酸处理下,GbCAT1相对表达量迅速降低。CAT1基因在逆境条件下的相对表达变化与环境胁迫有关。 程华 李琳玲 许锋 王燕 程水源关键词:银杏 环境及栽培因子影响银杏叶黄酮积累的分子机理及其调控研究 程水源 王燕 许锋 李琳玲 朱桂才 程述汉 蔡荣 朱俊 陈柳吉 张风霞 程华 常杰 该项目以银杏叶黄酮合成途径中关键酶、关键基因为突破口,通过对参与黄酮代谢的部分酶和基因的研究,丰富了银杏叶黄酮合成代谢机制的理论知识,为最终完全阐明银杏黄酮的代谢网络奠定基础,在药用植物次生代谢研究领域具有重要科研价值和...关键词:关键词:药用植物 分子育种技术 罗田“八月红”板栗花芽分化与相关酶活性的变化 被引量:1 2013年 以罗田板栗主栽品种"八月红"为试材,研究分析了板栗花芽分化过程中相关酶活性的变化规律,以期为果树育种工作的顺利进行提供理论基础和技术支撑。结果表明:板栗雌花分化过程中吲哚乙酸(IAA)的大量氧化有利于板栗植株完成从营养生长到生殖生长的转变,从而完成有序花芽分化;过氧化氢酶(CAT)活性随着花芽分化进程的进行不断增强,后期增加趋势转为平缓;过氧化物酶(POD)活性在花芽分化前逐渐上升直到花芽分化期活性达到最高值,之后呈现一段时间的下降趋势;不同分化时期淀粉酶活性降低有利于板栗花芽分化。 程华 李琳玲 王少斌 许锋 王燕 程水源关键词:板栗 花芽分化 酶活性 农村中学校本课程开发案例及其教学设计——以“板栗生物学特性及栽培管理”为例 被引量:1 2014年 主要开发出以罗田特产"板栗"为主要内容的校本课程案例,以活动课型为主的教学设计。教学设计根据湖北省罗田县的地域特点,以罗田板栗的生物学特性及栽培管理调查为媒介,设计课堂教学和学生自主活动部分,目标是课堂教学与课外实践相结合,重点突出以"学生主体、教师指导"的思想。关于校本课程可行性探讨将为以后罗田地区生物校本课程的开发提供一个参考,促进农村地区校本课程的开发及其发展。 李琳玲 程华 徐晶 程水源关键词:校本课程 教学设计 中学生物 板栗新品种‘玫瑰红’ 2015年 ‘玫瑰红’板栗是从湖北省罗田县板栗实生群体中选育出的新品种。平均产量3 195 kg·hm-2,平均每苞含坚果2.83粒,平均单粒质量19.61 g,空苞率2.08%。坚果深红色,光亮美观,充实饱满,底座大,接线近直形;果肉浅黄色,细糯香甜,涩皮易剥。丰产,稳产,耐贮,抗病虫能力和适应性强。在湖北地区成熟期9月上中旬,适宜在湖北板栗适生区栽培。 程水源 李琳玲 程华 王燕 徐向阳 晏绍良 姜德志关键词:板栗 提高银杏叶黄酮含量的调控技术示范与推广 程水源 王燕 许锋 李琳玲 朱桂才 杜何为 费永俊 吴楚 项俊 方元平 李兴祥 金明珠 程华 《提高银杏叶黄酮含量的调控技术研究与示范》项目是湖北省科学技术厅1999年下达的,项目编号为:991P1004,主持完成单位为长江大学。 该课题根据类黄酮化合物在植物体内的合成代谢途径,在湖北省自然科学基金《银杏叶黄酮...关键词:关键词:银杏叶 黄酮含量 板栗MADS-box基因的分离及RNAi表达载体构建 被引量:1 2014年 以中国罗田板栗品种"玫瑰红"的幼叶和花为试材,采用EST数据库分析,结合RACE技术从板栗中分离到MADS基因的cDNA全长序列并构建了其RNA干扰载体,研究开花关键基因对板栗花芽分化的影响。结果表明:CmMADS基因全长为922bp的CmMADS的cDNA序列,该序列含有1个681bp的可读框,编码227个氨基酸序列。生物信息学预测CmMADS蛋白的分子质量为25.87kDa,理论等电点为6.27,N端具有M盒保守序列,其二级结构主要由α?螺旋和无规则卷曲组成。蛋白质同源分析表明,CmMADS含有M盒和K盒2个特征性序列区域。同源建模分析显示CmMADS序列与苹果MADS蛋白的三维结构及活性位点高度相似。系统进化分析表明,板栗MADS蛋白归属植物进化分支,且与太行花的MADS蛋白归为一支。将CmMADS基因2段相同长度(283bp)的反向互补片段RMADS和FMADS连入载体pBluescript SK plus,构成中间载体pBluescript SK plus-FR。用BanHI和KpnI同时酶切中间载体pBluescript SK plus-FR和植物表达载体pCl301-ubi,回收pBluescript SK plus-FR的酶切小片段,连入pC1301-ubi大片段中,构成植物表达载体pC1301-ubi-CmMADS-RNAi。下一步拟用构建好的RNA干扰载体转化农杆菌并由其介导将重组质粒转入烟草,为深入研究该干扰载体的功能及CmMADS基因的功能提供参考。 李琳玲 廖志琴 陈小玲 程水源 程华关键词:板栗 MADS-BOX基因 开花 成熟期