王小华 作品数:9 被引量:10 H指数:3 供职机构: 山东大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 山东省卫生厅科技基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
变形链球菌GBR基因表达载体的构建和GBR融合蛋白抗体的制备 王小华关键词:变形链球菌 葡糖基转移酶 龋病 疫苗 二价双启动子防龋DNA疫苗的构建及鉴定 被引量:3 2007年 目的:构建并鉴定具有在真、原核细胞中均可表达目的抗原并具备强免疫原性、针对致龋菌变形链球菌2种主要毒力因子的DNA疫苗。方法:利用PCR技术从载有变形链球菌gtfB基因的质粒中扩增葡聚糖结合区段(CBR)基因片断;将合成的组织纤溶酶原信号肽序列(tPA-SP)连接到GBR基因的上游;再将此基因(sGBR)定向克隆到载有sSBR基因的双启动子真核表达载体pCN-SSIE上,构建出pCN-SSISG;对重组质粒pCN-SSISG进行酶切图谱分析和DNA序列测定。结果:酶切图谱分析显示,PCR扩增的及插入到pCN-SSIE中的目的基因sGBR片断大小与预期相符; DNA序列测定结果确定:重组质粒pCN-SSISG开放性阅读框架和插入的信号肽序列均正确。结论:成功构建了具有在真核、原核宿主细胞均可表达的具有双启动子的质粒pCN-SSISC。 王小华 姜广水 吴钦贞 姜萍萍 刘浩 江浩关键词:双启动子 DNA疫苗 龋病 变形链球菌 pIRES-BMP2治疗牙髓暴露的实验研究 被引量:1 2005年 将编码骨形成蛋白2(BM P 2)的cDNA克隆至真核表达质粒,构建含BM P 2基因的真核表达质粒pIRES-BM P 2,并导入狗牙露髓处(观察组),设生理盐水空白对照组(对照Ⅰ组)及氢氧化钙盖髓的阳性对照组(对照Ⅱ组),应用组织学方法观察发现修复性骨性牙本质(OD)形成明显,效果优于对照组。证明质粒为载体BM P转移用于治疗牙髓暴露盖髓保存牙髓活力,可在一定时间内持续产生BM P,有效增强露髓处OD的形成。 邵长艳 吴钦贞 姜广水 张士灵 王小华 刘浩关键词:牙髓暴露 质粒 重组人骨形成蛋白 增强防龋DNA疫苗黏膜免疫的递送系统和佐剂 被引量:3 2006年 DNA疫苗作为一种新的理论和技术,因其与传统疫苗比较具有诸多优点而为通过免疫接种更有效地防治疾病带来了新的希望。通过黏膜途径作免疫接种具有经济、简便的特点,可刺激产生黏膜免疫系统的效应部位能分泌保护性抗体sIgA,是通过免疫接种防治龋病及其他感染性口腔疾病的物质基础,通过黏膜免疫途径接种防龋疫苗将有望成为免疫防龋的主要方式。为了增加防龋DNA疫苗的抗原性,诱导唾液特异slgA产生,对如何提高防龋DNA的黏膜免疫反应做了大量的研究工作,本文就此作一简要综述。 王小华 姜萍萍 姜广水 吴钦贞关键词:龋病 DNA疫苗 黏膜免疫 佐剂 一种固化土预制桩成桩设备与成桩工艺 本发明涉及固化土预制桩技术领域,提出了一种固化土预制桩成桩设备与成桩工艺,成桩设备包括上料斗、成桩模具、吊运机构以及挤压机构,吊运机构包括钢架、吊运导轨和吊钩,吊运导轨固定在钢架的顶部,所述吊钩滑动设置在吊运导轨上,吊钩... 刘强 王育奎 王小华 张乾青 杜相波 邬艳 刘景航 高树增 邹辰浩变形链球菌GBR基因表达载体的构建及重组GBR蛋白免疫动物的实验研究 目的:构建变形链球菌葡糖基转移酶葡聚糖结合区段(GBR)基因的表达载体及探讨重组GBR蛋白的免疫原性。方法: 通过PCR、T-A克隆等技术构建GBR基因表达载体pTriEx-4-GBR,对所构建的表达载体进行DNA序列测... 王小华 姜广水 吴钦贞 姜萍萍 耿昭 张冰关键词:龋病 变形链球菌 葡糖基转移酶 文献传递 重组GBR蛋白免疫动物的实验研究 被引量:3 2006年 目的:构建变形链球菌葡糖基转移酶葡聚糖结合区段(GBR)基因的表达载体,探讨重组GBR蛋白的免疫原性。方法:通过PCR、T-A克隆等技术,构建GBR基因表达载体pTriEx-4-GBR,对所构建的表达载体进行DNA序列测定和酶切图谱分析;IPTG诱导pTriEx-4-GBR中目的基因在大肠杆菌JM109(DE3)表达,纯化、浓缩重组GBR蛋白;Balb/c小鼠随机分为2组:实验组用重组GBR蛋白经皮下注射免疫,对照组用生理盐水代替重组GBR蛋白;ELISA法检测小鼠血清抗GBR特异性抗体;用统计软件PEMS3.0对数据进行处理。结果:载有GBR目的基因的表达质粒pTriEx-4-GBR序列及读码框架正确;诱导表达获得的重组GBR蛋白浓度和纯度均较高;用该重组蛋白对小鼠作皮下接种免疫后,诱导产生血清抗GBR特异IgG显著应答(P<0.005)。结论:表达载体pTriEx-4-GBR构建成功,所获得的重组GBR蛋白能诱导小鼠特异免疫应答,为进行进一步相关实验研究奠定了基础。 王小华 姜广水 吴钦贞 姜萍萍 耿昭 张冰关键词:龋病 变形链球菌 葡糖基转移酶 二价双启动子防龋DNA疫苗的构建及鉴定 目的:构建并鉴定具有在真、原核细胞中均可表达目的抗原而具备强免疫原性、针对致龋菌变形链球菌两种主要毒力因子的DNA疫苗。方法:利用PCR技术从载有变形链球菌gtfB基因的质粒中扩增葡聚糖结合区段(GBR)基因片断;将合成... 王小华 姜广水 吴钦贞 姜萍萍 刘浩 江浩关键词:双启动子 DNA疫苗 龋病 变形链球菌 文献传递 变形链球菌GBR基因表达载体的构建及GBR融合蛋白抗体的制备 背景与目的:龋病是人类最普遍的感染性疾病之一,其中变形链球菌被认为是主要的致龋菌。变形链球菌在牙面的粘附、聚集是其致龋作用的第一步,也是最为重要的一步。通过主动或被动免疫来封闭、失活变形链球菌菌体表面参与粘附和聚集的毒力... 王小华关键词:变形链球菌 葡糖基转移酶 龋病 疫苗 文献传递