王牟平
- 作品数：73 被引量：253H指数：9
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家科技攻关计划中国农业科学院哈尔滨兽医研究所所长基金黑龙江省博士后科研启动基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生环境科学与工程更多>>
- 牛分枝杆菌mpb64基因的克隆、鉴定及其表达被引量：3
- 2005年
- 以牛型分枝杆菌基因组DNA为模板,PCR方法扩增mpb64基因,纯化PCR产物并与 pDM18-T载体连接、转化,经酶切及核苷酸序列鉴定为正确后,酶切产物亚克隆到原核表达载体 pET30a(+)的KpnI／EcoRI位点,构建重组表达质粒pET30a+-mpb64,转化到大肠杆菌DE3内,以 IPTG进行诱导,终浓度为1mmol／L,诱导产物进行SDS-PAGE电泳。结果表明,PCR方法成功扩增 出mpb64基因,核苷酸序列测定验证了其正确性,重组表达质粒表达的pET30a+-mpb64融合蛋白 相对分子量为30.4kDa,与实测相符。牛分枝杆菌pET30a+-mpb64的成功表达为牛结核病的诊断 及新型疫苗的研究奠定了基础。
- 张秀华刘思国宫强王春来王牟平彭永刚沈国顺郭洋郭设平
- 关键词：SDS-PAGE电泳核苷酸序列测定PCR产物IPTGT载体
- 果子狸SARS-CoV实验性感染的病理学研究被引量：2
- 2006年
- 目的为了明确实验性感染SARS-CoV的果子狸各器官的病理变化,进一步确定SARS-CoV与果子狸的关系,评价其作为SARS动物模型的可行性。方法在人源SARS-CoV分离株BJ01(有29个核苷酸的缺失序列)和GD01(无29个核苷酸的缺失序列)实验性感染果子狸的基础上,对其经福尔马林固定的肺、脾、淋巴结、肝、小肠、肾、气管、大脑、胰腺、性腺、胃、心组织进行病理组织学观察,同时用原位杂交技术(ISH)对SARS-CoV在组织器官中的分布进行检测。结果攻毒后不同时期,肺、脾、淋巴结、肝、小肠、肾和大脑有不同程度的病理变化,主要病变是肺脏为急性间质性肺炎:肺炎性水肿、肺泡腔浆液渗出以及肺泡壁充血、出血并因淋巴细胞、巨噬细胞增生、浆液渗出而显著增厚,肺内小血管增生、扩张。淋巴结、脾脏结构破坏,淋巴滤泡消失,脾小体萎缩,淋巴细胞明显减少,结缔组织增生。肝细胞脂肪变性,并见有多个淋巴细胞浸润灶。ISH结果显示,在肺、小肠、大脑中检测到SARS-CoV基因,其它器官中未检到,与SARS患者的检测结果基本相符。结论果子狸实验性感染SARS-CoV可导致与人类相似的病理学变化和病原分布,表明果子狸可以作为评价SARS-CoV疫苗及治疗药物的动物模型。
- 肖一红孟庆文尹训南关云涛刘永刚李昌文王牟平孔宪刚吴东来
- 关键词：SARS-COV果子狸冠状病毒感染原位杂交
- 猪胸膜肺炎放线杆菌外膜蛋白(OMP)5′末端保守区基因的克隆、表达及其免疫活性研究被引量：3
- 2004年
- 以猪胸膜肺炎放线杆菌血清7型25＿4株基因组DNA为模板,PCR方法扩增外膜蛋白(OMP)5′末端保守区基因片段(OMPc),酶切及核苷酸序列分析鉴定后,与原核表达载体质粒pGEX＿6P＿1进行连接,构建成重组表达载体pGEX＿OM Pc,转入大肠杆菌BL21中,以IPTG进行诱导,SDS＿PAGE电泳分析发现,转化了重组质粒的菌株所表达的融合蛋白相对分子量为34kD,与实际预测相符,命名为GST＿OMPc。GST亲和层析柱进行纯化,ELISA方法对纯化蛋白进行检测。结果表明:纯化蛋白GST＿OMPc能够与兔抗猪胸膜肺炎放线杆菌血清7型的阳性血清反应。OMPc蛋白的成功表达为其功能的研究打下基础。
- 刘思国彭永刚王牟平王春来宫强
- 关键词：猪胸膜肺炎放线杆菌克隆
- 用切向流超滤的方法浓缩蓝耳病灭活疫苗半成品的研究报告被引量：3
- 2010年
- 为了验证采用切向流超滤的方法浓缩蓝耳病疫苗半成品对提高其效价的效果,我们作了多次浓缩试验,并于每次试验之后进行TCID50检测。选取其中4次试验的样品灭活乳化成苗,进行仔猪的免疫试验,于免疫后21日采血分离血清做ELISA检测。从动物试验的检测结果来看,浓缩后的仔猪阳性率高于浓缩前,证明以超滤的方法提高蓝耳病疫苗半成品的效价是可行的。
- 于向前王克雄于向西蔡雪辉王洪峰秦运安王牟平
- 关键词：蓝耳病效价动物试验
- 鸡产蛋下降综合征血凝抑制试验抗原符合率比较
- 2011年
- 用哈尔滨维科生物技术开发公司生产的批号为200901的鸡减蛋综合征京911株油乳剂灭活疫苗，以0．5mL／只剂量接种120日龄SPF鸡10只，7d后采血分离血清，以后每隔一定时间进行采血、分离血清。同时又采集了发病鸡场的15份发病鸡血清。分别用血凝抑制试验和琼脂扩散（AGP）试验对自制的阳性血清和发病鸡血清样品进行血清学检查。结果表明：当血清HI效价等于或大于28时，两种方法的符合率可达100％；当血清的HI效价为26-27时，AGP与HI的符合率为73．33％~86．67％；当血清的HI效价为24-25时AGP的检出率很低或完全呈阴性。从两种方法的符合率比较还可得出HI试验检测的灵敏度要高于AGP，而且HI法简单、特异、快速、实用、方便，不但能定性还可以定量。
- 鞠妍闫丽辉朱庆虎王牟平
- 关键词：鸡产蛋下降综合征符合率
- 牛、羊腐蹄病研究概况被引量：3
- 2008年
- 腐蹄病（Footrot）是由坏死梭杆菌（Fusobactefium necrophorum，F．necrophorum）和节瘤拟杆菌（Baeteroides nodosu，B．nodosus）协同感染引起反刍动物趾间皮肤及深层软组织的一种高度接触性传染病？以动物蹄部组织的化脓坏死性分解、腐败恶臭和角质形成受到破坏为主要特征。
- 童申军王牟平张传东祝东彬
- 关键词：腐蹄病接触性传染病反刍动物坏死梭杆菌节瘤拟杆菌软组织
- Ⅰ型犬腺病毒弱毒疫苗株及其应用
- 本发明公开了I型犬腺病毒弱毒疫苗株及其应用。本发明将所分离的I型犬腺病毒强毒株在MDCK上传代、克隆，培育了致弱毒株(CAV-HR)，安全性和免疫原性试验结果表明，本发明的弱毒株CAV-HR株对同源强毒攻击的犬可以提供很...
- 刘大飞张洪英曲联东王牟平刘立奎
- H5N1亚型禽流感油佐剂疫苗安全性试验研究
- 2011年
- 通过对H5N1亚型禽流感油佐剂疫苗的急性毒性试验、眼结膜刺激试验、肌肉刺激试验与溶血试验研究,评价其安全性。急性毒性试验:取AA+肉鸡70只,随机分成7组,设为高剂量疫苗组与佐剂组,中剂量疫苗组与佐剂组,低剂量疫苗组与佐剂组,空白对照组。眼结膜刺激试验:取兔12只,随机分成2组,为疫苗组和佐剂组,采用自身对照法,观察兔眼的情况。肌肉刺激试验:取兔8只,随机分成2组,为疫苗组和佐剂组,采用自身对照法,观察注射部位肌肉的刺激反应。溶血试验:取兔1只,心脏采血5 mL,制成2%红细胞混悬液进行溶血试验。急性毒性试验结果未测出LD50,测定20倍临床剂量为其最大给药量,说明临床使用剂量安全。眼结膜刺激试验、肌肉刺激试验及溶血试验的结果表明,疫苗的刺激性较弱,没有溶血性,故可采用注射法给药。
- 刘芳萍罗鹏志李昌文王牟平智海东刘景利佟恒敏刘艳艳卢斯亮陈雪英
- 关键词：H5N1油佐剂疫苗急性毒性
- 野生獾的寄生虫调查
- 1998年
- 獾是近年来迅速发展起来的新兴养殖动物，经济效益高，具有极高药用价值．而寄生虫病对其养殖业的发展有着极大的危害．本试验利用图们动植物检疫局隔离期野生獾３只，进行了寄生虫调查，共检出４种蠕虫和一种虱类．１材料与方法１．１材料由图们动植物检疫局隔离期３只濒...
- 宋建臣吴继秋王军波许应天王牟平
- 关键词：寄生虫调查野生寄生虫病线虫纲动植物检疫
- 荧光定量RT-PCR方法与兔体定型热试验对于检测猪瘟兔化弱毒疫苗的平行关系被引量：10
- 2011年
- 为探讨荧光定量RT-PCR技术与传统兔体定型热试验对于检测猪瘟兔化弱毒疫苗的平行关系,本研究采用荧光定量RT-PCR方法与兔体定型热试验对5份猪瘟兔化弱毒细胞苗成品和6份半成品样品进行平行检测。结果表明,两种检测方法存在正相关性,最低105个病毒拷贝可以使家兔产生定型热反应,最低103个病毒拷贝可以使家兔产生轻热反应。荧光定量RT-PCR检测方法的检测过程仅需3.5 h,大大缩短了猪瘟疫苗的检测时间,该方法可以补充传统的兔体定型热反应用于猪瘟兔化弱毒疫苗半成品与成品的检验。
- 葛叶张兴娟朱庆虎韩秋影王牟平李伟杰孙建宏仇华吉
- 关键词：猪瘟兔化弱毒疫苗荧光定量RT-PCR
