王延
- 作品数：32 被引量：57H指数：5
- 供职机构：新疆畜牧科学院更多>>
- 发文基金：新疆维吾尔自治区高技术研究发展计划项目国家自然科学基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学轻工技术与工程更多>>
- 泰勒虫重组抗原Tams1-spag基因原核表达与纯化
- 2015年
- 为了在低成本的情况下,得到高浓度、高纯度的环形泰勒虫表面重组抗原的融合蛋白,设定表达过程中不同的OD600nm、IPTG浓度与诱导时间,探索最佳表达条件。通过KCl染色法切胶后分别经透析袋电洗脱法与快速离心法回收目的蛋白。对上述试验的蛋白样品进行SDS-PAGE和Western blot检测。结果表明,在OD600nm=1时加入浓度为1mmol/L IPTG,过夜诱导时,重组蛋白的表达量最大。在KCl染色法切胶回收目的条带的基础上,电洗脱法与快速离心法均能得到同等浓度的高纯度目的蛋白,经Western blot检测重组蛋白的生物活性没有改变,仍具有良好的反应原性。
- 任方易忠米晓云魏婕马文戈郭会玲苗书魁汪丽群王延薛英黄炯魏玉荣
- 关键词：环形泰勒虫重组蛋白原核表达蛋白纯化
- 口蹄疫病毒O型、亚洲Ⅰ型二价灭活疫苗的研究
- 2008年
- 对O型口蹄疫病毒OHM/02株和亚洲Ⅰ型口蹄疫病毒AsiaⅠ-KZ/03株进行了部分生物学特性分析,结果表明它们对牛的毒力较强,传代后毒力稳定,OHM/02株半数感染量(ID50)在107.5～108.25/0.2mL,AsiaⅠ-KZ/03株半数感染量(ID50)在106.75～107.5/0.2mL之间,适合做检验用毒;同时该2株毒易感染乳鼠,适应BHK21细胞,对乳鼠毒的半数致死量(LD50)OHM/02株毒在107.0～109.0/0.2mL,AsiaⅠ-KZ/03株毒在107.0～108.5/0.2mL;通过攻毒保护试验证实,病毒的免疫原性良好,制备的细胞毒灭活疫苗均达到3个以上的PD50。通过病毒大规模生产工艺的探索(转瓶培养和悬浮培养)、疫苗佐剂的研究、免疫持续期的监测和安全性等试验,成功研制了口蹄疫病毒O型、亚洲Ⅰ型二价灭活疫苗,获农业部新兽药注册证书。
- 黄炯马文戈朱刚王延徐亚萍薛英胡峻王文杨魁管辉朱子修姜之波季平蒋金林陈菲
- 关键词：口蹄疫二价灭活疫苗
- 环形泰勒虫表面抗原Tasp-Spag1基因串联表达及其蛋白生物信息学分析
- 2015年
- 研究环形泰勒虫表面抗原特性,以原核表达系统串联表达其表面抗原Tasp-Spag1,并对其蛋白进行生物信息学分析。通过PCR技术扩增Tasp-Spag1基因片段后构建重组质粒pET-28a-Tasp-Spag1,IPTG诱导重组蛋白表达,SDS-PAGE、Western blot检测;运用生物信息学软件对Tasp-Spag1基因片段进行分析,并预测其编码蛋白的主要特性与抗原表位。结果显示,扩增得到Tasp-Spag1基因长度为729bp,原核表达后通过SDS-PAGE与Western blot检测显示,得到大小与预期分子质量相当的目的蛋白;生物信息学分析发现,此串联重组蛋白Tasp-Spag1具有236个氨基酸,属于不稳定的非分泌型、非跨膜亲水蛋白,分别具有33个与21个可能的糖基化与磷酸化位点,有三段低复杂性的结构域,并且含有Sorb、NL的同源区域,可能有10个B细胞表位优势区段与7个T细胞表位优势区段,具有两段交叉反应性表位肽。
- 任方易忠米晓云魏婕马文戈郭会玲苗书魁汪立群王延薛英黄炯魏玉荣
- 关键词：环形泰勒虫原核表达生物信息学
- 口蹄疫O型、亚洲Ⅰ型二价灭活疫苗免疫牛的ELISA抗体滴度与攻毒保护的相关性研究被引量：2
- 2011年
- 口蹄疫（FMD）是由口蹄疫病毒（FMDV）引起的偶蹄动物的急性、热性、高接触性传染病。由于猪、牛、羊等主要家畜均可感染此病，并能形成全球大规模流行，所以国际兽疫局（OIE）将该病列为A类家畜传染病之首。
- 刘宏王延朱刚乌斯满江彭飞薛英徐亚萍黄炯
- 关键词：ELISA抗体滴度疫苗免疫家畜传染病攻毒
- 口蹄疫O型、A型和Asia I型三价灭活疫苗研制与产业化应用
- 2014年
- 口蹄疫（Foot-and-mouth disease，FMD）被世界动物卫生组织（OIE）列为A类动物疫病之首，我国将其规定为一类疫病。FMD是偶蹄兽威胁极大、很复杂、非常受重视的传染病。该病一旦暴发，同群畜将被视为发病动物一同扑杀处理。FMD病毒被划分为O、A、C、SAT-1、SAT-2、SAT-3和Asia I共七个血清型，各血清型间无交叉保护性免疫。目前使用的口蹄疫二价（O型和AsiaI型）疫苗或单价疫苗存在成本昂贵等多个问题。
- 黄炯王力俭朱刚魏玉荣郎洪武赵海源马文戈王延易忠王洪巧薛英魏婕
- 关键词：三价灭活疫苗口蹄疫世界动物卫生组织
- 泰勒焦虫表面抗原Tams1、SPAG1和TaSP基因的克隆与表达被引量：3
- 2013年
- 【目的】以真核表达系统串联表达环形泰勒焦虫表面抗原Tams1、SPAG1和TaSP的高免疫原性区片段,为研究焦虫重组串联蛋白免疫原性奠定基础。【方法】以悬浮培养泰勒焦虫细胞为材料,利用SOEingPCR方法将Tams1、SPAG1和TaSP蛋白高免疫原性区基因通过柔性氨基酸串联嵌合在乙型肝炎病毒核心抗原(HBc)的主要免疫优势区,构建模拟表位-HBc嵌合蛋白真核表达质粒,转染BHK-21细胞,通过Western-Blot检测目的基因表达产物。【结果】Western-Blot分析显示,阳性质粒转染BHK-21细胞裂解产物在硝酸纤维素膜上呈现特异性条带,大小与预期分子量相当;正常BHK-21细胞裂解产物未呈现相应的条带。【结论】重组嵌合蛋白在真核表达系统中成功表达。
- 魏玉荣易忠马文戈米晓云陈智魏婕苗书魁薛英王延黄炯
- 关键词：泰勒焦虫表面抗原真核表达
- 羊梭菌病多联灭活疫苗生产用厌氧培养基的研究被引量：3
- 2005年
- 通过多次培养试验 ,研制成功了新的厌氧培养基。该培养基用于羊梭菌病多联灭活疫苗中的产气荚膜梭菌 (B型、D型 )和腐败梭菌的培养 ,细菌的产毒能力和免疫原性均达到了《中华人民共和国兽用生物制品规程》(简称《规程》)的要求 ,配制的疫苗成品检验全部合格。该培养基与《规程》提供的肉肝胃酶消化汤培养基相比 ,配制方法简单 ,节约人力和时间 ,所用试剂均可从市场购买 ,所需原料成本低廉 ,仅为肉肝胃酶消化汤培养基的 2 1 %～ 2 7%。
- 黄炯张读朴乌斯满江徐亚萍朱刚符子华薛英王延
- 关键词：梭菌病产气荚膜梭菌腐败梭菌
- 兽医实验室生物安全管理存在问题及对策被引量：8
- 2019年
- 兽医实验室主要是用于检测动物疫病并深入研究的场所,加强生物安全管理,有利于发挥兽医实验室的作用,降低实验室人员感染几率,控制疫病外泄。该文就加强兽医实验室的生物安全管理进行思考,并提出针对性对策。
- 薛晶杨学云王延艾力西热金映红王俊伟
- 关键词：兽医实验室生物安全管理
- 口蹄疫灭活疫苗对不同亚洲Ⅰ型病毒株的交叉保护效果
- 2011年
- 分别用亚洲Ⅰ型Asia-1 KZ/03毒株和AsiaⅠ/JSL毒株按口蹄疫灭活疫苗相关生产规程配制口蹄疫O型、亚洲Ⅰ型二价灭活疫苗免疫动物,检测2种毒株的攻毒保护效果。结果显示,用Asia-1 KZ/03株病毒配制的口蹄疫O型、亚洲Ⅰ型二价灭活疫苗用同源病毒株攻击,保护效果可达7.05PD50/头份,用异源病毒株Asia1/JSL/GSZY/06攻击,保护效果可达7.19PD50/头份;用AsiaⅠ/JSL株病毒配制的口蹄疫O型、亚洲Ⅰ型二价灭活疫苗对江苏毒同源毒株Asia1/JSL/GSZY/06攻击,保护效果可达7.29 PD50/头份。说明,用Asia-1 KZ/03病毒株制备的疫苗对Asia1/JSL/GSZY/06病毒具有良好的交叉保护效果,可达到同源病毒株制备疫苗的免疫效果。
- 黄炯李一经王力俭朱刚王延刘宏张莉薛英魏玉荣易中魏婕徐亚萍王莉君
- 关键词：口蹄疫灭活疫苗
- 牛O型口蹄疫AD10新型佐剂灭活疫苗免疫持续期试验
- 2011年
- 对自行研发的实验室条件下制备的牛O型口蹄疫AD10新型佐剂灭活苗进行了3个批次疫苗免疫持续期试验,同时设置现行常用的油佐剂灭活苗作为对照组。其评估方法为在首免后每间隔第15天采用液相阻断ELISA试剂盒检测血清中O型口蹄疫抗体水平,并选择在一定免疫时段进行攻毒保护试验以确认疫苗的免疫效果,真实评价牛O型口蹄疫AD10新型佐剂灭活苗免疫牛的免疫持续期和对口蹄疫的抗感染能力。试验结果表明,本次试验AD10佐剂免疫组与现行常用油佐剂组免疫抗体水平和免疫持续期大致相同,对幼畜的免疫程序应在首次免疫60d后进行第二次加强免疫,免疫效果可达到6个月的免疫持续期。
- 易忠符子华黄炯马文戈胡建军魏婕王延魏玉荣胡尔马西朱刚徐亚萍王宾
- 关键词：O型口蹄疫病毒灭活疫苗免疫持续期
